染色体レベルの高度なゲノム編集を可能にするCRISPR/Casシステムの開発

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25890014
• 研究機関: 広島大学
• 研究代表者: 佐久間 哲史 広島大学, 理学(系)研究科(研究院), 特任助教 (90711143)
• 研究期間 (年度): 2013-08-30 – 2015-03-31
• キーワード: ゲノム編集 / ゲノム生物工学 / 遺伝子ノックイン / CRISPR/Cas9

研究実績の概要

本年度は、前年度に確立したCRISPR/Cas9のオールインワンベクターシステムを用いて、効率的な遺伝子ノックインのシステム（PITCh法）を確立し、Nature Communications誌に論文を発表した。PITCh法は、マイクロホモロジー媒介性末端結合（MMEJ）と呼ばれる修復機構を利用した新規遺伝子ノックイン法であり、CRISPR/Cas9システムを用いてPITCh法を実行するためには、Cas9ヌクレアーゼと複数のガイドRNAを効率的に発現させることが必要不可欠である。本研究により、相同組換えの効率が低い細胞であっても高効率な遺伝子ノックインが実現可能となり、更にはこれまで遺伝子ノックインが極めて困難であった生物種（カイコやアフリカツメガエルなど）においてもノックインが適用できることが証明された。
また、本年度はこれまでのオールインワンベクターシステムを拡張し、ヌクレアーゼ活性を不活化させたCas9タンパク質（dCas9）や、dCas9に制限酵素FokIのヌクレアーゼドメインを付加したFokI-dCas9にも対応可能なアドオンを開発した。これらの拡張パックと従来のシステムを併用し、マウス受精卵での変異導入および複数遺伝子の同時破壊が可能であることを示した。これにより、本研究によって確立されたオールインワンCRISPR/Cas9ベクターシステムは、培養細胞のみならず、動物個体においても機能的であることが証明された。

現在までの達成度 (段落)

26年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

26年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Desmocollin-2 alone forms functional desmosomal plaques, with the plaque formation requiring the juxtamembrane region and plakophilins (2015)
  • 著者名/発表者名: Fujiwara M, Nagatomo A, Tsuda M, Obata S, Sakuma T, Yamamoto T, Suzuki ST
  • 雑誌名: J Biochem 巻: - ページ: -
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation of mutant mice via the CRISPR/Cas9 system using FokI-dCas9 (2015)
  • 著者名/発表者名: Hara S, Tamano M, Yamashita S, Kato T, Saito T, Sakuma T, Yamamoto T, Inui M, Takada S
  • 雑誌名: Sci Rep 巻: - ページ: -
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Production of knockout mice by DNA microinjection of various CRISPR/Cas9 vectors into freeze-thawed fertilized oocytes (2015)
  • 著者名/発表者名: Nakagawa Y, Sakuma T, Sakamoto T, Ohmuraya M, Nakagata N, Yamamoto T
  • 雑誌名: BMC Biotechnol 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.1186/s12896-015-0144-x
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Cloning-free CRISPR/Cas system facilitates functional cassette knockin in mice (2015)
  • 著者名/発表者名: Aida T, Chiyo K, Usami T, Ishikubo H, Imahashi R, Wada Y, Tanaka K, Sakuma T, Yamamoto T, Tanaka K
  • 雑誌名: Genome Biol 巻: 16 ページ: 87
  • DOI: 10.1186/s13059-015-0653-x
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Homeolog-specific targeted mutagenesis in Xenopus laevis using TALENs (2015)
  • 著者名/発表者名: Nakade S, Sakuma T, Sakane Y, Hara Y, Kurabayashi A, Kashiwagi K, Kashiwagi A, Yamamoto T, Obara M
  • 雑誌名: In Vitro Cell Dev Biol Anim 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.1007/s11626-015-9912-0
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Hox10-regulated endodermal cell migration is essential for development of the ascidian intestine (2015)
  • 著者名/発表者名: Kawai N, Ogura Y, Ikuta T, Saiga H, Hamada M, Sakuma T, Yamamoto T, Satoh N, Sasakura Y
  • 雑誌名: Dev Biol 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.1016/j.ydbio.2015.03.018
  • 査読あり
• [雑誌論文] A High Excision Potential of TALENs for Integrated DNA of HIV-Based Lentiviral Vector (2015)
  • 著者名/発表者名: Ebina H, Kanemura Y, Misawa N, Sakuma T, Kobayashi T, Yamamoto T, Koyanagi Y
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 10 ページ: e0120047
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0120047
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Precise in-frame integration of exogenous DNA mediated by CRISPR/Cas9 system in zebrafish (2015)
  • 著者名/発表者名: Hisano Y, Sakuma T, Nakade S, Ohga R, Ota S, Okamoto H, Yamamoto T, Kawahara A
  • 雑誌名: Sci Rep 巻: 5 ページ: 8841
  • DOI: 10.1038/srep08841
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Tailor-made TALEN system for highly efficient targeted gene replacement in the rice blast fungus (2015)
  • 著者名/発表者名: Arazoe T, Ogawa T, Miyoshi K, Yamato T, Ohsato S, Sakuma T, Yamamoto T, Arie T, Kuwata S
  • 雑誌名: Biotechnol Bioeng 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.1002/bit.25559
  • 査読あり
• [雑誌論文] The Microtubule-Depolymerizing Activity of a Mitotic Kinesin Protein KIF2A Drives Primary Cilia Disassembly Coupled with Cell Proliferation (2015)
  • 著者名/発表者名: Miyamoto T, Hosoba K, Ochiai H, Royba E, Izumi H, Sakuma T, Yamamoto T, Dynlacht BD, Matsuura S
  • 雑誌名: Cell Rep 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.1016/j.celrep.2015.01.003
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Unliganded thyroid hormone receptor α regulates developmental timing via gene repression in Xenopus tropicalis (2015)
  • 著者名/発表者名: Choi J, Suzuki KT, Sakuma T, Shewade L, Yamamoto T, Buchholz DR
  • 雑誌名: Endocrinology 巻: 156 ページ: 735-744
  • DOI: 10.1210/en.2014-1554
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Precise correction of the dystrophin gene in duchenne muscular dystrophy patient induced pluripotent stem cells by TALEN and CRISPR-Cas9 (2015)
  • 著者名/発表者名: Li HL, Fujimoto N, Sasakawa N, Shirai S, Ohkame T, Sakuma T, Tanaka M, Amano N, Watanabe A, Sakurai H, Yamamoto T, Yamanaka S, Hotta A
  • 雑誌名: Stem Cell Reports 巻: 4 ページ: 143-154
  • DOI: 10.1016/j.stemcr.2014.10.013
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Microhomology-mediated end-joining-dependent integration of donor DNA in cells and animals using TALENs and CRISPR/Cas9 (2014)
  • 著者名/発表者名: Nakade S, Tsubota T, Sakane Y, Kume S, Sakamoto N, Obara M, Daimon T, Sezutsu H, Yamamoto T, Sakuma T, Suzuki KT
  • 雑誌名: Nat Commun 巻: 5 ページ: 5560
  • DOI: 10.1038/ncomms6560
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Stochastic promoter activation affects Nanog expression variability in mouse embryonic stem cells (2014)
  • 著者名/発表者名: Ochiai H, Sugawara T, Sakuma T, Yamamoto T
  • 雑誌名: Sci Rep 巻: 4 ページ: 7125
  • DOI: 10.1038/srep07125
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Targeted gene disruption by use of transcription activator-like effector nuclease (TALEN) in the water flea Daphnia pulex (2014)
  • 著者名/発表者名: Hiruta C, Ogino Y, Sakuma T, Toyota K, Miyagawa S, Yamamoto T, Iguchi T
  • 雑誌名: BMC Biotechnol 巻: 14 ページ: 95
  • DOI: 10.1186/s12896-014-0095-7
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Simple knockout by electroporation of engineered endonucleases into intact rat embryos (2014)
  • 著者名/発表者名: Kaneko T, Sakuma T, Yamamoto T, Mashimo T
  • 雑誌名: Sci Rep 巻: 4 ページ: 6382
  • DOI: 10.1038/srep06382
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Sterol side chain reductase 2 is a key enzyme in the biosynthesis of cholesterol, the common precursor of toxic steroidal glycoalkaloids in potato (2014)
  • 著者名/発表者名: Sawai S, Ohyama K, Yasumoto S, Seki H, Sakuma T, Yamamoto T, Takebayashi Y, Kojima M, Sakakibara H, Aoki T, Muranaka T, Saito K, Umemoto N
  • 雑誌名: Plant Cell 巻: 26 ページ: 3763-3774
  • DOI: 10.1105/tpc.114.130096
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Down syndrome-associated haematopoiesis abnormalities created by chromosome transfer and genome editing technologies (2014)
  • 著者名/発表者名: Kazuki Y, Yakura Y, Abe S, Osaki M, Kajitani N, Kazuki K, Takehara S, Honma K, Suemori H, Yamazaki S, Sakuma T, Toki T, Shimizu R, Nakauchi H, Yamamoto T, Oshimura M
  • 雑誌名: Sci Rep 巻: 4 ページ: 6136
  • DOI: 10.1038/srep06136
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] EDEM2 initiates mammalian glycoprotein ERAD by catalyzing the first mannose trimming step (2014)
  • 著者名/発表者名: Ninagawa S, Okada T, Sumitomo Y, Kamiya Y, Kato K, Horimoto S, Ishikawa T, Takeda S, Sakuma T, Yamamoto T, Mori K
  • 雑誌名: J Cell Biol 巻: 206 ページ: 347-356
  • DOI: 10.1083/jcb.201404075
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Highly efficient targeted mutagenesis in one-cell mouse embryos mediated by the TALEN and CRISPR/Cas systems (2014)
  • 著者名/発表者名: Yasue A, Mitsui SN, Watanabe T, Sakuma T, Oyadomari S, Yamamoto T, Noji S, Mito T, Tanaka E
  • 雑誌名: Sci Rep 巻: 4 ページ: 5705
  • DOI: 10.1038/srep05705
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Multiplex genome engineering in human cells using all-in-one CRISPR/Cas9 vector system (2014)
  • 著者名/発表者名: Sakuma T, Nishikawa A, Kume S, Chayama K, Yamamoto T
  • 雑誌名: Sci Rep 巻: 4 ページ: 5400
  • DOI: 10.1038/srep05400
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [学会発表] Vectors for TALEN- and CRISPR/Cas9-mediated genome editing (2015)
  • 著者名/発表者名: Tetsushi Sakuma
  • 学会等名: 第21回日本遺伝子治療学会学術集会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2015-07-24 – 2015-07-26
  • 招待講演
• [学会発表] ゲノム編集の最前線と合成生物学への展開 (2015)
  • 著者名/発表者名: 佐久間哲史
  • 学会等名: 2015アジレント ゲノミクスフォーラム
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2015-06-16
  • 招待講演
• [学会発表] Front-line of genome editing technology for animal cell engineering (2015)
  • 著者名/発表者名: Tetsushi Sakuma
  • 学会等名: The 24th Meeting of the European Society for Animal Cell Technology
  • 発表場所: Barcelona, Spain
  • 年月日: 2015-05-31 – 2015-06-03
  • 招待講演
• [学会発表] Platinum TALENおよびマルチガイドCRISPRシステムを用いたゲノム編集 (2015)
  • 著者名/発表者名: 佐久間哲史
  • 学会等名: ゲノム編集マウスワークショップ
  • 発表場所: つくば
  • 年月日: 2015-03-17
  • 招待講演
• [学会発表] PITCh systems: MMEJ-assisted gene knockin in human cells using TALENs and CRISPR/Cas9 (2015)
  • 著者名/発表者名: Tetsushi Sakuma, Shota Nakade, Yuto Sakane, Ken-ichi T Suzuki, Takashi Yamamoto
  • 学会等名: CRISPR Precision Gene Editing Congress
  • 発表場所: MA, USA
  • 年月日: 2015-02-25 – 2015-02-27
• [学会発表] MMEJ-mediated integration of donor DNA in cells and animals using TALENs and CRISPR/Cas9 (2015)
  • 著者名/発表者名: Shota Nakade, Takuya Tsubota, Yuto Sakane, Satoshi Kume, Naoaki Sakamoto, Masanobu Obara, Takaaki Daimon, Hideki Sezutsu, Takashi Yamamoto, Tetsushi Sakuma, Ken-ichi T. Suzuki
  • 学会等名: Keystone Symposia: Precision Genome Engineering and Synthetic Biology
  • 発表場所: MT, USA
  • 年月日: 2015-01-11 – 2015-01-16
• [学会発表] Identification of Sterol Side Chain Reductase 2 (SSR2), a Key Enzyme in the Biosynthesis of Cholesterol As the Common Precursor of Toxic Steroidal Glycoalkaloids in Potato (2015)
  • 著者名/発表者名: Kazuki Saito, Satoru Sawai, Kiyoshi Ohyama, Shuhei Yasumoto, Hikaru Seki, Tetsushi Sakuma, Takashi Yamamoto, Yumiko Takebayashi, Mikiko Kojima, Hitoshi Sakakibara, Toshio Aoki, Toshiya Muranaka, Naoyuki Umemoto
  • 学会等名: International Plant & Animal Genome XXIII
  • 発表場所: CA, USA
  • 年月日: 2015-01-10 – 2015-01-14
  • 招待講演
• [学会発表] ゲノム編集の基礎と動物における利用の現状 (2014)
  • 著者名/発表者名: 佐久間哲史
  • 学会等名: 平成26年度日本実験動物技術者協会 関西支部 秋季広島大会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2014-11-29 – 2014-11-30
  • 招待講演
• [学会発表] Functional analysis of Oct60 in adult organ formation of Xenopus laevis (2014)
  • 著者名/発表者名: Naoto Ito, Tetsushi Sakuma, Takashi Yamamoto, Tsutomu Kinoshita
  • 学会等名: 第37回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] Gene expression and function of Oct91 during lateral line formation in Xenopus laevis (2014)
  • 著者名/発表者名: Aya Amakawa, Tetsushi Sakuma, Takashi Yamamoto, Tsutomu Kinoshita
  • 学会等名: 第37回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] ゲノム編集技術をもちいた培養精子幹細胞株の遺伝子改変 (2014)
  • 著者名/発表者名: 佐藤卓也, 佐久間哲史, 片桐久美子, 越後貫成美, 小倉淳郎, 山本 卓, 小川毅彦
  • 学会等名: 第37回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] ゲノム編集によるMMEJを利用した汎用的な遺伝子ノックイン法の確立 (2014)
  • 著者名/発表者名: 中出翔太, 坂根祐人, 佐久間哲史, 小原政信, 鈴木賢一, 山本 卓
  • 学会等名: 第37回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] マウス胚性幹細胞におけるNanogプロモーターの確率的活性化が発現量の不均一性に影響する (2014)
  • 著者名/発表者名: 落合 博, 菅原武志, 佐久間哲史, 山本 卓
  • 学会等名: 第37回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] ネフロン前駆細胞特異的レポーター遺伝子を持つiPS細胞の樹立 (2014)
  • 著者名/発表者名: 賀来祐介, 太口敦博, 佐久間哲史, 山本 卓, 西中村隆一
  • 学会等名: 第37回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] 有用なモデル動物となり得る、イベリアトゲイモリを用いた遺伝子操作法の確立 (2014)
  • 著者名/発表者名: 林 利憲, 茗荷あゆみ, 佐久間哲史, 亀井保博, 横山 仁, 山本 卓, 竹内 隆
  • 学会等名: 第37回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] グルタミン酸トランスポーターGLASTのヒトレアバリアントは網膜神経節細胞の脆弱性にin vivoで寄与する (2014)
  • 著者名/発表者名: 今橋里沙, 相田知海, 柳澤美智子, 佐久間哲史, 宇佐美貴子, 石久保春美, 山本 卓, 田中光一
  • 学会等名: 第37回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] ヒト紡錘体形成チェックポイント欠損症における細胞増殖に共役した一次繊毛退縮制御の破綻による繊毛病発症機構 (2014)
  • 著者名/発表者名: 宮本達雄, 細羽康介, 落合 博, Royba Ekaterina, 佐久間哲史, 山本 卓, 松浦伸也
  • 学会等名: 第37回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] 核の凝縮機構の解析ー無細胞アポトーシス系を用いて (2014)
  • 著者名/発表者名: 刀祢重信, 杉本憲治, 網代廣三, 佐久間哲史, 山本 卓, 栗林 太
  • 学会等名: 第37回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] 機能カセットノックインマウスのためのCRISPR/Casを用いたin vivoゲノム編集 (2014)
  • 著者名/発表者名: 相田知海, Keiho Chiyo, 佐久間哲史, 宇佐美貴子, 石久保春美, 今橋里沙, 田中謙二, 山本 卓, 田中光一
  • 学会等名: 第37回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] ゲノム編集技術による簡便迅速かつ高効率な次世代染色体工学の開発 (2014)
  • 著者名/発表者名: 野村 淳, 佐久間哲史, 神田暁史, 岸本恵子, 前田知花, 外丸祐介, 山本 卓, 内匠 透
  • 学会等名: 第37回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] マルチgRNAシステムを用いたCRISPR/Cas9によるゲノム編集 (2014)
  • 著者名/発表者名: 佐久間哲史, 中出翔太, 西川綾美, 茶山一彰, 鈴木賢一, 山本 卓
  • 学会等名: 第37回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] Transcription activator-like effector nucleases (TALENs)システムを用いて作製したphosphatase and tensin homolog (PTEN)ノックアウトメダカ (2014)
  • 著者名/発表者名: 松崎ゆり子, 佐久間哲史, 山本 卓, 佐谷秀行
  • 学会等名: 第37回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] Front-line of genome engineering technologies (2014)
  • 著者名/発表者名: Tetsushi Sakuma
  • 学会等名: The 27th Annual Meeting of Japanese Association for Animal Cell Technology
  • 発表場所: 北九州
  • 年月日: 2014-11-11 – 2014-11-14
  • 招待講演
• [学会発表] Analysis of the effect on HBV life cycle by HBV genome editing using TALEN and CRISPR/Cas9 system (2014)
  • 著者名/発表者名: Hiromi Abe, Tetsushi Sakuma, Masataka Tsuge, Nobuhiko Hiraga, Michio Imamura, Nelson Hayes, Hiroshi Aikata, Takashi Yamamoto, Kazuaki Chayama
  • 学会等名: AASLD The Liver Meeting 2014
  • 発表場所: MA, USA
  • 年月日: 2014-11-07 – 2014-11-11
• [学会発表] Platinum TALENおよびCRISPR/Cas9を用いたゲノム編集 (2014)
  • 著者名/発表者名: 佐久間哲史
  • 学会等名: 第39回日本比較内分泌学会大会
  • 発表場所: 岡崎
  • 年月日: 2014-11-07 – 2014-11-09
  • 招待講演
• [学会発表] Unliganded thyroid hormone receptor alpha regulates tissue sensitivity and gene repression as revealed by gene knockout in Xenopus tropicalis (2014)
  • 著者名/発表者名: Jinyoung Choi, Ken-ichi T. Suzuki, Tetsushi Sakuma, Leena Shewade, Takashi Yamamoto, Daniel R. Buchholz
  • 学会等名: 6th Great Lakes Nuclear Receptor Conference
  • 発表場所: WI, USA
  • 年月日: 2014-10-17 – 2014-10-18
• [学会発表] Highly efficient targeted mutagenesis in one-cell mouse embryos mediated by TALEN and CRISPR/Cas systems (2014)
  • 著者名/発表者名: Akihiro Yasue, Silvia N. Mitsui, Takahito Watanabe, Tetsushi Sakuma, Seiichi Oyadomari, Takashi Yamamoto, Sumihare Noji, Taro Mito, Eiji Tanaka
  • 学会等名: X Meeting Spanish Society for Developmental Biology
  • 発表場所: Madrid, Spain
  • 年月日: 2014-10-13 – 2014-10-15
• [学会発表] ゲノム編集の基礎と最新動向 (2014)
  • 著者名/発表者名: 佐久間哲史
  • 学会等名: 第4 回ゲノム編集研究会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [学会発表] Platinum TALENおよびCRISPRマルチガイドシステムを用いたゲノム編集 (2014)
  • 著者名/発表者名: 佐久間哲史, 中出翔太, 坂本尚昭, 鈴木賢一, 山本 卓
  • 学会等名: 第4 回ゲノム編集研究会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [学会発表] Duchenne型筋ジストロフィーiPS細胞の遺伝子修復とゲノムワイド変異解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 李 紅梅, 藤本直子, 笹川典子, 白井紗矢, 大亀登紀子, 佐久間哲史, 田中道廣, 天野直己, 渡辺 亮, 櫻井英俊, 山本 卓, 山中伸弥, 堀田秋津
  • 学会等名: 第4 回ゲノム編集研究会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [学会発表] ゲノム編集技術による簡便迅速かつ高効率な次世代染色体工学の開発 (2014)
  • 著者名/発表者名: 野村 淳, 佐久間哲史, 神田暁史, 岸本恵子, 前田知花, 外丸祐介, 山本 卓, 内匠 透
  • 学会等名: 第4 回ゲノム編集研究会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [学会発表] CRISPR/Casによるノックインマウス作製の効率化 (2014)
  • 著者名/発表者名: 相田知海, Keiho Chiyo, 佐久間哲史, 宇佐美貴子, 石久保春美, 今橋 里沙, 田中謙二, 山本 卓, 田中光一
  • 学会等名: 第4 回ゲノム編集研究会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [学会発表] ゲノム編集技術を用いた遺伝子改変ラット作製の現状 (2014)
  • 著者名/発表者名: 金子武人, 佐久間哲史, 山本 卓, 真下知士
  • 学会等名: 第4 回ゲノム編集研究会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [学会発表] CRISPR/Cas9 システムを用いた精巧な遺伝子導入技術の開発 (2014)
  • 著者名/発表者名: 久野 悠, 佐久間哲史, 太田 聡, 王賀理恵, 岡本 仁, 山本 卓, 川原敦雄
  • 学会等名: 第4 回ゲノム編集研究会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [学会発表] ツメガエルにおける簡便なノックイン技術の確立:PITChシステム (2014)
  • 著者名/発表者名: 鈴木賢一, 坂根祐人, 佐久間哲史, 山本 卓
  • 学会等名: 第4 回ゲノム編集研究会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [学会発表] ゲノム編集のHIVへの応用 (2014)
  • 著者名/発表者名: 蝦名博貴, 金村優香, 三沢尚子, 佐久間哲史, 小林朋子, 山本 卓, 小柳義夫
  • 学会等名: 第4 回ゲノム編集研究会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [学会発表] ヒト培養細胞におけるMMEJを利用した汎用的な遺伝子ノックイン法の確立 (2014)
  • 著者名/発表者名: 中出翔太, 佐久間哲史, 坂本尚昭, 鈴木賢一, 山本 卓
  • 学会等名: 第4 回ゲノム編集研究会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [学会発表] 一塩基置換導入法による高発がん性遺伝病の変異の特定 (2014)
  • 著者名/発表者名: 落合 博, 宮本達雄, 佐久間哲史, 山本 卓, 松浦伸也
  • 学会等名: 第4 回ゲノム編集研究会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [学会発表] ゲノム編集技術をもちいた培養精子幹細胞株の遺伝子改変法の開発 (2014)
  • 著者名/発表者名: 佐藤卓也, 佐久間哲史, 片桐久美子, 越後貫成美, 小倉淳郎, 山本 卓, 小川毅彦
  • 学会等名: 第4 回ゲノム編集研究会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [学会発表] 糸状菌型Platinum TALENの作製とイネいもち病菌(糸状菌)における高効率遺伝子改変 (2014)
  • 著者名/発表者名: 荒添貴之, 小川哲央, 大里修一, 佐久間哲史, 山本 卓, 有江 力, 桑田 茂
  • 学会等名: 第4 回ゲノム編集研究会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [学会発表] TALENを用いた麹菌Aspergillus oryzaeにおけるゲノム編集 (2014)
  • 著者名/発表者名: 水谷 治, 荒添貴之, 利田賢次, 林 梨咲, 大里修一, 佐久間哲史, 山本 卓, 桑田 茂, 山田 修
  • 学会等名: 第4 回ゲノム編集研究会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [学会発表] TALENを用いたジャガイモグリコアルカロイド生合成酵素遺伝子の破壊 (2014)
  • 著者名/発表者名: 安本周平, 關 光, 澤井 学, 大山 清, 梅基直行, 佐久間哲史, 山本 卓, 斉藤和希, 村中俊哉
  • 学会等名: 第4 回ゲノム編集研究会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [学会発表] ミジンコ（Daphnia pulex）におけるPlatinum TALENを用いた標的遺伝子破壊法の確立 (2014)
  • 著者名/発表者名: 蛭田千鶴江, 荻野由紀子, 佐久間哲史, 豊田賢治, 山本 卓, 井口泰泉
  • 学会等名: 第4 回ゲノム編集研究会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [学会発表] Increased or decreased expression of the ladybird bomeobox1 causes scoliosis in zebrafish (2014)
  • 著者名/発表者名: Long Guo, Hiroshi Yamashita, Tetsushi Sakuma, Ikuyo Kou, Aki Takimoto, Takashi Yamamoto, Taiji Adachi, Yuji Hiraki, Shiro Ikegawa, Chisa Shukunami
  • 学会等名: 第4 回ゲノム編集研究会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [学会発表] TALENを用いたメダカの環境依存的性決定機構の解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 竹中亨彰, 濱崎 心, 内村友哉, 長船奈津美, 高木久徳, 佐久間哲史, 山本 卓, 北野 健
  • 学会等名: 第4 回ゲノム編集研究会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [学会発表] アフリカツメガエルにおけるTALENを用いた標的遺伝子の改変 (2014)
  • 著者名/発表者名: 坂根祐人, 佐久間哲史, 鈴木美有紀, 柏木啓子, 柏木昭彦, 坂本尚昭, 山本 卓, 鈴木賢一
  • 学会等名: 第4 回ゲノム編集研究会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [学会発表] In vivo monitoring of histone H3 lysine 9 acetylation using Mintbody transgenic Xenopus laevis during embryogenesis and tail regeneration (2014)
  • 著者名/発表者名: 鈴木美有紀, 坂根祐人, 佐久間哲史, 坂本尚昭, 山本 卓, 鈴木賢一
  • 学会等名: 第4 回ゲノム編集研究会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [学会発表] ゲノム編集技術を用いた鳥類性決定関連遺伝子の解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 枡岡久子, 中川祐樹, 江崎 僚, 佐久間哲史, 黒岩麻里, 山本 卓, 堀内浩幸
  • 学会等名: 第4 回ゲノム編集研究会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [学会発表] TALENによる効率的な遺伝子破壊マウスの作製―体外受精により得られた凍結受精卵の使用と採卵に用いる雌マウスの週齢検討― (2014)
  • 著者名/発表者名: 中川佳子, 佐久間哲史, 中潟直己, 大村谷昌樹, 山本 卓
  • 学会等名: 第4 回ゲノム編集研究会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [学会発表] Platinum TALENによる高速・高効率なノックインマウス作製とヒトゲノム多様性の個体レベルでの機能解釈 (2014)
  • 著者名/発表者名: 今橋里沙, 相田知海, 柳澤美智子, 佐久間哲史, 宇佐美貴子, 石久保春美, 山本 卓, 田中光一
  • 学会等名: 第4 回ゲノム編集研究会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [学会発表] 高活性型Platinum TALENを用いたゲノム編集 (2014)
  • 著者名/発表者名: 佐久間哲史
  • 学会等名: 第1回KBRPワークショップ
  • 発表場所: 熊本
  • 年月日: 2014-10-03
  • 招待講演
• [学会発表] Unliganded thyroid hormone receptor alpha regulates gene repression and developmental timing as revealed by gene knockout in Xenopus tropicalis (2014)
  • 著者名/発表者名: Jinyoung Choi, Ken-ichi Suzuki, Tetsushi Sakuma, Leena Shewade, Takashi Yamamoto, Daniel R. Buchholz
  • 学会等名: 15th International Xenopus Conference
  • 発表場所: CA, USA
  • 年月日: 2014-08-24 – 2014-08-28
• [学会発表] Genome editing reveals a novel function of keratin in fin formation in X. laevis (2014)
  • 著者名/発表者名: Ken-ichi T. Suzuki, Keiko Kashiwagi, Tetsushi Sakuma, Akihiko Kashiwagi, Makoto Mochii, Takashi Yamamoto
  • 学会等名: 15th International Xenopus Conference
  • 発表場所: CA, USA
  • 年月日: 2014-08-24 – 2014-08-28
• [学会発表] Targeted mutagenesis of multiple and paralogous genes in Xenopus laevis using two pairs of TALENs (2014)
  • 著者名/発表者名: Yuto Sakane, Tetsushi Sakuma, Keiko Kashiwagi , Akihiko Kashiwagi, Takashi Yamamoto, Ken-ichi T Suzuki
  • 学会等名: 15th International Xenopus Conference
  • 発表場所: CA, USA
  • 年月日: 2014-08-24 – 2014-08-28
• [学会発表] Stochastic promoter activation affects gene expression variability in murine embryonic stem cells (2014)
  • 著者名/発表者名: Hiroshi Ochiai, Takeshi Sugawara, Ken-ichi Suzuki, Tetsushi Sakuma, Takashi Yamamoto
  • 学会等名: Cold Spring Harbor Laboratory Conference
  • 発表場所: NY, USA
  • 年月日: 2014-08-19 – 2014-08-23
• [学会発表] Genome editing using Platinum TALENs (2014)
  • 著者名/発表者名: Tetsushi Sakuma, Ken-ichi Suzuki, Takashi Yamamoto
  • 学会等名: FASEB Science Research Conference: Genome Engineering - Cutting-Edge Research and Applications
  • 発表場所: Nassau, Bahamas
  • 年月日: 2014-06-22 – 2014-06-27
• [学会発表] Ultra-rapid and highly efficient in vivo genome editing in mice (2014)
  • 著者名/発表者名: Tomomi Aida, Tetsushi Sakuma, Takako Usami, Harumi Ishikubo, Risa Imahashi, Keiho Chiyo, Pawel Obrocki, Takashi Yamamoto, Kohichi Tanaka
  • 学会等名: FASEB Science Research Conference: Genome Engineering - Cutting-Edge Research and Applications
  • 発表場所: Nassau, Bahamas
  • 年月日: 2014-06-22 – 2014-06-27
• [学会発表] ゲノム編集の原理と基礎知識 (2014)
  • 著者名/発表者名: 佐久間哲史
  • 学会等名: 第66回日本細胞生物学会大会
  • 発表場所: 奈良
  • 年月日: 2014-06-11 – 2014-06-13
  • 招待講演
• [学会発表] Knockout of genes in the chordate Ciona intestinalis (2014)
  • 著者名/発表者名: Nicholas Treen, Haruka Sasaki, Keita Yoshida, Akiko Hozumi, Tetsushi Sakuma, Takashi Yamamoto, Yasunori Sasakura
  • 学会等名: 第47回日本発生生物学会
  • 発表場所: 愛知
  • 年月日: 2014-05-27 – 2014-05-30
• [学会発表] TALEN-mediated genome editing is very useful in Iberian ribbed newts (Pleurodeles waltl), an experimental model animal for regeneration (2014)
  • 著者名/発表者名: Toshinori Hayashi, Kousuke Sakamoto, Tetsushi Sakuma, Ayumi Myouga, Naoki Yokotani, Takeshi Inoue, Eri Kawaguchi, Kiyokazu Agata, Takashi Yamamoto, Takashi Takeuchi
  • 学会等名: 第47回日本発生生物学会
  • 発表場所: 愛知
  • 年月日: 2014-05-27 – 2014-05-30
• [学会発表] Targeted genome editing using Platinum TALENs (2014)
  • 著者名/発表者名: Takashi Yamamoto, Kenichi Suzuki, Tetsushi Sakuma
  • 学会等名: 第47回日本発生生物学会
  • 発表場所: 愛知
  • 年月日: 2014-05-27 – 2014-05-30
• [学会発表] A new strategy for gene knock-in in Xenopus laevis using Platinum TALENs (2014)
  • 著者名/発表者名: Yuto Sakane, Tetsushi Sakuma, Miyuki Suzuki, Takashi Yamamoto, Ken-ichi Suzuki
  • 学会等名: 第47回日本発生生物学会
  • 発表場所: 愛知
  • 年月日: 2014-05-27 – 2014-05-30
• [図書] Targeted Genome Editing Using Engineered Nucleases: ZFNs, TALENs, and the CRISPR/Cas9 System (2015)
  • 著者名/発表者名: Sakuma T, Yamamoto T (Yamamoto T, ed.)
  • 総ページ数: 205
  • 出版者: Springer Japan
• [図書] 実験医学別冊「今すぐ始めるゲノム編集」 (2014)
  • 著者名/発表者名: 佐久間哲史（山本卓 編）
  • 総ページ数: 205
  • 出版者: 羊土社
• [備考] 広島大学 分子遺伝学研究室
  • URL: http://www.mls.sci.hiroshima-u.ac.jp/smg/index.html