| 研究課題/領域番号 |
25861966
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| 研究機関 | 京都府立医科大学 |
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研究代表者 |
雨宮 傑 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (90398389)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| キーワード | 移植・再生医療 / 再生医学 / 細胞・組織 / 歯学 / 臨床 |
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| 研究実績の概要 |
骨再生能を有した新規培養歯根膜由来細胞シートの開発を最終目標に、羊膜上にて歯根膜由来細胞の骨分化誘導培養を行った。同培養シートは骨芽細胞関連のタンパク発現を認め、新生骨形成能、すなわち歯周組織再生を促進する細胞を有していることを明らかにしてきた。現在、上記培養シートのin vivoにおける細胞動態について検討を加えた。
羊膜は帝王切開時の胎盤より採取した。また歯根膜由来細胞は、抜去した智歯より歯根膜組織を採取し初代培養後、3から4代継代したものを研究に使用した。継代培養した歯根膜由来細胞を羊膜上に播種し、骨分化誘導培地（デキサメタゾン、アスコルビン酸、β-グリセロリン酸含有培地）上で培養を行った。上記にて得られた培養シートを、BALB/cヌードマウス腎被膜下への移植を行い、4週間後に摘出し、H-E染色、アリザリンレッド染色、ならびに免疫染色を行った。骨分化誘導培養を行った羊膜上培養歯根膜由来細胞は、移植4週間後において紡錘形の歯根膜由来細胞が層状に増殖していた。免疫染色像では、間葉系細胞マーカー（vimentin）、骨芽細胞マーカー（bone Gla-protein (osteocalcin)）の発現を認めたが、石灰化物質の形成は認めなかった。
移植後においても歯根膜由来細胞は増殖し、in vivoの環境下においてもその性質を保持していることが示され、羊膜上培養歯根膜由来細胞シートは骨再生能を有した細胞シートである可能性が示された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
骨分化誘導培養を行った羊膜上培養歯根膜由来細胞の実験動物への移植を行い、in vivoでの培養細胞シートの遊走増殖について組織学的、免疫組織化学的解析を行っている。現在までの研究達成度としては、おおむね順調に進展していると考えられる。
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| 今後の研究の推進方策 |
これまでの検討において、羊膜上培養歯根膜由来細胞シートの実験動物移植にて、石灰化物質の存在は認められず、今後、移植方法の検討ならびに移植長期における骨無機質の新生や血管新生等の検討を行っていく必要があると考えている。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
年度内に研究試薬の調達が間に合わず、予定額を下回った。
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| 次年度使用額の使用計画 |
各種研究試薬、移植実験のための実験動物の購入、ならびに研究成果発表のための旅費・投稿費として使用する予定である。
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