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今年度は、前年度までにHMGA2の下流遺伝子として同定したPlag1の機能解析を行った。
in vivoでPlag1の機能を解析するために、in utero electroporation法を用いてin vivo神経幹細胞にPlag1の過剰発現ベクターあるいはノックダウンベクターを遺伝子導入し、その後FACSにより遺伝子導入された神経幹細胞を回収し、遺伝子発現解析を行った。その結果、興味深いことにPlag1を過剰発現してもノックダウンしてもニューロン分化関連遺伝子の発現が抑制されることがわかった。この結果はPlag1が神経幹細胞のニューロン分化に重要な役割を果たしていることを示唆する。
また、同様にマイクロアレイ解析とGO解析によりPlag1の機能を検討した結果、Plag1ノックダウンにより細胞周期関連遺伝子が減少し、細胞死関連遺伝子が増加することがわかった。この結果は、Plag1が神経幹細胞の生存や増殖に必須の役割を果たすことを示唆する。以上のように、本年度はPlag1の機能解析を行い、HMGA2の下流で神経幹細胞の分化や生存に重要であることを示唆する結果を得ることができた。
HMGA2の下流のイベントを探索することにより、これまでにIgf2bp2やPlag1など神経幹細胞の運命を司る新規因子を発見することができた。いずれも近年幹細胞やがん細胞において重要な役割を果たすことが知られてきており、本研究は神経にとどまらない細胞制御機構を明らかにすることができたと考えている。
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