プロテオグリカンによる下垂体前葉細胞の形態・機能調節機構の解明

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25860148
• 研究機関: 杏林大学
• 研究代表者: 堀口 幸太郎 杏林大学, 保健学部, 講師 (10409477)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: 下垂体前葉 / 濾胞星状細胞 / S100βタンパク陽性細胞 / プロテオグリカン / 樹状細胞

研究実績の概要

１．ラット下垂体前葉細胞の一つである濾胞星状細胞は、S100βタンパクを発現することで同定される非ホルモン産生細胞である。この濾胞星状細胞は細胞外マトリックスの一種であるプロテオグリカンを発現することでも特徴づけられる。さらにこの濾胞星状細胞はheterogeneity性が高く様々な性質の細胞が総称されてそう呼ばれている。申請者はそのheterogeneity性を分離する方法として細胞外マトリックスの基底膜成分であるラミニンとの親和性に着目し、ラミニンと接着性の強い濾胞星状細胞（プロセスタイプ）と弱い細胞（ラウンドタイプ）に分類できることを見出して、それぞれを簡単にピペッティング操作によって単離する方法を発見した。そして単離した細胞を使い、マイクロアレイ解析を行うことで差次的遺伝子発現を網羅的に行った。そしてプロセスタイプがプロテオグリカンを発現する濾胞星状細胞であることを証明した。
２．プロテオグリカンを発現しないラウンドタイプからケモカインの一つであるCXCL10が発現することを分子生物学的手法、初代培養、in situ hybridization法を用いて明らかにし、ラウンドタイプの濾胞星状細胞は樹状細胞様であることを証明した。
３．プロテオグリカンを発現しないラウンドタイプがプロトンレセプターを発現し、細胞周囲酸性環境を受容することで、炎症性サイトカインインターロイキン6（IL-6）を産生すること、さらにIL-6はACTH産生細胞に作用し、そのACTHの前駆遺伝子であるPOMC発現の抑制を引き起こすことを明らかにした。
以上から、プロテオグリカンを発現しないラウンドタイプの濾胞星状細胞は周囲ストレスを受容することでACTH産生を局所的に調節する樹状細胞様の性質と機能を持った細胞であることを明らかにした。

備考

杏林大学保健学部教員紹介
http://www.kyorin-u.ac.jp/univ/faculty/health/staff/detail.php?id=hea40212

研究成果

• [雑誌論文] Isolation of dendritic cell-like S100β-positive cells in rat anterior pituitary gland. (2014)
  • 著者名/発表者名: Horiguchi K, Fujiwara K, Yoshida S, Higuchi M, Tsukada T, Kanno N, Yashiro T, Tateno K, Ohsako S, Kato T, Kato Y
  • 雑誌名: Cell and Tissue Research 巻: 357 ページ: 301-308
  • DOI: 10.1007/s00441-014-1817-9
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Expression of chemokine CXCL10 in dendritic cell-like S100β-positive cells in rat anterior pituitary gland. (2014)
  • 著者名/発表者名: Horiguchi K, Fujiwara K, Higuchi M, Yoshida S, Tsukada T, Ueharu H, Hasegawa R, Takigami S, Ohsako S, Yashiro T, Kato T, Kato Y
  • 雑誌名: Cell and Tissue Research 巻: 357 ページ: 757-765
  • DOI: 10.1007/s00441-014-1864-2
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Proton receptor GPR68 expression in dendritic cell-like S100β-positive cells of rat anterior pituitary gland: GPR68 induces interleukin-6 gene expression in extracellular acidification. (2014)
  • 著者名/発表者名: Horiguchi K, Higuchi M, Yoshida S, Nakakura T, Tateno K, Hasegawa R, Takigami S, Ohsako S, Kato T, Kato Y
  • 雑誌名: Cell and Tissue Research 巻: 358 ページ: 515-525
  • DOI: 10.1007/s00441-014-1958-x
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] 下垂体前葉内に存在するS100βタンパク陽性細胞のサブタイプの単離とその機能解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 堀口幸太郎、舘野こずえ、長谷川瑠美、瀧上周、大迫俊二
  • 雑誌名: 杏林医学会誌 巻: 45 ページ: 137-143
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] In situ hybridization analysis of the temporospatial 1 expression of the midkine/pleiotrophin family in rat embryonic pituitary gland. (2014)
  • 著者名/発表者名: Fujiwara K, Maliza R, Tofrizal A, Batchuluun K, Ramadhani D, Tsukada T, Horiguchi K, Kikuchi M, Yashiro T
  • 雑誌名: Cell and Tissue Research 巻: 357 ページ: 337-344
  • DOI: 10.1007/s00441-014-1875-z
  • 査読あり
• [雑誌論文] Molecular Cloning of Rat and Porcine Retina-Derived POU Domain Factor 1 (POU6F2) from Pituitary cDNA Library (2014)
  • 著者名/発表者名: Yoshida S, Ueharu H, Higuchi M, Horiguchi K, Nishimura N, Shibuya S, Mitsuishi H, Kato T, Kato Y
  • 雑誌名: Journal of Reproduction and Development 巻: 60 ページ: 288-294
  • DOI: 10.1262/jrd.2014-023
  • 査読あり
• [雑誌論文] Folliculostellate cells are required for laminin release from gonadotrophs in rat anterior pituitary. (2014)
  • 著者名/発表者名: Tsukada T, Fujiwara K, Horiguchi K, Azuma M, Ramadhani D, Tofrizal A, Batchuluun K, Maliza R, Syaidah R, Kikuchi M, Yashiro T
  • 雑誌名: Acta histochemica et cytochemica 巻: 47 ページ: 239-245
  • DOI: 10.1267/ahc.14036
  • 査読あり
• [雑誌論文] Expression of the heparin-binding growth factor midkine and its receptor, Ptprz1, in adult rat pituitary. (2014)
  • 著者名/発表者名: Fujiwara K, Horiguchi K, Maliza R, Tofrizal A, Batchuluun K, Ramadhani D, Syaidah R, Tsukada T, Azuma M, Kikuchi M, Yashiro T
  • 雑誌名: Cell and Tissue Research 巻: 359 ページ: 909-914
  • DOI: 10.1007/s00441-014-2073-8
  • 査読あり
• [学会発表] 下垂体前葉内S100タンパク質陽性細胞から分泌されるケモカインCXCL10はCRF刺激性ACTH分泌を抑制する (2015)
  • 著者名/発表者名: 堀口幸太郎、吉田彩舟、藤原研、樋口雅司、塚田岳大、加藤たか子、舘野こずえ、長谷川瑠美、瀧上 周、大迫俊二、屋代 隆、加藤幸雄
  • 学会等名: 第88回日本内分泌学会学術総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2015-04-23
• [学会発表] 下垂体における神経堤由来細胞とS100βの発現． (2015)
  • 著者名/発表者名: 上春浩貴、吉田彩舟、西村直人、樋口雅司、堀口幸太郎、加藤たか子、加藤幸雄
  • 学会等名: 第119回日本畜産学会
  • 発表場所: 宇都宮
  • 年月日: 2015-03-28
• [学会発表] 下垂体特異的転写因子PROP1 のプロモーター活性とその制御． (2015)
  • 著者名/発表者名: 西村直人，上春浩貴，西原大翔，渋谷汐里，吉田彩舟，樋口雅司，堀口幸太郎，加藤たか子，加藤幸雄
  • 学会等名: 第119回日本畜産学会
  • 発表場所: 宇都宮
  • 年月日: 2015-03-28
• [学会発表] 下垂体前葉内S100タンパク質陽性細胞から分泌されるケモカインCXCL10のIFN-γによる制御． (2014)
  • 著者名/発表者名: 堀口幸太郎，吉田彩舟，藤原研，樋口雅司，塚田岳大，加藤たか子，舘野こずえ，長谷川瑠美，瀧上 周，大迫俊二，屋代 隆，加藤幸雄
  • 学会等名: 第41回日本神経内分泌学会学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2014-11-01
• [学会発表] 樹状細胞様S100タンパク質陽性細胞から分泌されるケモカインCXCL10の機能解析． (2014)
  • 著者名/発表者名: 堀口幸太郎，吉田彩舟，藤原研，樋口雅司，塚田岳大，加藤たか子，舘野こずえ，長谷川瑠美，瀧上 周，大迫俊二，屋代 隆，加藤幸雄
  • 学会等名: 第29回日本下垂体研究会学術集会
  • 発表場所: 八王子
  • 年月日: 2014-08-09
• [学会発表] ラット下垂体前葉におけるtissue inhibitor of metalloproteinase発現細胞の同定． (2014)
  • 著者名/発表者名: 東 森生，Khongorzul Batchuluun，堀口幸太郎，屋代 隆
  • 学会等名: 第29回日本下垂体研究会学術集会
  • 発表場所: 八王子
  • 年月日: 2014-08-09
• [備考]
  • URL: http://www.kyorin-u.ac.jp/univ/faculty/health/staff/detail.php?id=hea40212