| 研究課題/領域番号 |
25860962
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| 研究種目 |
若手研究(B)
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| 研究機関 | 横浜市立大学 |
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研究代表者 |
山口 由衣 横浜市立大学, 医学部, 講師 (60585264)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| キーワード | Caveolin-1 / 乾癬 / STAT3 |
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| 研究概要 |
乾癬病態ではケラチノサイトの過剰増殖が主要な所見であり、STAT3の過剰なリン酸化が指摘されている。Caveolin-1は、細胞膜表面のカベオラを構成するタンパクの一つであり、エンドサイトーシスや様々なシグナル伝達因子の調節に関与している。本研究では、乾癬病態におけるCaveolin-1の関与を解析し新たな治療法開発を目指している。
平成25年度に予定された研究としては、①臨床検体を用いた ex vivo解析・・・Caveolin-1およびCaveolin関連タンパクの発現検討。②in vitro機能解析・・・Caveolin-1とSTAT3の局在、結合解析。Caveolin-1発現調整によるSTAT3リン酸化の評価であった。
研究の進行状況としては予定通りに進行している。乾癬患者から採取した皮膚の免疫染色および剥離した表皮を用いてmRNAレベル、タンパクレベルでCaveolin-1の発現を検討したところ、乾癬患者表皮では、健常者に比較して有意に発現が低下していた。ヒト表皮細胞をIL22やEGFで刺激した細胞を用いた蛍光染色では、リン酸化STAT3およびSTAT3分子はCaveolin-1と共在しており、さらに免疫沈降-ウエスタンブロット法により、STAT3関連分子とCaveolin-1の結合が示唆された。最終的にはRNA干渉法にてCaveolin-1の発現を低下させた細胞を用いて、IL22やEGFで刺激したところ、STAT3のリン酸化がコントロール細胞に比較して増強しており、乾癬患者表皮におけるCaveolin-1の発現低下が、さらなる表皮細胞の増殖や乾癬病態の維持に深く関与していることが示された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
乾癬患者表皮より採取する検体を集めるのに時間がかかることが予想されたが、10検体以上集まり、予定通り解析が進行した。また、培養細胞を用いた実験も技術的に安定し、現在は予定通り進行している。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後は乾癬モデルマウスを用いた解析、およびCaveolin-1発現低下によるサイトカイン発現への影響などが進行中である。乾癬モデルマウスでの検討は当初の予定であったイミキモド外用によるものだけでなく、IL23注射によるモデルでも検討予定である。また、Caveolin-1ペプチドを用いた治療の開発を目指す。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
培養細胞を用いる実験において、予定以上に進行が順調であり、条件検討等に費やす試薬、細胞がやや少なくすんだため。
マウスを用いた検討では、IL23を用いたモデルを追加して検討予定であり、予定以上にマウス購入代や試薬代は必要となる可能性が高い。
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