| 研究課題/領域番号 |
25861798
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
山口 幹代 大阪大学, 歯学部附属病院, 医員 (30523089)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| キーワード | バイオフィルム / ポルフィロモナス ジンジバリス / 抗菌薬感受性 / 薬剤排出ポンプ |
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| 研究実績の概要 |
歯周病および難治性根尖性歯周炎の病原性細菌の一つであるPorphyromonas gingivalis の浮遊細菌とバイオフィルム形成細菌の継時的な遺伝子発現の変化を検索したマイクロアレイの結果より、バイオフィルム形成細菌において発現が有為に上昇している遺伝子を抽出した。その抽出した遺伝子の中ででゲノム配列より、薬剤排出ポンプをコードする遺伝子に相同性を持つ遺伝子を数種選定した。
選定した各種遺伝子の欠失株および相補株を作製するため、上流配列および下流配列の間にエリスロマイシン耐性遺伝子を挿入するためのプラスミド、制限酵素ならびにプライマーを用意した。
今後、作製した各種薬剤排出ポンプをコードする遺伝子の欠失株および相補株を用いて、静置系およびフローセル系でバイオフィルム形成能を検索し、野生株と比較することにより、各種薬剤排出ポンプをコードする遺伝子のバイオフィルム形成における役割を検索する予定である。また、各種薬剤排出ポンプをコードする遺伝子の欠失株および相補株を用いて、P. gingivalisにおいて抵抗性を示すことが報告されているミノサイクリン（テトラサイクリン系）、アンピシリン（ペニシリン系）、オフロキサシン（ニューキノロン系）ならびにゲンタマイシン（アミドグリコシド系）の感受性に与える影響について検索し、野生株と比較することにより、各種薬剤排出ポンプをコードする遺伝子の薬剤感受性における役割を検索する予定である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
薬剤排出ポンプの欠失株を作製する準備が整ってきているため。
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| 今後の研究の推進方策 |
Porphyromonas gingivalisのバイオフィルム形成時に発現が有為に上昇している薬剤排出ポンプをコードしている遺伝子の欠失株および相補株を作製し、バイオフィルム形成および抗菌薬感受性に与える影響を検索するとともに、バイオフィルム形成および抗菌薬感受性に関与する薬剤排出ポンプを阻害することが種々の細菌で報告されているphenyl-arginine-β-naphthylamide (PAβN)およびcarbonyl cyanide m-chlorophenyhydrazone (CCCP)がP. gingivalisにおいて抵抗性を示すことが報告されているミノサイクリン（テトラサイクリン系）、アンピシリン（ペニシリン系）、オフロキサシン（ニューキノロン系）ならびにゲンタマイシン（アミドグリコシド系）の感受性に与える影響を検索する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
平成26年度に予定していた実験および成果発表を平成27年度に変更したため。
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| 次年度使用額の使用計画 |
当初予定していた欠失株・相補株の作成、抗菌薬感受性試験、ならびに成果発表に使用する予定である。
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