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2013 年度 実施状況報告書

遺伝子改変ヒトiPS細胞由来マクロファージを用いた悪性黒色腫に対する免疫療法

研究課題

研究課題/領域番号 25870545
研究種目

若手研究(B)

研究機関熊本大学

研究代表者

福島 聡  熊本大学, 医学部附属病院, 講師 (50398210)

研究期間 (年度) 2013-04-01 – 2015-03-31
キーワードiPS細胞 / 免疫療法 / 悪性黒色腫 / 細胞治療 / 腫瘍抗原 / 腫瘍マーカー / microRNA / マクロファージ
研究概要

免疫不全マウス(SCID)においてヒトメラノーマ細胞を用いた抗腫瘍実験を行うために、まず治療に用いる細胞を作成した。ヒトiPS細胞をOP9フィーダー細胞上でミエロイド系細胞に分化誘導し、C-MYC遺伝子をレンチウイルスを用いて導入、不死化した。この細胞はM-CSF依存性ひ無限に増殖し、マクロファージ様の表面マーカー及び機能を持っている。以下この細胞をiPS細胞由来ミエロイド細胞ライン(iPS-ML)と呼称する。iPS-MLはそのままでは抗腫瘍効果は限定的であるため、抗腫瘍作用を持つ分子の遺伝子改変を行う必要があった。メラノーマにおいては、治療としてインターフェロンα(IFN-α)およびβ(IFN-β)が用いられていることから、これらを遺伝子導入した細胞を作成した。SCIDマウスにヒトメラノーマを腹膜播種させ、iPS-ML-IFNα、iPS-ML-IFN-βにて治療実験を行ったが、いずれも、コントロール群に対して、極めて強い腫瘍抑制効果を示した。抗腫瘍効果のメカニズムを検討するためにiPS-ML-IFNα、iPS-ML-IFN-βおよびコントロールのiPS-MLを用いて、腫瘍貪食能、サイトカイン産生能、表面マーカーの検討を行った。以上の結果については、論文作成中である。また新規メラノーマ抗原の探索として、FOXM1について検討したところ、メラノーマ細胞株、患者組織において高発現していた。また細胞株における細胞増殖実験、およびMAPK経路との関与についても検討し、論文を投稿中である。一方、新規腫瘍マーカーとしての血清microRNAについては、複数のmicroRNAを用いることで、転移の検出ができることを見出し論文報告した。さらに、皮膚組織を用いて、mir-146aのSNPが健常者に比べてメラノーマ患者では、有意にCGフェノタイプが多いことを見出し発表した。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

当初の計画で予定していたCSPG4のscFvの遺伝子導入については、共同研究者であるピッツバーグ大とMTAは締結しているが、まだ先方において、準備中とのことでscFvを入手できていない。しかし、上述のようにCSPG4の遺伝子改変を行うまでもなく、IFN-αおよびIFN-βで十分な抗腫瘍効果が得られており、研究全体として進行に問題はない。
新規がん抗原の探索については、FOXM1について成果を得てすでに論文投稿中である。また、新規腫瘍マーカーとしてのmicroRNAについても、上述のように論文発表することができた。さらに血清中のEGFRやレプチンレセプターがそれぞれ腫瘍マーカーとなりうることを論文報告した。以上より、おおむね順調に進展していると考えている。

今後の研究の推進方策

iPS-MLの研究については、さらにその遊走能等について抗腫瘍効果のメカニズム解明を進めていく。さらに、IL-15など他の遺伝子改変についても施行予定である。iPS-MLはM-CSF存在下ではマクロファージ様であるが、GM-CSFとIL-4存在下では樹状細胞(DC)様となる。今後は、iPS-ML由来DCについても抗腫瘍実験を進めていく予定である。また、将来の臨床応用にむけては、安全性や副作用の検討が必須である。その点についてもマウスを用いて検討してく予定としている。
また新規メラノーマ抗原としては次にCDCA1についての検討を行う予定としている。さらに新規腫瘍マーカーとしては、最近microRNAが患者の毛髪からも検出可能という知見を得たので、メラノーマ患者でも検討して、さらに非侵襲的なマーカーの確立にむけて研究を進めて予定である。

次年度の研究費の使用計画

物品費に予算のほとんどを使用したが、端数として379円の残高が生じた。
379円の残高については、次年度に物品費の一部として使用する予定である。

  • 研究成果

    (45件)

すべて 2014 2013

すべて 雑誌論文 (42件) (うち査読あり 41件) 学会発表 (2件) 図書 (1件)

  • [雑誌論文] Case of Fusarium paronychia successfully treated with occlusive dressing of antifungal cream.2014

    • 著者名/発表者名
      Ikeda I, Ohno T, Ohno H, Miyazaki Y, Nishimoto K, Fukushima S, Makino T, Ihn H.
    • 雑誌名

      J Dermatol.

      巻: 41 ページ: 340-342

    • DOI

      10.1111/1346-8138.12420

    • 査読あり
  • [雑誌論文] miR-205 down-regulation promotes proliferation of dermatofibrosarcoma protuberans tumor cells by regulating LRP-1 and ERK phosphorylation.2014

    • 著者名/発表者名
      Kajihara I, Jinnin M, Harada M, Makino K, Honda N, Makino T, Igata T, Masuguchi S, Fukushima S, Ihn H.
    • 雑誌名

      Arch Dermatol Res.

      巻: 306 ページ: 367-374

    • DOI

      10.1007/s00403-014-1452-z.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Analysis of expression pattern of serum microRNA levels in patients with psoriasis.2014

    • 著者名/発表者名
      Koga Y, Jinnin M, Ichihara A, Fujisawa A, Moriya C, Sakai K, Fukushima S, Inoue Y, Ihn H.
    • 雑誌名

      J Dermatol Sci.

      巻: 74 ページ: 170-171

    • DOI

      10.1016/j.jdermsci.2014.01.005.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Sensitive detection of melanoma metastasis utilizing circulating microRNA expression profiles2014

    • 著者名/発表者名
      Sensitive detection of melanoma metastasis using circulating microRNA expression profiles. Shiiyama R, Fukushima S, Jinnin M, Yamashita J, Miyashita A, Nakahara S, Kogi A, Aoi J, Masuguchi S, Inoue Y, Ihn H.
    • 雑誌名

      Melanoma Res

      巻: in press ページ: -

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Clinical evaluation of moisturizers with physiological analysis of stratum corneum TARC and TSLP.2014

    • 著者名/発表者名
      Fukushima S, Morita E, Tanioka M, Miyachi Y, Murakami Y, Matsunaka H, Ihn H.
    • 雑誌名

      J Cosmetics, Dermatological Sciences and Applications

      巻: 4 ページ: 37-43

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Lymphocytic inflammation with CD123 positive cells is a prognostic factor of lupus erythematosus profundus.2014

    • 著者名/発表者名
      Miyashita A, Fukushima S, Makino T, Yoshino Y, Yamashita J, Honda N, Aoi J, Jinnin M, Inoue Y, Ihn H.
    • 雑誌名

      Acta Derm Venereol

      巻: in press ページ: -

    • DOI

      10.2340/00015555-1777

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Case of disseminated cutaneous Mycobacterium chelonae infection mimicking cutaneous vasculitis.2014

    • 著者名/発表者名
      Ichihara A, Jinnin M, Fukushima S, Inoue Y, Ihn H.
    • 雑誌名

      J Dermatol

      巻: in press ページ: -

    • 査読あり
  • [雑誌論文] miR-424 levels in hair shaft are increased in psoriasis patients.2014

    • 著者名/発表者名
      Tsuru Y, Jinnin M, Ichihara A, Fujisawa A, Moriya C, Sakai K, Fukushima S, Ihn H.
    • 雑誌名

      J Dermatol

      巻: in press ページ: -

    • DOI

      10.1111/1346-8138.12460.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] A case of psoriasis accompanied by arthritis after delivery.2014

    • 著者名/発表者名
      Kanemaru H, Jinnin M, Asao K, Ichihara A, Makino K, Kajihara I, Fujisawa A, Fukushima S, Ihn H.
    • 雑誌名

      Bioscience trends

      巻: in press ページ: -

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Clinical significance of serum VE-cadherin concentrations in inflammatory skin diseases.2014

    • 著者名/発表者名
      Kuriyama H, Jinnin M, Kanemaru H, Ichihara A, Fujisawa A, Moriya C, Fukushima S, Ihn H.
    • 雑誌名

      Ann Dermatol

      巻: in press ページ: -

    • 査読あり
  • [雑誌論文] MIRSNP rs2910164 of miR-146a is associated with the muscle involvement in polymyositis/dermatomyositis.2014

    • 著者名/発表者名
      Okada Y, Jinnin M, Makino T, Kajihara I, Makino K, Honda N, Nakayama W, Inoue K, Fukushima S, Ihn H.
    • 雑誌名

      Int J Dermatol

      巻: in press ページ: -

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Decreased IL-20 expression in scleroderma skin contributes to cutaneous fibrosis.2014

    • 著者名/発表者名
      Kudo H, Jinnin M, Asano Y, Trojanowska M, Nakayama W, Inoue K, Honda N, Kajihara I, Makino K, Fukushima S, Ihn H.
    • 雑誌名

      Arthritis Rheumatol

      巻: in press ページ: -

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Serum levels of leptin receptor in patients with systemic sclerosis.2014

    • 著者名/発表者名
      Ohyoshi Y, Makino T, Nakayama W, Fukushima S, Inoue Y, Jinnin M, Ihn H.
    • 雑誌名

      Rheumatol Int

      巻: in press ページ: -

    • 査読あり
  • [雑誌論文] A case of psoriasis accompanied by arthritis after delivery.2014

    • 著者名/発表者名
      Kanemaru H, Jinnin M, Asao A, Ichihara A, Makino K, Kajihara I, Fujisawa A, Fukushima S, Ihn H.
    • 雑誌名

      J Dermatol

      巻: in press ページ: -

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Up-regulation of miR-18a contributes to the epidermal necrolysis in severe drug eruptions.2014

    • 著者名/発表者名
      Ichihara A, Wang Z, Jinnin M, Izono Y, Shimozono N, Yamane K, Fujisawa A, Moriya C, Fukushima S, Inoue Y, Ihn H.
    • 雑誌名

      J Allergy Clin Immunol

      巻: in press ページ: -

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Angiopoietin-like Protein 2 Accelerates Carcinogenesis by Activating Chronic Inflammation and Oxidative Stress.2014

    • 著者名/発表者名
      Aoi J, Endo M, Kadomatsu T, Miyata K, Ogata A, Horiguchi H, Odagiri H, Masuda T, Fukushima S, Jinnin M, Hirakawa S, Sawa T, Akaike T, Ihn H, Oike Y.
    • 雑誌名

      Mol Cancer Res

      巻: 12 ページ: 239-49

    • DOI

      10.1158/1541-7786.MCR-13-0336

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Successful treatment of skin fistulas in systemic sclerosis patients with the combination of topical negative pressure therapy and split-thickness skin grafting.2014

    • 著者名/発表者名
      Kajihara I, Jinnin M, Yamada S, Ichihara A, Makino T, Igata T, Masuguchi S, Fukushima S, Ihn H.
    • 雑誌名

      Mod Rheumatol

      巻: 24 ページ: 374-6

    • DOI

      10.3109/14397595.2013.854065.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Dots/ globules on dermoscopy in nail-apparatus melanoma.2014

    • 著者名/発表者名
      Inoue Y, Menzies SW, Fukushima S, Nishi-Kogushi H, Miyashita A, Masuguchi S, Muchemwa F, Kageshita T, Ihn H.
    • 雑誌名

      Int J Dermatol

      巻: 53 ページ: 88-92

    • DOI

      10.1111/j.1365-4632.2011.05453.x.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Detection of hair root miR-19a as a novel diagnostic marker for psoriasis.2014

    • 著者名/発表者名
      Hirao H, Jinnin M, Ichihara A, Fujisawa A, Makino K, Kajihara I, Sakai K, Fukushima S, Inoue Y, Ihn H.
    • 雑誌名

      Eur J Dermatol

      巻: 23 ページ: 807-11

    • DOI

      10.1684/ejd.2013.2190.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Serum levels of leptin receptor in patients with malignant melanoma as a new tumor marker.2013

    • 著者名/発表者名
      Mizutani H, Fukushima S, Masuguchi S, Yamashita J, Miyashita A, Nakahara S, Aoi J, Inoue Y, Jinnin M, Ihn H.
    • 雑誌名

      Exp Dermatol

      巻: 22 ページ: 748-9

    • DOI

      10.1111/exd.12238.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] The rs2910164 G>C polymorphism in microRNA-146a is associated with the incidence of malignant melanoma.2013

    • 著者名/発表者名
      Yamashita J, Iwakiri T, Fukushima S, Jinnin M, Miyashita A, Hamasaki T, Makino T, Aoi J, Masuguchi S, Inoue Y, Ihn H.
    • 雑誌名

      Melanoma Res

      巻: 23 ページ: 13-20

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Serum epidermal growth factor receptor levels in patients with malignant melanoma.2013

    • 著者名/発表者名
      Kanemaru H, Fukushima S, Yamashita J, Jinnin M, Sakai K, Masuguchi M, Aoi J, Makino T, Inoue Y, Ihn H.
    • 雑誌名

      Clin Exp Dermatol

      巻: 38 ページ: 177-8

  • [雑誌論文] Role of c-Jun N-termainal kinase isoforms in the cellular activity of melanoma cell lines.2013

    • 著者名/発表者名
      Kogushi-Nishi M, Jinnin M, Kobayashi Y, Muchemwa FC, Hirano A, Makino T, Fukushima S, Masuguchi S, Ihsihara T, Ihn H.
    • 雑誌名

      Clin Exp Dermatol

      巻: 38 ページ: 890-6

    • DOI

      10.1111/ced.12102.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Association of linear IgA bullous disease with ulcerative colitis: a case of successful treatment with infliximab.2013

    • 著者名/発表者名
      Yamada S, Makino T, Jinnin M, Sakai K, Fukushima S, Inoue Y, Ihn H.
    • 雑誌名

      Dermatology.

      巻: 227 ページ: 295-8

    • DOI

      10.1159/000355354.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Hair miR-29a levels are decreased in patients with scleroderma.2013

    • 著者名/発表者名
      Takemoto R, Jinnin M, Wang Z, Kudo H, Inoue K, Nakayama W, Ichihara A, Igata T, Kajihara I, Fukushima S, Ihn H.
    • 雑誌名

      Exp Dermatol

      巻: 22 ページ: 832-3

    • DOI

      10.1111/exd.12245.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Detection of hair-microRNAs as the novel potent biomarker: Evaluation of the usefulness for the diagnosis of scleroderma.2013

    • 著者名/発表者名
      Wang Z, Jinnin M, Kudo H, Inoue K, Nakayama W, Honda N, Makino K, Kajihara I, Fukushima S, Inoue Y, Ihn H.
    • 雑誌名

      J Dermatol Sci

      巻: 72 ページ: 134-41

    • DOI

      10.1016/j.jdermsci.2013.06.018.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] miR-150 down-regulation contributes to the constitutive type I collagen overexpression in scleroderma dermal fibroblasts via the induction of integrin β3.2013

    • 著者名/発表者名
      Honda N, Jinnin M, Kira-Etoh T, Makino K, Kajihara I, Makino T, Fukushima S, Inoue Y, Okamoto Y, Hasegawa M, Fujimoto M, Ihn H.
    • 雑誌名

      Am J Pathol

      巻: 182 ページ: 206-16

    • DOI

      10.1016/j.ajpath.2012.09.023.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] The miR-146a rs2910164G/C polymorphism is associated with telangiectasia in systemic sclerosis.2013

    • 著者名/発表者名
      Sakoguchi A, Jinnin M, Makino T, Kajihara I, Makino K, Honda N, Nakayama W, Inoue K, Fukushima S, Ihn H.
    • 雑誌名

      Clin Exp Dermatol

      巻: 38 ページ: 99-100

    • DOI

      10.1111/j.1365-2230.2012.04453.x.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] microRNA-7 down-regulation mediates excess collagen expression in localized scleroderma.2013

    • 著者名/発表者名
      Etoh M, Jinnin M, Makino K, Yamane K, Nakayama W, Aoi J, Honda N, Kajihara I, Makino T, Fukushima S, Ihn H.
    • 雑誌名

      Arch Dermatol Res

      巻: 305 ページ: 9-15

    • DOI

      10.1007/s00403-012-1287-4.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Down-regulation of miR-124/ -214 in cutaneous squamous cell carcinoma mediates abnormal cell proliferation via the induction of ERK.2013

    • 著者名/発表者名
      Yamane K, Jinnin M, Etoh T, Kobayashi Y, Shimozono N, Fukushima S, Masuguchi S, Maruo K, Inoue Y, Ishihara T, Aoi J, Oike Y, Ihn H.
    • 雑誌名

      J Mol Med

      巻: 91 ページ: 69-81

    • DOI

      10.1007/s00109-012-0935-7

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Intravenous immunoglobulin treatment recovers the down-regulatied levels of Th1 cytokines in the sera and skin of scleroderma patients.2013

    • 著者名/発表者名
      Kudo H, Jinnin M, Yamane K, Makino T, Kajihara I, Makino K, Honda N, Nakayama W, Fukushima S, Ihn H.
    • 雑誌名

      J Dermatol Sci

      巻: 69 ページ: 77-80

    • DOI

      10.1016/j.jdermsci.2012.09.010.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Diccoidin domain receptor 2-micro RNA 196a -mediated negative feedback against excess type I collagen expression is impaired in scleroderma dermal fibroblasts.2013

    • 著者名/発表者名
      Makino K, Jinnin M, Aoi J, Hirano A, Kajihara I, Makino T, Sakai K, Fukushima S, Inoue Y, Ihn H.
    • 雑誌名

      J Invest Dermatol

      巻: 133 ページ: 110-119

    • DOI

      10.1038/jid.2012.252.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Serum miR-21 levels in patients with dermatomyositis.2013

    • 著者名/発表者名
      Shimada S, Jinnin M, Ogata A, Makino T, Kajihara I, Makino K, Honda N, Nakayama W, Inoue K, Fukushima S, Ihn H.
    • 雑誌名

      Clin Exp Rheumatol

      巻: 31 ページ: 161-2

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Hidradenocarcinoma showing prominent mucinous and squamous differentiation and associated with pgetoid cells.2013

    • 著者名/発表者名
      Honda Y, Tanigawa H, Harada M, Fukushima S, Masuguchi S, Ishihara T, Ihn H, Iyama K.
    • 雑誌名

      J Cutan Pathol

      巻: 40 ページ: 503-8

    • DOI

      10.1111/cup.12120.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Case of paraneoplastic pemphigus with follicular lymphoma treated with rituximab2013

    • 著者名/発表者名
      Aoi J, Makino K, Sakai K, Masuguchi S, Fukushima S, Jinnin M, Inoue Y, Koga H, Hashimoto T, Ihn H.
    • 雑誌名

      J Dermatol

      巻: 40 ページ: 285-6

    • DOI

      10.1111/1346-8138.12095.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] he down-regulation of microRNA let-7a contributes to the excessive expression of type I collagen in systemic and localized scleroderma.2013

    • 著者名/発表者名
      Makino K, Jinnin M, Hirano A, Yamane K, Eto M, Kusano T, Honda N, Kajihara K, Makino T, Sakai K, Masuguchi S, Fukushima S, Ihn H.
    • 雑誌名

      J Immunol, 190: 3905-3915, 2013.

      巻: 190 ページ: 3905-15

    • DOI

      10.4049/jimmunol.1200822.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Down-regulation of miR-223 contributes to the formation of Gottron’s eruption in dermatomyositis via the induction of PKCε.2013

    • 著者名/発表者名
      Inoue K, Jinnin M, Yamane K, Makino T, Kajihara I, Makino K, Honda N, Nakayama W, Fukushima S, Ihn H.
    • 雑誌名

      Eur J Dermatol

      巻: 23 ページ: 160-7

    • DOI

      10.1684/ejd.2013.1959.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Decreased miR-7 expression in the skin and sera of patients with dermatomyositis.2013

    • 著者名/発表者名
      Oshikawa Y, Jinnin M, Makino T, Kajihara I, Makino K,Honda N, Nakayama W, Inoue K, Fukushima S, Ihn H.
    • 雑誌名

      Acta Derm Venereol

      巻: 93 ページ: 273-6

    • DOI

      10.2340/00015555-1459.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Expression analysis of multiple microRNAs in each patient with scleroderma.2013

    • 著者名/発表者名
      Koba S, Jinnin M, Inoue K, Nakayama W, Honda N, Makino K, Kajihara I, Makino T, Fukushima S, Ihn H.
    • 雑誌名

      Exp Dermatol

      巻: 22 ページ: 489-91

    • DOI

      10.1111/exd.12173.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Scleroderma dermal fibroblasts overexpress vascular endothelial growth factor due to autocrine transforming growth factor β signaling.2013

    • 著者名/発表者名
      Kajihara I, Jinnin M, Honda N, Makino K, Makino T, Masuguchi S, Sakai K, Fukushima S, Inoue Y, Ihn H.
    • 雑誌名

      Mod Rheumatol

      巻: 23 ページ: 516-24

    • DOI

      10.1007/s10165-012-0698-6.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Geographical flushing of the children’s face: A new clinical entity.2013

    • 著者名/発表者名
      Jinnin M, Fukushima S, Inoue Y, Ihn H.
    • 雑誌名

      Case Rep Dermatol Med

      巻: - ページ: -

    • DOI

      10.1155/2013/802130

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Serum levels of tenascin-C in collagen diseases.2013

    • 著者名/発表者名
      Inoue K, Jinnin M, Hara Y, Makino K, Kajihara I, Makino T, Sakai K, Fukushima S, Inoue Y, Ihn H.
    • 雑誌名

      J DermatoL

      巻: 40 ページ: 715-9

    • DOI

      10.1111/1346-8138.12218.

    • 査読あり
  • [学会発表] メラノーマに対する遺伝子改変ヒトiPS細胞由来ミエロイドラインによる免 疫細胞療法2014

    • 著者名/発表者名
      福島聡、宮下梓、千住覚、尹浩信
    • 学会等名
      第35回日本炎症・再生医学会
    • 発表場所
      万国津梁館
    • 年月日
      20140701-20140704
  • [学会発表] The rs2910164 G>C polymorphism in microRNA-146a is associated with the pathogenesis of malignant melanoma2013

    • 著者名/発表者名
      Satoshi Fukushima, Junji Yammashita, Takuma Iwakiri, Masatoshi Jinnin, Azusa Miyashita, Jun Aoi, Hisashi Kanemaru, Katsunari Makino, Asako Ichihara, Yuji Inoue, Hironobu Ihn
    • 学会等名
      International Investigative Dermatology 2013,
    • 発表場所
      Edinburgh, Scotland
    • 年月日
      20130508-20130511
  • [図書] 皮膚悪性腫瘍「悪性黒色腫の治療 免疫療法 樹状細胞療法」2013

    • 著者名/発表者名
      福島聡
    • 総ページ数
      843
    • 出版者
      日本臨床社

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公開日: 2015-05-28  

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