抗原特異的遅発型喘息反応の生物学的、薬理学的検討

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25860823
• 研究機関: 独立行政法人国立病院機構(相模原病院臨床研究センター)
• 研究代表者: 関谷 潔史 独立行政法人国立病院機構(相模原病院臨床研究センター), その他部局等, 研究員 (90385774)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: アレルギー / T細胞 / 気管支喘息 / 平滑筋 / 気流閉塞 / 喘息反応 / 遅発型反応

研究実績の概要

T細胞依存性喘息反応のメカニズム解明の目的に、OVA特異的T細胞クローン移入モデルを樹立した。平成25年度にはまず、OVA特異的T細胞受容体トランスジェニックマウス脾細胞より、多数のT細胞クローンを樹立した。さらに、無処置のBalb/cマウスにT細胞クローンを移入し、翌日OVAを経気道的にチャレンジした後、経時的に気道抵抗（RL）、呼吸パターン（Penh）を測定し、気流閉塞をモニターした。OVAあるいはT細胞エピトープペプチドOVA309-323チャレンジにより、RL、Penhの上昇を認めたことにより、T細胞依存性の遅発型喘息反応（アレルギー反応）の存在を証明できた。この反応のメカニズム、メディエータ解明に向け、培養気管支平滑筋を用いたin vitroの収縮活性アッセイ系を樹立した。マウスprimary気管支平滑筋細胞を培養し、90%以上の純度となった時点で、コラーゲンゲルに包埋し、さらに6日間培養、成熟させた後、収縮活性検出に用いた。in vivoモデルで気流閉塞を惹起するT細胞クローンを固相化CD3抗体で刺激し、その培養上清をKrebs液に透析後、ゲルにapplyした。無刺激のクローン上清に比較して、活性化T細胞クローン上清では、有意に平滑筋ゲルの収縮活性が確認された。montelucast (10 microM)との前培養では、ゲルの収縮に変化はみられなかった。本知見は、T細胞がロイコトリエンとは異なる気管支平滑筋収縮活性物質を産生していることを示す。一方、in vivoモデル解析においては、ロイコトリエン拮抗薬montelucast (0, 1, 5 mg/kg)を前投与したところ、Penh上昇が抑制され、T細胞依存性の気流閉塞は、ロイコトリエンの作用を介していることが示された。今後、このdiscrepancyについて、さらに解析を進めることが重要と考えられる。

研究成果

• [雑誌論文] IgE Abs to Der p 1 and Der p 2 as diagnostic markers of house dust mite allergy as defined by a bronchoprovocation test. (2015)
  • 著者名/発表者名: Minami T, Fukutomi Y, Lidholm J, Yasueda H, Saito A, Sekiya K, Tsuburai T, Maeda Y, Mori A, Taniguchi M, Hasegawa M, Akiyama K.
  • 雑誌名: Allergology International 巻: 64 ページ: 90-95
  • 査読あり
• [雑誌論文] 本邦における呼気一酸化窒素濃度の機種差検討 オフライン法、NO breathの比較 (2014)
  • 著者名/発表者名: 伊藤 潤, 粒来 崇博, 熱田 了, 渡井 健太郎, 福原 正憲, 林 浩昭, 南 崇史, 谷本 英則, 押方 智也子, 関谷 潔史, 釣木澤 尚実, 福富 友馬, 原田 紀宏, 前田 裕二, 森 晶夫, 長谷川 眞紀, 谷口 正実, 高橋 和久, 秋山 一男
  • 雑誌名: アレルギー 巻: 63 ページ: 1241-1249
  • 査読あり
• [雑誌論文] Oral Mite Anaphylaxis Caused by Mite-Contaminated Okonomiyaki Pancake-Mix in Japan: 8 Case Reports and a Review of 28 Reported Cases (2014)
  • 著者名/発表者名: Kentaro Takahashi, Masami Taniguchi1, Yuma Fukutomi1, Kiyoshi Sekiya, Kentaro Watai, Chihiro Mitsui, Hidenori Tanimoto, Chiyako Oshikata, Takahiro Tsuburai, Naomi Tsurikisawa, Kenji Minoguchi, HiroshiNakajima, Kazuo Akiyama
  • 雑誌名: Allergology International 巻: 63 ページ: 51-56
  • 査読あり
• [雑誌論文] 疾患レビュー 花粉症（アレルギー性鼻炎） (2014)
  • 著者名/発表者名: 関谷 潔史
  • 雑誌名: スズケン メディカル 巻: 17 ページ: 4-6
• [雑誌論文] 疾患レビュー 花粉症（アレルギー性鼻炎） (2014)
  • 著者名/発表者名: 関谷 潔史
  • 雑誌名: スズケン ファーマ 巻: 17 ページ: 6
• [学会発表] T-cell dependent, steroid-resistant asthma model and its treatment by blocking costimulatory signal (2015)
  • 著者名/発表者名: Mori, A., Kouyama, S., Yamaguchi, M., Iijima, Y., Ohtomo-Abe, A., Saito, N, Kinoshita, A., Hayashi, H., Watarai, K., Mitsui, C., Oshikata, C., Sekiya, K., Tsuburai, T., Maeda, Y., Ohtomo, M., Fukutomi, Y., Taniguchi, M., Akiyama, K., Ohtomo, T., and Kaminuma, O.
  • 学会等名: World Immunoe Regulation Meeting IX
  • 発表場所: Davos, Switzerland
  • 年月日: 2015-03-18 – 2015-03-21
• [学会発表] Pharmacological characterization of T cell-induce bronchoconstriction in the mice (2015)
  • 著者名/発表者名: Mori, A., Kouyama, S., Yamaguchi, M., Iijima, Y., Ohtomo-Abe, A., Saito, N, Kinoshita, A., Hayashi, H., Watarai, K., Mitsui, C., Oshikata, C., Sekiya, K., Tsuburai, T., Maeda, Y., Ohtomo, M., Fukutomi, Y., Taniguchi, M., Akiyama, K., Ohtomo, T., and Kaminuma, O.
  • 学会等名: 2015 American Academy of Allergy, Asthma, and Immunology Annual meeting
  • 発表場所: Houston, USA
  • 年月日: 2015-02-20 – 2015-02-24
• [学会発表] Costimulatory signal as a target for treating steroid resistant asthma (2015)
  • 著者名/発表者名: Mori, A., Kouyama, S., Yamaguchi, M., Iijima, Y., Ohtomo-Abe, A., Saito, N, Kinoshita, A., Hayashi, H., Watarai, K., Mitsui, C., Oshikata, C., Sekiya, K., Tsuburai, T., Maeda, Y., Ohtomo, M., Fukutomi, Y., Taniguchi, M., Akiyama, K., Ohtomo, T., and Kaminuma, O.
  • 学会等名: 7th Immunotherapeutics & Immunomonitoring Conference
  • 発表場所: San Diego, USA
  • 年月日: 2015-01-29 – 2015-01-30
• [学会発表] Development and treatment of steroid resistant asthma model by adoptive transfer of murine helper T cell clones (2014)
  • 著者名/発表者名: Mori, A., Kouyama, S., Yamaguchi, M., Iijima, Y., Ohtomo, A., Ohtomo, T., Itoh, J., Hayashi, H., Watarai, K., Mitsui, C., Oshikata, C., Fukutomi, Y., Sekiya, K., Tsuburai, T., Maeda, Y., Ohtomo, M., Taniguchi, M., Akiyama, K., and Kaminuma, O.
  • 学会等名: WAO Internal Scientific Conference 2014
  • 発表場所: Rio de Janeiro, Brazil
  • 年月日: 2014-12-06 – 2014-12-09
• [学会発表] Analysis of T cell-dependent bronchoconstriction (2014)
  • 著者名/発表者名: Mori, A., Kouyama, S., Yamaguchi, M., Iijima, Y., Abe, A., Ohtomo, T., Fukuhara, M., Itoh, J., Hayashi, H., Minami, T., Watarai, K., Mitsui, C., Oshikata, C., Tanimoto, H., Fukutomi, Y., Sekiya, K., Tsuburai, T., Taniguchi, M., Maeda, Y., Ohtomo, M., Hasegawa, M., Akiyama, K., and Kaminuma, O.
  • 学会等名: Asian Pacific Society of Respirology 2014 Congress
  • 発表場所: Bali, Indonesia
  • 年月日: 2014-11-13 – 2014-11-16
• [学会発表] T cell induced-bronchoconstriction in vitro and in vivo (2014)
  • 著者名/発表者名: Mori, A., Kouyama, S., Yamaguchi, M., Iijima, Y., Abe, A., Ohtomo, T., Fukuhara, M., Itoh, J., Hayashi, H., Minami, T., Watarai, K., Mitsui, C., Oshikata, C., Tanimoto, H., Fukutomi, Y., Sekiya, K., Tsuburai, T., Taniguchi, M., Maeda, Y., Ohtomo, M., Hasegawa, M., Akiyama, K., and Kaminuma, O.
  • 学会等名: Collegium Internationale Allergologicum 2014 Meeting
  • 発表場所: Petersberg, Germany
  • 年月日: 2014-09-13 – 2014-09-18
• [学会発表] Can forced oscillation technique parameters predict airway hyperresponsiveness to histamine? (2014)
  • 著者名/発表者名: Hayashi, H., Tsuburai, T., Watarai, K., Mitsui, C., Fukuhara, M., Minami, T., Tanimoto, H., Fukutomi, Y., Oshikata, C., Itoh, J., Sekiya, K., Tsurikizawa, N., Maeda, Y., Mori, A., Taniguchi, M., Hasegawa, M., Akiyama, K.
  • 学会等名: European Respiratory Society International Congress 2014
  • 発表場所: Munich, Germany
  • 年月日: 2014-09-06 – 2014-09-10
• [学会発表] The Border line Fractional Exhaled Nitric Oxide in Patients With Prolonged / Chronic Cough (2014)
  • 著者名/発表者名: Kiyoshi Sekiya, Masami Taniguchi, , Kentaro Watai, Natsumi Saito, Chihiro Mistui, Hiroaki Hayashi, Jun Ito, Chiyako Oshikata, Naomi Tsurikisawa, Yuma Fukutomi, Takahiro Tsuburai, Akio Mori, Kazuo Akiyama
  • 学会等名: The 24th Congress of Interasthma Japan/North Asia
  • 発表場所: Nagoya
  • 年月日: 2014-07-18 – 2014-07-18
• [学会発表] 若年成人喘息においてペット飼育が肺機能に与える影響 (2014)
  • 著者名/発表者名: 関谷 潔史、谷口 正実、渡井 健太郎、齋藤 奈津美、木下 ありさ、林 浩昭、押方 智也子、伊藤 潤、釣木澤 尚実、福冨 友馬、粒来 崇博、森 晶夫、秋山 一男
  • 学会等名: 第45回日本職業・環境アレルギー学会 総会・学術大会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2014-06-28 – 2014-06-29
• [学会発表] Airflow limitation caused by activated T cells (2014)
  • 著者名/発表者名: Mori, A., Kouyama, S., Yamaguchi, M., Iijima, Y., Abe-Ohtomo, A., Ohtomo, T., Fukuhara, M., Itoh, J., Hayashi, H., Minami, T., Watarai, K., Mitsui, C., Oshikata, C., Tanimoto, H., Fukutomi, Y., Sekiya, K., Tsuburai, T., Taniguchi, M., Maeda, Y., Ohtomo, M., Hasegawa, M., Akiyama, K., and Kaminuma, O.
  • 学会等名: European Academy of Allergy and Clinical Immunology Congress 2014
  • 発表場所: Copenhagen, Denmark
  • 年月日: 2014-06-07 – 2014-06-11
• [学会発表] Study on T cell-induced bronchoconstriction in vivo and in vitro (2014)
  • 著者名/発表者名: Mori, A., Kouyama, S., Yamaguchi, M., Iijima, Y., Abe, A., Ohtomo, T., Fukuhara, M., Itoh, J., Hayashi, H., Minami, T., Watarai, K., Mitsui, C., Oshikata, C., Tanimoto, H., Fukutomi, Y., Sekiya, K., Tsuburai, T., Taniguchi, M., Maeda, Y., Ohtomo, M., Hasegawa, M., Akiyama, K., and Kaminuma, O.
  • 学会等名: VII World Asthma Allergy & COPD Forum
  • 発表場所: New York, USA
  • 年月日: 2014-04-26 – 2014-04-29
• [学会発表] 若年成人喘息におけるペット飼育が肺機能に与える影響 (2014)
  • 著者名/発表者名: 関谷 潔史、谷口 正実、渡井 健太郎、南 崇史、林 浩昭、谷本 英則、押方 智也子、伊藤 潤、釣木澤 尚実、福冨 友馬、粒来 崇博、森 晶夫、秋山 一男
  • 学会等名: 第54回日本呼吸器学会学術講演会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2014-04-25 – 2014-04-27