新規薬物療法の開発を含めた進行再発大腸癌の治療戦略構築

2013 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 25860409
• 研究種目: 若手研究(B)
• 研究機関: 岡山大学
• 研究代表者: 楳田 祐三 岡山大学, 大学病院, 助教 (10573735)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: 大腸癌 / 大腸癌肝転移 / 遺伝子解析

研究概要

平成25年度は大腸癌原発巣・肝転移巣サンプル収集およびGenetic/Epigenetic解析を行った。特に原発巣切除施行されたStageII・IIIかつ術後3年以上経過している症例およびStageIVを中心にGenetic/Epigenetic解析を行っており、MGMT遺伝子に関しては解析を終了した。
MGMT発現を認める大腸癌細胞株を用いたO6BGの抗腫瘍効果の検討では，RKO、HT29を対象に（HCT116/SW48/SW480はControlとする）、MGMTが拮抗されるための最小O6BG濃度の検討を行い、その濃度を用いて抗腫瘍効果の検討を行った。また、O6BG自体の毒性を確認するためにMGMTをsiRNAにてknock downも行い同様の検討を行った。
この結果，驚くべきことにｍsiRNA. O6BGのどちらでもMGMTを不活性化した場合、G1　arrestを引き起こす蛋白の有意な発現上昇が認められた。これがMGMT不活性癌の予後良好の原因と示唆された。MSI/KRAS/BRAF statusの異なる大腸癌原発巣miRNA網羅的解析による新規Biomarkerの探索を行い、予後不良関連因子の同定を行った。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

現在までに収集され、予後の確認できている大腸癌原発巣・肝転移巣200例以上を対象にMGMT promoter領域を中心とした新規Epigenetic Prognostic Biomarker候補群のメチル化解析を行い、retrospectiveに予後・再発・薬剤感受性・臨床病理結果との比較検討を行うことによって、Epigenetic Biomarker候補群のBiomarkerとしての意義の確認を行う研究に関してはMGMTの解析はすべて終了している。このため，達成度は50%と判定した。また，MGMT発現を認める大腸癌細胞株を選別し、O6BGの抗腫瘍効果の検討および既存殺細胞剤、分子標的薬との組み合わせによる新規大腸癌治療法の構築を行う研究に関しても，O6BGの抗腫瘍効果の検討は終了している。達成度は50%と考えている。

今後の研究の推進方策

MSI/KRAS/BRAF statusの異なる大腸癌原発巣・肝転移巣を用いたmiRNA網羅的解析による新規Biomarkerの探索を行う研究であるが，これら候補因子は平成26年度に詳細な解析を行う予定である。また，平成26年度は，原発巣切除施行されたStageII・IIIかつ術後3年以上経過している症例およびStageIVを中心にMLH1, p16, MINT31, SFRP2, RASSF2, DCC, HPP1の解析を継続する予定である。MGMT発現を認める大腸癌細胞株を選別し、O6BGの抗腫瘍効果の検討および既存殺細胞剤、分子標的薬との組み合わせによる新規大腸癌治療法の構築を行う研究に関しては，O6BGだけでも十分な抗腫瘍効果を認めている。既存殺細胞剤併用も検討するが，O6BG単剤での適応を視野に入れたin vivo研究を行う必要がある。

次年度の研究費の使用計画

大腸癌原発巣・肝転移巣サンプル収集およびGenetic/Epigenetic解析を行う中で、リアルタイムPCR、細胞培養に用いる抗体・試薬の購入を予定していたが、予定よりも少ない量で順調に結果が得られたために次年度繰越の研究費発生した。
今後は、既存殺細胞剤の併用についての基礎実験，および新規抗腫瘍薬として期待されるO6BG単剤を用いたin vivo実験を行うことに費用がかかるために、繰り越した研究費を充てる予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Poor prognosis of KRAS or BRAF mutant colorectal liver metastasis without microsatellite instability. (2013)
  • 著者名/発表者名: Umeda Y, Nagasaka T, Mori Y, Sadamori H, Sun DS, Shinoura S, Yoshida R, Satoh D, Nobuoka D, Utsumi M, Yoshida K, Yagi T, Fujiwara T
  • 雑誌名: J Hepatobiliary Pancreat Sci 巻: 20（2） ページ: 223-233
  • DOI: 10.1007/s00534-012-0531-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] Risk factors for acute renal injury in living donor liver transplantation: evaluation of the RIFLE criteria． (2013)
  • 著者名/発表者名: Utsumi M, Umeda Y, Sadamori H, Nagasaka T, Takaki A, Matsuda H, Shinoura S, Yoshida R, Nobuoka D, Satoh D, Fuji T, Yagi T, Fujiwara T
  • 雑誌名: Transpl Int 巻: 26（8） ページ: 842-852
  • DOI: 10.1111/tri.12138.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Serial changes of serum growth factor levels and liver regeneration after partial hepatectomy in healthy humans. (2013)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto K, Miyake Y, Umeda Y, Matsushita H, Matsuda H, Takaki A, Sadamori H, Nouso K, Yagi T, Fujiwara T, Yamamoto K.
  • 雑誌名: Int J Mol Sci 巻: 17（14） ページ: 20877-20889
  • DOI: 10.3390/ijms141020877.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Which patients respond best to hepatitis B vaccination after a hepatitis B virus-related liver transplantation? (2013)
  • 著者名/発表者名: Takaki A, Yagi T, Yasunaka T, Sadamori H, Shinoura S, Umeda Y, Yoshida R, Sato D, Nobuoka D, Utsumi M, Yasuda Y, Nakayama E, Miyake Y, Ikeda F, Shiraha H, Nouso K, Fujiwara T, Yamamoto K.
  • 雑誌名: J Gastroenterol 巻: 48(12) ページ: 1373-1383
  • DOI: 10.1007/s00535-013-0763-8.
  • 査読あり
• [雑誌論文] New surgical approach to large splenorenal shunt in living donor liver transplantation: diversion of SMV and SPV blood flow. (2013)
  • 著者名/発表者名: Sadamori H, Yagi T, Shinoura S, Umeda Y, Yoshida R, Satoh D, Nobuoka D, Utsumi M, Fujiwara T.
  • 雑誌名: J Gastrointest Surg. 巻: 17(2) ページ: 403-407
  • DOI: 10.1007/s11605-012-2006-3
  • 査読あり
• [雑誌論文] Risk factors for organ/space surgical site infection after hepatectomy for hepatocellular carcinoma in 359 recent cases. (2013)
  • 著者名/発表者名: Sadamori H, Yagi T, Shinoura S, Umeda Y, Yoshida R, Satoh D, Nobuoka D, Utsumi M, Yoshida K, Fujiwara T.
  • 雑誌名: J Hepatobiliary Pancreat Sci. 巻: 20(2) ページ: 186-196
  • DOI: 10.1007/s00534-011-0503-5
  • 査読あり
• [雑誌論文] Advanced hepatocellular carcinoma with lymph node metastases showing epithelial to mesenchymal transition effectively treated with systemic chemotherapy: Report of a case. (2013)
  • 著者名/発表者名: Sadamori H, Yagi T, Shigeyasu K, Umeda Y, Sugihara M, Yokomichi N, Ohara T, Nishida N, Nagasaka T, Goel A, Fujiwara T.
  • 雑誌名: Hepatol Res 巻: 43(12) ページ: 1368-73.
  • DOI: 10.1111/hepr.12080.
  • 査読あり
• [雑誌論文] CD14 upregulation as a distinct feature of non-alcoholic fatty liver disease after pancreatoduodenectomy. (2013)
  • 著者名/発表者名: Satoh D, Yagi T, Nagasaka T, Shinoura S, Umeda Y, Yoshida R, Utsumi M, Tanaka T, Sadamori H, Fujiwara T.
  • 雑誌名: World J Hepatol. 巻: 27;5(4) ページ: 189-95
  • DOI: 10.4254/wjh.v5.i4.189.
  • 査読あり
• [雑誌論文] First successful case of simultaneous liver and kidney transplantation for patients with chronic liver and renal failure in Japan. (2013)
  • 著者名/発表者名: Yagi T, Nobuoka D, Shinoura S, Umeda Y, Sato D, Yoshida R, Utsumi M, Fuji T, Sadamori H, Fujiwara T.
  • 雑誌名: Hepatol Res. 巻: 44(3): ページ: 358-63
  • DOI: 10.1111/hepr.12122
  • 査読あり
• [雑誌論文] Bloodless donor hepatectomy in living donor liver transplantation: counterclockwise liver rotation and early hanging maneuver. (2013)
  • 著者名/発表者名: Sadamori H, Yagi T, Shinoura S, Umeda Y, Yoshida R, Satoh D, Nobuoka D, Utsumi M, Yoshida K, Fujiwara T.
  • 雑誌名: J Gastrointest Surg 巻: 17(1) ページ: 203-6
  • DOI: 10.1007/s11605-012-1907-5.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Living donor liver transplantation to a survivor of liver resection for hepatocellular carcinoma with major portal vein invasion. (2013)
  • 著者名/発表者名: Sadamori H, Yagi T, Shinoura S, Umeda Y, Yoshida R, Sato D, Nobuoka D, Utsumi M, Fujiwara T.
  • 雑誌名: Acta Med Okayama 巻: 67(2) ページ: 117-21
  • 査読あり
• [学会発表] 遺伝子情報によるバイオマーカーを用いたStage IV大腸癌の治療戦略の構築 (2013)
  • 著者名/発表者名: 稲田 涼，永坂岳司，母里淑子，楳田祐三，竹原裕子，森川達也，吉田一博，竹原清人，久保田暢人，近藤喜太，浅野博昭，佃 和憲，貞森 裕，八木孝仁，藤原俊義
  • 学会等名: 第75回日本臨床外科学会総会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 20131121-20131123
• [学会発表] 肝移植・肺移植における移植後二次発癌 (2013)
  • 著者名/発表者名: 楳田祐三，八木孝仁，大藤剛宏，保田裕子，中谷 文，三好新一郎，藤原俊義
  • 学会等名: 第51回日本癌治療学会学術集会
  • 発表場所: 京都市
  • 年月日: 20131024-20131026
• [学会発表] 便中メチル化CpG検出による消化器癌診断 (2013)
  • 著者名/発表者名: 永坂岳司，吉田一博，森川達也，母里淑子，横道直祐，久保田暢人，竹原祐子，稲田 涼，楳田祐三，西崎正彦，香川俊輔，西田直生志，貞森 裕，八木孝仁，藤原俊義
  • 学会等名: 第51回日本癌治療学会学術集会
  • 発表場所: 京都市
  • 年月日: 20131024-20131026
• [学会発表] 大腸癌根治切除後の予後因子としてのMGMTプロモーターメチル化 (2013)
  • 著者名/発表者名: 母里淑子，永坂岳司，楳田祐三，稲田 涼，重安邦俊，竹原裕子，森川達也，久保田暢人，横道直佑，吉田一博，藤 智和，河合 毅、杭瀬 崇，貞森 裕，藤原俊義
  • 学会等名: 第51回日本癌治療学会学術集会
  • 発表場所: 京都市
  • 年月日: 20131024-20131026
• [学会発表] 遺伝子情報によるバイオマーカーを用いた進行・再発大腸癌の検討および治療戦略の確立 (2013)
  • 著者名/発表者名: 稲田 涼，永坂岳司，母里淑子，楳田祐三，竹原裕子，森川達也，吉田一博，久保田暢人，横道直佑，近藤喜太，浅野博昭，佃 和憲，貞森 裕，八木孝仁，藤原俊義
  • 学会等名: 第51回日本癌治療学会学術集会
  • 発表場所: 京都市
  • 年月日: 20131024-20131026
• [学会発表] TREATMENT STRATEGY FOR COLORECTAL LIVER METASTASIS BASED ON GENETIC PROFILES (2013)
  • 著者名/発表者名: Umeda Y, Nagasaka T, Mori Y, Sadamori H, Shinoura S, Yoshida R, Nobuoka D, Utsumi M, Takagi K, Yagi T, Fujiwara T
  • 学会等名: 21st United European Gastroenterology Week
  • 発表場所: Berlin、ドイツ
  • 年月日: 20131012-20131016
• [学会発表] FREQUENCY OF REGULATORY T CELL AND HCV ANTIGEN SPECIFIC IMMUNE RESPONSE IN RECURRENT HEPATITIS C AFTER LIVER TRANSPLANTATION (2013)
  • 著者名/発表者名: Utsumi M, Takaki A, Koike K, Umeda Y, Nobuoka D, Yoshida R, Shinoura S, Sadamori H, Fujiwara T, Yagi T
  • 学会等名: 21st United European Gastroenterology Week
  • 発表場所: Berlin、ドイツ
  • 年月日: 20131012-20131016
• [学会発表] 大腸癌予後因子としてのMGMTプロモーターメチル化 (2013)
  • 著者名/発表者名: 母里淑子，永坂岳司，楳田祐三，稲田 涼，重安邦俊，竹原裕子，森川達也，久保田暢人，佃 和憲，Ajay Goel，藤原俊義
  • 学会等名: 第72回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20131003-20131005
• [学会発表] 同時性多発大腸癌のsomatic mutation spectrumに対する検証 (2013)
  • 著者名/発表者名: 森川達也，永坂岳司，玉川浩司，母里淑子，竹原清人，竹原裕子，吉田一博，稲田 涼，久保田暢人，楳田祐三，貞森 裕，藤原俊儀
  • 学会等名: 第72回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20131003-20131005
• [学会発表] サイトケラチン19は肝細胞癌の新規予後予測マーカーである (2013)
  • 著者名/発表者名: 横道直佑，永坂岳司，西田直生志，楳田祐三，森川達也，久保田暢人，吉田一博，竹原裕子，母里淑子，貞森 裕，八木孝仁，藤原俊義，Goel Ajay
  • 学会等名: 第72回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20131003-20131005
• [学会発表] メチル化プロファイリングによるIPMNの悪性度予測 (2013)
  • 著者名/発表者名: 吉田一博，永坂岳司，楳田祐三，横道直佑，母里淑子，久保田暢人，森川達也，竹原裕子，西江直生志，八木孝仁，Goel Ajay，藤原俊義
  • 学会等名: 第72回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20131003-20131005
• [学会発表] The outcome of prophylatic surgical managements for spontaneous large splenorenal shunts adult living donor liver transplantation (2013)
  • 著者名/発表者名: Sadamori H, Yagi T, Shinoura S, Umeda Y, Yoshida R, Nobuoka D, Utsumi M, Fuji T, Takagi H, Fujiwara T
  • 学会等名: The 13th Congress of the Asian Society of Transplantation
  • 発表場所: Kyoto
  • 年月日: 20130903-20130906
• [学会発表] The risk factors for fungal infection after living donor liver transplantation (2013)
  • 著者名/発表者名: Utsumi M, Umeda Y, Sadamori H, Shinoura S, Yoshida R, Nobuoka D, Yasuda Y, Takaki A, Fujiwara T, Yagi T
  • 学会等名: The 13th Congress of the Asian Society of Transplantation
  • 発表場所: Kyoto
  • 年月日: 20130903-20130906
• [学会発表] 遺伝子変異情報を基盤とした大腸癌肝転移の治療戦略 (2013)
  • 著者名/発表者名: 楳田祐三，永坂岳司，母里淑子，稲田 涼，吉田龍一，篠浦 先，貞森 裕，八木孝仁，藤原俊義
  • 学会等名: 第68回日本消化器外科学会総会
  • 発表場所: 宮崎市
  • 年月日: 20130717-20130719
• [学会発表] StageIII大腸癌根治術後の再発予測におけるMGMTプロモーター領域のメチル化解析の有用性 (2013)
  • 著者名/発表者名: 母里淑子，永坂岳司，竹原裕子，吉田一博，重安邦俊，楳田祐三，田澤 大，貞森 裕，藤原俊義
  • 学会等名: 第68回日本消化器外科学会総会
  • 発表場所: 宮崎市
  • 年月日: 20130717-20130719
• [学会発表] 遺伝子情報を用いたStage IV大腸癌の検討および治療戦略 (2013)
  • 著者名/発表者名: 稲田 涼，永坂岳司，母里淑子，楳田祐三，濱田侑紀，近藤喜太，宇野 太，貞森 裕，八木孝仁，藤原俊義
  • 学会等名: 第68回日本消化器外科学会総会
  • 発表場所: 宮崎市
  • 年月日: 20130717-20130719
• [学会発表] 遺伝子変異解析によるIPMN悪性度診断の新展開 (2013)
  • 著者名/発表者名: 吉田一博，楳田祐三，永坂岳司，藤 智和，母里淑子，篠浦 先，貞森 裕，八木孝仁，藤原俊義
  • 学会等名: 第68回日本消化器外科学会総会
  • 発表場所: 宮崎市
  • 年月日: 20130717-20130719
• [学会発表] HMGB1制御による阻血再灌流障害の軽減効果と肝再生機序への影響解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 杉原正大，貞森 裕，篠浦 先，楳田祐三，吉田龍一，信岡大輔，内海方嗣，高木弘誠，藤原俊義，八木孝仁
  • 学会等名: 第31回日本肝移植研究会
  • 発表場所: 熊本市
  • 年月日: 20130704-20130705
• [学会発表] 再発肝細胞癌の治療戦略～予後予測モデルとSalvage Transplantationの適応選別～ (2013)
  • 著者名/発表者名: 楳田祐三，藤 智和，貞森 裕，篠浦 先，吉田龍一，佐藤太祐，信岡大輔，内海方嗣，藤原俊義，八木孝仁
  • 学会等名: 第25回日本肝胆膵外科学会・学術集会
  • 発表場所: 宇都宮市
  • 年月日: 20130612-20130614
• [学会発表] 遺伝子解析を用いたStageIV大腸癌に対する術前化学療法の検討および確立 (2013)
  • 著者名/発表者名: 稲田 涼，永坂岳司，母里淑子，楳田祐三，森川達也，久保田暢人，近藤喜太，宇野 太，貞森 裕，八木孝仁，三嶋秀行，藤原俊義
  • 学会等名: 第38回日本外科系連合学会学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20130606-20130607
• [学会発表] Accumulation of Epigenetic Alteration Could Predict Malignant Formation in Intraductal Papillary Mucinous Neoplasm(IPMN) (2013)
  • 著者名/発表者名: Yoshida K, Nagasaka T, Umeda Y, Yokomichi N, Mori Y, Kubota N, Morikawa T, Takehara Y, Takehara K, Shigeyasu K, Nyuya A, Shiwaku R, Suno M, Nishida N, Fujiwara T, Goel A
  • 学会等名: Digestive Disease Week 2013
  • 発表場所: Orlando、アメリカ
  • 年月日: 20130518-20130521
• [学会発表] MGMT Methylation As a Novel Biomarker for the Identification of Stage III Colorectal Cancers At High-Risk of Disease Recurrence Following Curative Surgery (2013)
  • 著者名/発表者名: Nagasaka T, Mori Y, Tazawa H, Umeda Y, Morikawa T, Kubota N, Yoshida K, Takehara Y, Yokomichi N, Takehara K, Shigeyasu K, Nyuya A, Shiwaku R, Suno M, Nishida N, Fujiwara T, Goel A
  • 学会等名: Digestive Disease Week 2013
  • 発表場所: Orlando、アメリカ
  • 年月日: 20130518-20130521
• [学会発表] Cytokeratin 19 Staining Is a Novel, Predictive Biomarker for Extra-Hepatic Metastasis in Hepatocellular Carcinoma (2013)
  • 著者名/発表者名: Yokomichi N, Nagasaka T, Nishida N, Umeda Y, Mori Y, Morikawa T, Kubota N, Yoshida K, Takehara Y, Takehara K, Shigeyasu K, Nyuya A, Shiwaku R, Suno M, Fujiwara T, Goel A
  • 学会等名: Digestive Disease Week 2013
  • 発表場所: Orlando、アメリカ
  • 年月日: 20130518-20130521
• [学会発表] 遺伝子変異情報を基盤とした大腸癌肝転移の治療戦略 (2013)
  • 著者名/発表者名: 母里淑子，楳田祐三，永坂岳司，稲田 涼，森川達也，久保田暢人，吉田一博，篠浦 先，貞森 裕，八木孝仁，藤原俊義
  • 学会等名: 第113回日本外科学会定期学術集会
  • 発表場所: 福岡市
  • 年月日: 20130411-20130413
• [学会発表] メチル化プロファイリングを用いたIntraductal papillary mucinous neoplasm(IPMN) (2013)
  • 著者名/発表者名: 吉田一博，永坂岳司，楳田祐三，横道直佑，母里淑子，久保田暢人，森川達也，竹原裕子，竹原清人，重安邦俊，貞森 裕，八木孝仁，藤原俊義
  • 学会等名: 第113回日本外科学会定期学術集会
  • 発表場所: 福岡市
  • 年月日: 20130411-20130413
• [学会発表] 遺伝子情報を用いた多臓器転移大腸癌の検討および治療戦略の構築 (2013)
  • 著者名/発表者名: 稲田 涼，永坂岳司，母里淑子，楳田祐三，森川達也，久保田暢人，近藤喜太，宇野 太，貞森 裕，八木孝仁，三嶋秀行，藤原俊義
  • 学会等名: 第113回日本外科学会定期学術集会
  • 発表場所: 福岡市
  • 年月日: 20130411-20130413
• [学会発表] サイトケラチン19発現は肝細胞癌の上皮間葉移行と肝外転移を予測する (2013)
  • 著者名/発表者名: 横道直佑，永坂岳司，西田直生志，楳田祐三，母里淑子，森川達也，久保田暢人，吉田一博，貞森 裕，八木孝仁，藤原俊義
  • 学会等名: 第113回日本外科学会定期学術集会
  • 発表場所: 福岡市
  • 年月日: 20130411-20130413
• [学会発表] 温阻血再灌流+肝切除モデルにおけるHMGB1の動態解析および肝再生機序の解明 (2013)
  • 著者名/発表者名: 杉原正大，貞森 裕，西堀正洋，佐藤康晴，田澤 大，吉田龍一，楳田祐三，篠浦 先，永坂岳司，八木孝仁，藤原俊義
  • 学会等名: 第113回日本外科学会定期学術集会
  • 発表場所: 福岡市
  • 年月日: 20130411-20130413
• [図書] The Modulation of Portal Venous Hemodynamics in Living Donor Liver Transplantation (2013)
  • 著者名/発表者名: Sadamori H, Umeda Y, Yagi T, Fujiwara T
  • 総ページ数: 269（217-230）
  • 出版者: NOVA SCIENCE PUBLISHERS, INC