研究課題/領域番号 |
25850225
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研究種目 |
若手研究(B)
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研究機関 | 独立行政法人農業・食品産業技術総合研究機構 |
研究代表者 |
松山 秀一 独立行政法人農業・食品産業技術総合研究機構, 畜産草地研究所 家畜飼養技術研究領域, 主任研究員 (50455317)
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研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2015-03-31
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キーワード | ウシ / 子宮 / 幹細胞 |
研究概要 |
ウシにおいては、分娩を機に受胎率が低下することが知られているが、その原因については未だ解明されていない。分娩時には、胎子の娩出とともに胎盤が剥離し、子宮は大きく損傷を受ける一方で、その後速やかに子宮内膜が再生され、子宮の修復がおこる。申請者は、経産牛における受胎率の低下は、分娩後の子宮内膜再生の不具合に原因があるのではないかと着想した。本研究では、ウシの分娩後における子宮内膜再生メカニズムを明らかにする第一歩として、ウシの子宮内膜に幹細胞が存在することを明らかにするとともにその分化能について検討することを目的とする。ウシ子宮内膜上皮細胞の培養細胞(P1)を用い、DNA染色剤Hoechst33342にて染色後、フローサイトメーターを用いてSide Population (SP) 画分を得た。得られたSP画分がABCトランスポーターの阻害剤で消失したことから、ウシにおいても子宮内膜幹細胞が存在する可能性が示された。ウシ子宮内膜上皮細胞におけるSP細胞と非SP細胞の遺伝子発現についてマイクロアレイ解析により比較した結果、ウシ子宮内膜上皮細胞におけるSP細胞では組織・上皮増殖や細胞接着、免疫機能に関わる遺伝子の発現量が高く、ヒトの子宮内膜上皮SP細胞における遺伝子発現パターンに近いことが明らかとなった。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
ウシ子宮内膜上皮細胞では、SP細胞の割合がヒト子宮内膜上皮細胞に比べ低かったため、ソーティングによって得られるSP細胞の数が非常に少なく、ウシ子宮内膜上皮SP細胞のin vitro培養系が確立できずに研究の進行が遅れている。
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今後の研究の推進方策 |
今年度はより多くのウシ子宮内膜上皮細胞を用いてSP細胞のソーティングを行い、ウシ子宮内膜SP細胞のin vitro培養および多分化能の検討を行うとともに、当初予定していた、ウシ子宮内膜SP細胞の自己組織構築能および子宮内膜再性能の検討を行う予定である。
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次年度の研究費の使用計画 |
前年度は研究の進行が遅れたため、予定していた研究費の遂行ができず研究費の繰り越しが生じた。 今年度は、前年度行えなかった実験を行うとともに、当初予定していた研究を行う。研究計画や研究費の執行に大きな変更はなく、平成26年度配分額のうち、120万円を一般試薬、消耗品費に、30万円を実験補助員の賃金、10万円を学会発表等の旅費に用いる予定である。
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