真性赤血球増加症の診断確定のためのJAK2変異探索

2013 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 25860416
• 研究種目: 若手研究(B)
• 研究機関: 順天堂大学
• 研究代表者: 森下 総司 順天堂大学, 医学部, 助教 (10635866)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: 真性赤血球増加症 / 骨髄増殖性腫瘍 / JAK2V617F変異検出

研究概要

骨髄増殖性腫瘍（MPN）は，造血幹細胞の異常による骨髄系細胞のクローナルな増殖をきたす疾患群を指し，真性赤血球増加症（PV），本態性血小板血症（ET），原発性骨髄線維症（PMF）などが含まれる。25年度では，我が国のMPN症例を対象とし，JAK2変異の有無を調査することを目的とした。
これまでに順天堂大学医学部血液内科学講座にて収集されたMPNが疑われる症例860例のうち，WHO2008分類の診断基準に照らし，診断を確定させたところ，PVが66例，ETが112例，PMFが23例であった。これらの症例におけるJAK2V617F変異の陽性数はPVで62例（94.0%），ETで63例（56.3%），PMFで11名（47.8%）であり，欧米のMPN患者を対象とした疫学調査とほぼ同等であった。さらに，JAK2V617F陰性であったPV症例4例について，内因性赤芽球コロニーアッセイを実施し，形成された赤芽球コロニーをピックアップしてJAK2エクソン12変異の有無を確認したところ，3例（5%）において陽性を認めた。このことから，PVの診断確定にはJAK2V617F変異とJAK2エクソン12変異の検出が有効であると考えられる。
また，WHO2008分類によって診断を確定できなかったPVが疑われる症例のうち，40例においてJAK2V617F変異が陽性であった。これらの症例では，赤血球数は高値を示すがヘモグロビン濃度がWHO2008分類の診断基準を満たさないためにPVと診断されなかった集団であり，JAK2V617F変異の正確な検出技術が，これらの症例のPV診断を確定させ得ると期待された。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

交付申請書に記載した25年度の実施計画は，
1. 申請者の所属する研究室において収集済みのPV症例におけるJAK2V617F変異の有無を検出し，JAK2V617F変異陰性のPV症例を決定すること，
2. JAK2V617F変異陰性であったPV症例を対象とし，JAK2エクソン12変異を検出すること
である。概要に記載の通り，MPNが疑われる860例から66例のPV確定症例を抽出すると共に，これらのJAK2V617F変異，JAK2エクソン12変異を検出できているため，25年度の達成目標に到達できたと判断した。

今後の研究の推進方策

PVの診断が確定された66例のうち，1例がJAK2V617F変異，JAK2エクソン12変異共に陰性であった。この症例について，実施計画に沿って，JAK2をコードする全領域を次世代シークエンサーを用いてターゲットシークエンスを行い，新たな変異が存在するか確認することを計画している。

次年度の研究費の使用計画

研究は25年度の計画通り遂行できたが，残金が1,300円弱であり，同一年度内でのさらなる研究の遂行のために充当できる試薬類等を購入できる金額ではないため，次年度へ繰り越すこととした。
前年度の繰越金は実験遂行に必須の消耗品の購入に充てる。26年度に受け入れ予定の研究費は研究計画の通りに使用していく。

研究成果

• [雑誌論文] JAK2V617F mutation status and allele burden in classical Ph-negative myeloproliferative neoplasms in Japan (2014)
  • 著者名/発表者名: Yoko Edahiro, Soji Morishita, Kochi Takahashi, Yumi Hironaka, Yuriko Yahata, Yoshitaka Sunami, Shuichi Shirane, Miyuki Tsutsui, Masaaki Noguchi, Michiaki Koike, Kiyoshi Imai, Keita Kirito, Naohiro Noda, Yuji Sekiguchi, Satoshi Tsuneda, Akimichi Ohsaka, Marito Araki, and Norio Komatsu
  • 雑誌名: International Journal of Hematology 巻: 未定 ページ: 未定
  • DOI: 10.1007/s12185-014-1567-1
  • 査読あり
• [学会発表] An epidemiologic study of classical Ph-negative myeloproliferative neoplasms (MPNs) in Japan (2013)
  • 著者名/発表者名: Yoko Edahiro, Soji Morishita, Kochi Takahashi, Yoshitaka Sunami, Yuriko Yahata, Marito Araki, Satoshi Tsuneda, Akimichi Ohsaka, and Norio Komatsu
  • 学会等名: 第75回日本血液学会学術集会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 20131011-20131013