研究課題
前立腺癌の進展過程においてperineural invasion（PNI）は、重要なメカニズムの１つであるが、その分子機構は、解明されていない。本研究では、PNIに関与する前立腺癌細胞側の責任分子を同定し、PNIの分子機構について明らかにすることを目的として研究を行った。平成25年度は、Phage display法により前立腺癌細胞、神経細胞におけるリガンドとレセプターの検索、前立腺癌細胞と神経細胞との共培養により放出されるケモカインの測定および遊走能、浸潤能を調べた。本実験では、神経周囲の細胞として、ヒト神経周膜細胞（human perineural cell, HPNC）を用いた。前立腺癌細胞のcDNAライブラリー導入ファージライブラリーとHPNC細胞を用いたスクリーニングから、HPNC細胞に結合する前立腺癌細胞の候補因子としてインテグリンα6が同定された。また前立腺癌細胞は、HPNC細胞が分泌するSDF-1により、遊走能が亢進し、インテグリンα6を介して神経周膜細胞に接着浸潤していることが示唆された。平成26年度は、前立腺全摘標本における免疫組織化学的検討を行った。その結果、神経周囲浸潤している癌細胞でインテグリンα6が発現していることが明らかとなった。また高浸潤能性前立腺癌細胞と低浸潤性細胞のマイクロアレイ解析により、前立腺癌細胞のPNI抑制候補因子として上皮細胞の膜タンパク質であるα-dystroglycanに修飾されるラミニン結合糖鎖合成に関連する因子がHPNC細胞に対する高浸潤性を示す細胞で顕著に減少することが明らかとなった。平成27年度は、HPNC細胞積層モデルの構築を試みた。その結果、少なくとも2-８層からなるHPNC細胞積層モデルの構築に成功した。この神経周膜モデルに対する前立腺癌細胞の浸潤能を調査するためにインテグリンα6とラミニン結合糖鎖の発現が異なる4種の前立腺癌細胞株を樹立した。
2: おおむね順調に進展している
本研究の目的であるPNIに関与する前立腺癌細胞側の責任分子を同定し、PNIの分子機構の解明するという点で、前立腺側のPNI促進分子としてインテグリンα6そして抑制因子としてα-dystroglycanに修飾されるラミニン結合糖鎖合成に関連する因子責任分子として同定しており、また本分子の発現が異なる細胞株について当初の予定通り、樹立することができたため、概ね順調に進展していると考えられる。
PNIの促進および抑制該当分子の発現が異なる細胞が調製できたため、in vivoにおける腫瘍形成能および転移能の評価を行う。また該当分子の阻害剤を用いた転移阻害効果の検討も行う。
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