研究実績の概要 |
プラシノ藻の一部では,クリプト藻が有するエジェクトソームに類似したロール状のリボン様構造が観察される。これまで,プラシノ藻が有するエジェクトソーム様構造の分子同定はなされていない。本研究では,プラシノ藻Pyramimonas parkeaeが有するエジェクトソーム様構造の分子同定を目的とした。 リボン様構造精製分画のTricine-SDS-PAGE解析から,リボン様構造は分子量13 kDa~17.5 kDaの複数のタンパク質とトルイジンブルーによって染色される分子量約1.7 kDa~4.6 kDaの複数の低分子酸性多糖物質から成ることが予測された。検出されたタンパク質のN末端解析およびウェスタン解析は,これらがコアヒストン(histone H3, H2A, H2B, H4)であることを明らかにした。免疫染色による局在解析は,明らかに,コアヒストンがリボン様構造に局在することを明らかにした。また,リボン様構造の単糖組成分析およびlysozymeによる分解特性から,リボン様構造がβ(1-4) 結合のN-acetyl-glucosamineを含む多糖から成ることを明らかにした。さらに,この多糖とリコンビナント8量体コアヒストンを用いたin vitroでの再構築実験から,コアヒストンがリボン様構造の重要な構成タンパク質であることを明らかにした。
|