| 研究課題/領域番号 |
25870075
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| 研究機関 | 山形大学 |
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研究代表者 |
倉橋 敏裕 山形大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (00596570)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2017-03-31
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| キーワード | ペルオキシレドキシン / Prx4 / 小胞体 / 蛋白質の酸化的折畳み |
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| 研究実績の概要 |
分泌蛋白質や膜蛋白質が正常に機能するためには、小胞体における酸化的折畳みが重要である。酸化的折畳みに障害が生じると、異常蛋白質の蓄積等がひきおこされ、それは神経変性疾患や癌といった疾患の原因になる。
Peroxiredoxin 4 (Prx4) は小胞体でthiol oxidaseとして働き、ER oxidoreductin 1 (Ero1)やProtein disulfide isomerase (PDI)と協調して蛋白質の酸化的折畳みに関与することが近年明らかとなった。しかしながら、その分子機構の詳細や生理的役割についてはほとんどわかっていない。
そこで、Prx4が関わる酸化的折畳みの詳細を解明する目的で、我々が作成したPrx4ノックアウトマウスを解析した。これまので私達の解析から、Prx4ノックアウトマウスは通常飼育下では顕著な表現型を示さないことが明らかになっている。そこで、蛋白質の酸化的折畳みは酸化ストレスに脆弱であるとの考えから、全身性で酸化ストレスの亢進が観察されるSod1ノックアウトマウスをPrx4ノックアウトマウスと交配することによりPrx4;Sod1二重欠損マウスを作成し、現在解析を進めている。これまでに、野生型および各シングルノックアウトマウスとの比較により、著しい臓器障害を観察しており、その分子機構の解明に取り組んでいる。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
これまでに、Prx4-KOマウスにストレスを加えることにより顕著な表現型が観察されており、現在解析中である。また、Prx4と相互作用する因子を質量分析器を用いた解析により同定し、その結果をイムノブロット解析により確認した。
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| 今後の研究の推進方策 |
引き続き、今回新たに作成したPrx4;SOD1二重欠損マウスの表現型解析を詳細に行う。特にPrx4の発現が高い肝臓を中心に解析する。
これまでにPrx4と相互作用する因子として小胞体に局在する因子を同定したが、分子レベルでのメカニズムを明らかにするのにマウス個体を用いた解析だけでは困難である。そこで現在、肝細胞の初代培養系技術の導入を試みており、今後は初代培養系もあわせて解析に用いる予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
実験計画の都合上、結果を見てから購入を判断する試薬の購入が必要であったため。次年度に繰越いたしました。
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| 次年度使用額の使用計画 |
26年度の結果をもとに、実験用試薬の購入に使用致します。
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