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2014 年度 実施状況報告書

イノシトールは口唇口蓋裂を抑制する-その機序解明からCLP発症原因を探る-

研究課題

研究課題/領域番号 25861986
研究機関富山大学

研究代表者

藤原 久美子  富山大学, 大学病院, 助教 (60404737)

研究期間 (年度) 2013-04-01 – 2016-03-31
キーワード口蓋裂 / 遺伝子
研究実績の概要

昨年度より富山大学医学部歯科口腔外科学講座に所属が変わったため、対象研究群として、富山大学附属病院で加療を行う口唇口蓋裂患者に関するサンプル取集を行ってきた。現在のところ、当大学でのサンプル約10例に関しては、手術時に生じた皮膚および粘膜の一部をQUAGEN Allprotect Tissue Reagent液に速やかに保存した状態である。またそれぞれについての患者の裂型・性別・既往歴・家族歴などの患者背景は、データとして保存し、サンプルとデータについては連結匿名化を実施し、得られた結果に応じて患者データにアクセス可能な状態とする。また実験室のセットアップについてもほぼ準備が整った状態である。
現在までに、本大学でえられたサンプルで、口蓋裂の孤発例と思われるものは3例にとどまっていた。そのため、今後の研究では無症候性の口蓋裂だけでなく、無症候性の口唇口蓋裂症例も含めて検討する方がのぞましいと思われた。
DNA抽出後のMLPA法実施に関しては、直接FALCOバイオシステムズに問い合わせし、解析キットを本年度の予算で購入している。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

所属大学の移動のために、研究対象とするサンプルの収集開始から行う必要となった。また新たな研究室における実験の準備や試薬および備品の調整に時間が必要であった。

今後の研究の推進方策

MLPA 法(Multiplex Ligation Probe Amplification)は、ターゲット領域にプローブを設定し、プローブが相補的な配列にハイブリダイズ可能な場合にのみPCR 産物が得られる解析手法である。PCR を利用するために少量のDNA での解析が可能なことと、ハイブリザイゼーションとライゲーションを行うために1 塩基の差異を解析することができる。1 組の共通PCR プライマーを用い、1 サンプルで最大50 領域までのマルチプレックスPCR を行う。増幅産物をシークエンサーで分離し、各増幅断片が示すピーク面積値を、それぞれのコントロールデータと比較することで、ターゲット領域の数的変化を検出することができる。これらの手順についてはDNA抽出後はすみやかに実施可能なため、随時実施していく。

次年度使用額が生じた理由

本年度ではサンプルが10サンプル程度だったため、それほど試薬が必要ではなかった。キットは使用期限があるため、次年度以降のサンプル解析については購入しなかった。

次年度使用額の使用計画

次年度にMLPAキットの追加購入など必要となると考えられるため。またサンプル採取の手法についても再検討を要する部分があるため、新たな採取キットの予算として使用する予定である。(唾液からの採取等)

  • 研究成果

    (3件)

すべて 2014

すべて 学会発表 (3件) (うち招待講演 1件)

  • [学会発表] how to feed the cleft babies?2014

    • 著者名/発表者名
      KUMIKO Fujiwara
    • 学会等名
      13th Annual Scientific Meeting of Indonesia Physical Medicine and Rehabilitation Association(PIT XIII PERDOSRI)
    • 発表場所
      インドネシア ジョグジャカルタ
    • 年月日
      2014-10-05 – 2014-10-07
    • 招待講演
  • [学会発表] A charitable medical activity for cleft palate patients in Indonesia. -Problem of activity in local city-2014

    • 著者名/発表者名
      KUMIKO Fujiwara. SAYAKA Inoue, MAKOTO Noguchi,
    • 学会等名
      22nd congress of Europian 1Association for cranio-maxillofacial surgery
    • 発表場所
      プラハ チェコ共和国
    • 年月日
      2014-09-23 – 2014-09-26
  • [学会発表] インドネシア共和国における口唇口蓋裂の医療援助活動2014

    • 著者名/発表者名
      藤原久美子、井上さやか、辻司、夏目長門、野口誠
    • 学会等名
      日本口蓋裂学会総会学術集会
    • 発表場所
      札幌
    • 年月日
      2014-05-20 – 2014-05-21

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公開日: 2016-06-01  

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