| 研究課題/領域番号 |
25861407
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| 研究種目 |
若手研究(B)
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| 研究機関 | 弘前大学 |
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研究代表者 |
岡本 亜希子 弘前大学, 医学(系)研究科(研究院), 研究員 (60436037)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2017-03-31
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| キーワード | 神経周囲浸潤 / 神経周膜細胞 / インテグリンα6 / CXCR4 |
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| 研究概要 |
前立腺癌の進展過程においてperineural invasion (PNI)は重要なメカニズムの一つであるが、その分子機構は解明されていない。本研究では、PNIに関与する前立腺癌細胞側および神経細胞側の責任分子を同定し、PNIの分子機構について明らかにすることを目的として研究を行った。平成25年度は、Phage display法により前立腺癌細胞、神経細胞におけるリガンドとレセプターについて検索し、前立腺癌細胞と神経細胞との共培養により放出されるケモカインの測定およびchmotaxisis、invasionアッセイを行った。なお本実験では、PNIのより詳細なメカニズムを解明するために神経周囲の細胞として、神経周膜細胞 (Human perineuaral cell, HPNC)を用いた。前立腺癌細胞PC-3、DU145および前立腺正常上皮細胞RWPE-1細胞より調製したcDNAライブラリーをそれぞれT7 Phageの外殻タンパク質遺伝子に組み込みT7 Phage外殻に各細胞株由来タンパク質をランダムに提示するPhageライブラリーの構築に成功した。調製したPhageライブラリーとヒト神経周膜細胞(HPNC)細胞を用いたスクリーニングにより、HPNC細胞に結合する前立腺癌細胞の候補としてインテグリンα6が同定された。また前立腺癌細胞とHPNC細胞と共培養により、培養液中にSDF-1が多量に分泌され、さらに前立腺癌細胞でSDF-1の受容体であるCXCR4の発現が亢進していることが明らかとなった。さらに前立腺癌細胞のHPNC細胞層に対する浸潤能は、抗インテグリンα6および抗CXCR4抗体によって阻害されたことから、前立腺癌細胞は、HPNC細胞より放出されるSDF-1により、遊走能が亢進し、インテグリンα6を介して神経周膜細胞に接着し、浸潤していることが示唆された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
当初の予定通り、前立腺癌細胞が神経周囲の神経周膜細胞に浸潤する際の候補分子をファージディスプレイ法にて検索し、共培養により分泌される各種ケモカインの測定もおおむね達成されたことから、おおむね順調に進展していると判断する。
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| 今後の研究の推進方策 |
インテグリンα6、CXCR4が前立腺癌の神経細胞への遊走、および接着に関与する可能性が示唆されたことから、当初の予定通り、前立腺全摘標本および針生検標本における上記分子の免疫組織科学的検討および２） 責任分子の過剰発現、ノックダウン細胞あるいは、抗体を調製し、これら分子の前立腺癌細胞の増殖、浸潤能とアポトーシス、神経細胞への接着性への影響をin vitroおよびin vivoで検討する。
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