| 研究実績の概要 |
近年、遺伝子発現を調節するのに大きな役割を演じることが知られているmicroRNA（miRNA）が、急性肺傷害／急性呼吸窮迫症候群（Acute Lung Injury/Acute Respiratory Distress Syndrome: ALI/ARDS）病態時の単球・マクロファージにおいて如何なる発現変化をするのか解析し、miRNAに関連した遺伝子導入によりALI/ARDSに対し将来の遺伝子治療法になるかをIn Vitro（細胞培養による実験系）, In Vivo（マウスを用いた実験系）により探索することを目的とした。本年度は、以下のIn Vitro系を中心に実験を行った。
細胞死を誘導するFasL, TNF-αのmRNAと相補的な配列を持つmiRNAの候補をデータベースで探索後、候補に上がったmiRNAのLPS投与後の発現変化を、THP-1細胞、マクロファージを用いた細胞培養実験にて観察した。また、そのmiRNAを遺伝子導入することや、特異的阻害作用を持つanti-miRを投与することによるTNF-αの発現が変化および肺胞上皮細胞等の細胞死の変化を観察した。また次世代シーケンサーIon PGMシステムを用いて経時的なmicroRNA(miRNA)の発現変化を観察した。miR-21等のmiRNAの変化を認め、Real Time PCR法にてmiR-21の増加を確認しその他のmiRNAに関しても現在real Time PCR法を行っているところである。また、これらの変化はそれぞれのmiRNAの相互関係が示唆されている。現在の結果をまとめ、今後論文にて発表予定である。
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