| 研究課題/領域番号 |
25870498
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| 研究種目 |
若手研究(B)
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| 研究機関 | 九州大学 |
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研究代表者 |
藤本 佳万 九州大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (20613631)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2015-03-31
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| キーワード | インフルエンザウイルス / 細胞内抗体 / 感染抵抗性 |
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| 研究概要 |
本研究は、抗体遺伝子工学を利用したインフルエンザウイルスに対する細胞内免疫法の確立を目的とする。平成25年度は、インフルエンザウイルスPB2蛋白に対するマウスモノクローナル抗体の恒常発現MDCK細胞株を樹立し、ウイルス感染性およびポリメラーゼ活性の比較解析を行った。H5N3、H1N1、H3N2、H11N9亜型のインフルエンザウイルスを用いたTCID50試験およびプラーク試験の結果、細胞内抗体発現細胞では野生型細胞と比較して感染抵抗性を示す事が明らかとなった。また、感染細胞内ウイルスNP遺伝子量をRT-PCRにて比較した結果、vRNA、mRNAおよびcRNAのすべての発現が、細胞内抗体発現細胞では抑制されていることが明らかとなった。さらに、免疫染色およびウエスタンブロティングの結果、感染後に細胞質内で合成されたPB2蛋白の核内移行量が、細胞内抗体発現細胞では野生型細胞と比べて少なく、核内移行開始時間も遅延する事が明らかとなった。以上の結果から、培養細胞内に発現する細胞内抗体は、感染細胞内でPB2蛋白の機能を阻害し、様々な亜型のインフルエンザウイルスに対する感染抵抗性を付与する事が示唆された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
平成26年度実施予定の細胞内抗体発現トランスジェニックマウスの作製をすでに開始している。
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| 今後の研究の推進方策 |
高病原性鳥インフルエンザ感染抵抗性家畜開発に向け、細胞内抗体発現トランスジェニックマウスの作製およびウイルス感染実験を実施し、細胞内抗体による生体での感染防御効果を検証する予定である。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
計画通り研究が遂行し、予想していた消耗品の使用量を抑えることが出来たため。
本年度も引き続き行う予定である、トランスジェニックマウス作製費用および飼育費用に使用する。
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