新規疾患「IgG4関連疾患」の病因・病態に迫る免疫遺伝学的アプローチ

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25870087
• 研究機関: 筑波大学
• 研究代表者: 坪井 洋人 筑波大学, 医学医療系, 講師 (80580505)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: IgG4関連疾患 / シェーグレン症候群 / 口唇唾液腺 / DNAマイクロアレイ / CCL18

研究実績の概要

IgG4-RD包括診断基準（2011年）でdefiniteを満たすIgG4-RD（N=5、全例女性）、シェーグレン症候群（SS）（N=5、全例女性）、健常人（HC）（N=3、全例女性）の口唇唾液腺（LSG）より抽出したRNAを用いてDNAマイクロアレイを行い、IgG4-RD、SS、HCの遺伝子発現パターンを主成分分析で比較した。IgG4-RDとSSのペアワイズの比較を行い、IgG4-RDで相対的に発現増加、減少した遺伝子（発現変動遺伝子）（rank products法、false discovery rate<0.05）を抽出した。DNAマイクロアレイとは別のIgG4-RD（N=9）、SS（N=10）、HC（N=4）のLSGより抽出したRNAを用いて、IgG4-RDで発現が増加していた発現変動遺伝子に関して定量PCRによるvalidationを行った。IgG4-RDのLSGにおけるmRNAの発現増加が確認されたCCL18に関して、免疫蛍光二重染色（CCL18、CD68、CD20）でLSGにおけるタンパクレベルでの発現解析と発現細胞の同定、IgG4-RD（N=2）、SS（N=1）、HC（N=1）における発現比較を行った。主成分分析では、IgG4-RD、SS、HCは互いに異なるクラスターを形成した。IgG4-RDで発現増加した遺伝子は1771プローブセット（1321遺伝子）、減少した遺伝子は1785プローブセット（1320遺伝子）抽出された（false discovery rate<0.05）。発現変動遺伝子の中から、rank上位、発現量高値、ばらつきが少ない、機能（ケモカイン、免疫・炎症関連）の条件から5個のvalidation候補遺伝子（CXCL12、CXCL14、CCL18、LTF、COLEC12）を抽出した。定量PCRでは、IgG4-RDにおいて、LTFはSSと比較し、CCL18はSSおよびHCと比較して有意に高発現していた（P<0.05）。IgG4-RDのLSGでは、多数のCD68陽性マクロファージ、一部のCD20陽性B細胞がCCL18を産生していた。一方で、SSではCCL18産生細胞はほとんど認めず、HCではマクロファージ、B細胞の浸潤は認めなかった。

研究成果

• [雑誌論文] Clinical features of patients with IgG4-related disease complicated with perivascular lesions (2015)
  • 著者名/発表者名: Ebe H, Tsuboi H, Hagiya C, Takahashi H, Yokosawa M, Hagiwara S, Hirota T, Kurashima Y, Takai C, Miki H, Asashima H, Umeda N, Kondo Y, Ogishima H, Suzuki T, Chino Y, Matsumoto I, Sumida T
  • 雑誌名: Modern Rheumatology 巻: 25 ページ: 105-109
  • 査読あり
• [雑誌論文] DNA microarray analysis of labial salivary glands in IgG4-related disease. Comparison with Sjogren's syndrome (2014)
  • 著者名/発表者名: Tsuboi H, Nakai Y, Iizuka M, Asashima H, Hagiya C, Tsuzuki S, Hirota T, Miki H, Hagiwara S, Kondo Y, Tanaka A, Moriyama M, Matsumoto I, Nakamura S, Yoshihara T, Abe K, Sumida T
  • 雑誌名: Arthritis and Rheumatology 巻: 66 ページ: 2892-2899
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Clinicopathological features of IgG4-related disease complicated with orbital involvement (2014)
  • 著者名/発表者名: Hagiya C, Tsuboi H, Yokosawa M, Hagiwara S, Takai C, Hirota T, Asashima H, Miki H, Umeda N, Horikoshi M, Kondo Y, Sugihara M, Ogishima H, Suzuki T, Hiraoka T, Kaji Y, Matsumoto I, Ohshika T, Sumida T
  • 雑誌名: Modern Rheumatology 巻: 24 ページ: 471-476
  • 査読あり
• [学会発表] Up-regulation of CCL18-CCR8 signaling in patients with IgG4-related disease (2015)
  • 著者名/発表者名: Hiroto Tsuboi, Mana Iizuka, Hiromitsu Asashima, Hiroyuki Takahashi, Tomoya Hirota, Yuya Kondo, Isao Matsumoto, Takayuki Sumida
  • 学会等名: 第59回日本リウマチ学会総会・学術集会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2015-04-23 – 2015-04-25
• [学会発表] DNAマイクロアレイによるIgG4関連疾患の口唇唾液腺における遺伝子発現解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 坪井洋人、中井雄治、飯塚麻菜、浅島弘充、高橋広行、廣田智哉、近藤裕也、古川祥子、田中昭彦、森山雅文、松本功、吉原俊雄、中村誠司、阿部啓子、住田孝之
  • 学会等名: 第23回日本シェーグレン症候群学会
  • 発表場所: 長崎
  • 年月日: 2014-09-12 – 2014-09-13
• [図書] ケモカインとIgG4関連疾患、IgG4研究会モノグラフ (2015)
  • 著者名/発表者名: 坪井洋人、中井雄治、飯塚麻菜、森山雅文、吉原俊雄、中村誠司、阿部啓子、住田孝之
  • 総ページ数: 6
  • 出版者: 前田書店