| 研究課題/領域番号 |
25850193
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| 研究機関 | 一般財団法人日本生物科学研究所 |
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研究代表者 |
稲吉 勇仁 一般財団法人日本生物科学研究所, その他部局等, 研究員 (70597963)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2017-03-31
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| キーワード | 鶏伝染性気管支炎ウイルス / 生ワクチン / リバースジェネティクス / コロナウイルス |
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| 研究実績の概要 |
鶏伝染性気管支炎ウイルス（IBV）の高頻度の遺伝子変異により、その主要中和抗原であるSタンパク質は血清型多様性を示し、交差防御も乏しいことから単一のワクチンによる防御は困難である。現在の養鶏業界では、一羽の鶏に対して複数の血清型の異なるIBVワクチン接種に加え、様々な感染症に対するワクチン接種が行なわれていることから、IBVの血清型多様性ならびに鶏ワクチンの多価化に対応する次世代IBVワクチンの研究開発が必要である。本研究はIBVクローンウイルス作製技術を基盤として遺伝子組換えウイルスを作製することで、次世代組換えIBVワクチンならびにIBVをウイルスベクターとする組換え多価鶏ウイルスワクチンの構築を目的としている。
平成26年度は、IBVクローン（弱毒株）の構造タンパク質遺伝子を、野外分離株（強毒株）の同領域と入れ替えて作製された組換えIBVを用いて、鶏免疫試験を行い、組換えウイルスの性状解析ならびに中和交差の検討を行った。その結果、野外分離株の構造タンパク質遺伝子が組み込まれた組換えIBVは、弱毒性および免疫原性を保持しており、得られた抗血清は、組換えに用いられた野外分離株に対して高い中和活性を示した。この手法は、次世代IBVワクチン作製の基盤となる技術であり、上記成果により本システムが有用であることが示された。
遺伝子型の異なる3株のIBVについて、強毒および弱毒株の全ゲノムシークエンス解析により遺伝子変異部位の探索を行い、IBVの病原性関連遺伝子の同定を試みたところ、いくつかの候補遺伝子を同定した。今後、さらに候補遺伝子を絞り込む予定である。IBVに関しては、病原性に関わる遺伝子が明らかになっておらず、本研究は、病原性関連遺伝子の同定ならびにIBVの長期継代による弱毒化の機構解明に繋がり、今後のワクチン開発に重要な知見となることが期待される。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
IBVクローンの構造タンパク質遺伝子を野外分離株の同領域と入れ替えることで、弱毒性を維持し、組換えに用いた野外株の中和活性を付与することに成功したことから、新規組換えIBVワクチン作製技術の基盤となるシステムが確立された。一方、病原性関連遺伝子に関しては、未だ同定には至っていないが、3株の弱毒および強毒株の全ゲノムシークエンスが完了し、病原性に関わる候補遺伝子を絞り込むことができた。以上の点から、おおむね順調に進展していると判断した。
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| 今後の研究の推進方策 |
平成27年度は引き続き、病原性関連候補遺伝子の組換えIBVを作製し、ウイルス性状解析によって病原性関連遺伝子の同定を行う予定である。また、昨年度に確立された構造タンパク質遺伝子組換えIBV作製技術が応用可能か検討するため、現在野外で流行している株を用いて、組換えIBVを作製し、新規ワクチン株の構築を試みる。一方、組換え多価ウイルスワクチンの構築に関しては、GFP 等の蛍光タンパク質遺伝子あるいは鶏病原性ウイルスの中和抗原をIBVベクターに導入し、組換えウイルスベクターの構築を試みる。
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