| 研究課題/領域番号 |
25861518
|
|---|
| 研究機関 | 独立行政法人国立成育医療研究センター |
|---|
研究代表者 |
菅原 かな 独立行政法人国立成育医療研究センター, 細胞医療研究部, 研究員 (10453739)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2017-03-31
|
| キーワード | 着床不全 / 間葉系幹細胞 / 脱落膜化 |
|---|
| 研究実績の概要 |
生殖補助医療による妊娠率改善のためには、反復着床不全の症例に対する病態解明と検査・治療法の開発が急務である。本研究は、子宮内膜の菲薄化による着床不全に対する細胞医療の可能性を開拓することを目指す。まず、細胞バンク化されたヒト間葉系幹細胞株から子宮内膜様細胞へ効率的な分化誘導法を開発する。さらに、このヒト内膜様細胞をマウス胚と共に免疫不全偽妊娠マウスの腎被膜下に移植して、脱落膜あるいは胎盤に寄与するか検討する。この第３の細胞（ドナー肺でもレシピエント内膜細胞でもない）が着床に寄与すれば、妊娠初期における免疫寛容の確立を研究する実験モデルとしても有用である。
今年度は羊膜や月経血より樹立されたヒト間葉系幹細胞培養液中にestradiol（E2）とprogesterone（P4）または8-Br-cAMPなどの薬剤を添加し子宮内膜様細胞に分化誘導する系を確立をすることを行った。薬剤の添加培養による細胞形態変化の観察、細胞表面抗原解析、脱落膜化のマーカーとして知られるプロラクチン (prolactin: PRL)やインスリン様増殖因子結合タンパク質1 (Insulin-Like Growth Factor Binding Protein 1 :IGFBP1)の発現について免疫染色および定量的リアルタイム逆転写核酸増幅法 (quantitative real-time PCR :qRT-PCR)を行い脱落膜化能の有無を検討した。
また、この系を用いて子宮内膜細胞への分化における遺伝子発現プロファイルの変化と上清中サイトカインの変化に注目し、子宮内膜細胞への分化課程を分子生物学的に規定することを試みた。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
ヒト間葉系幹細胞培養液中にestradiol（E2）とprogesterone（P4）または8-Br-cAMPなどの薬剤を添加し子宮内膜様細胞に分化誘導する系を確立し、この系を用いて子宮内膜細胞への分化における遺伝子発現プロファイルの変化と上清中サイトカインの変化に注目し、子宮内膜細胞への分化課程を分子生物学的に規定することが、今年度の目標であり、概ね順調に進展しているため。
|
| 今後の研究の推進方策 |
これまでの研究で得られたヒト内膜間質様細胞をマウス胚と共に偽妊娠マウス（免疫不全マウスあるいは野生型CDIマウス）に胚移植して、着床率、流産率、出生率を検討し、さらに脱落膜あるいは胎盤に寄与しないかを組織学的に検討をする。
|
