| 研究課題/領域番号 |
26253021
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
深山 正久 東京大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (70281293)
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| 研究期間 (年度) |
2014-06-27 – 2019-03-31
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| キーワード | 胃癌 / 病理学 / 個別化医療 / 分子型 / 多様性 / 間質間葉系細胞 / 幹細胞 |
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| 研究実績の概要 |
胃癌は一様ではなく，組織像は多様多彩である．2014年発表された癌ゲノムアトラス（TCGA）ネットワークによる胃癌分子型分類では，EBウイルス関連胃癌，マイクロサテライト不安定性胃癌（MSI-H），ゲノム安定性胃癌（びまん型），染色体不安定性胃癌（腸型）の4型が挙げられている．胃癌における個別化医療をさらに推進するためには，びまん型，腸型を新たな観点でさらに再分類するとともに，サブタイプごとに，進展に伴う癌細胞の多様性の獲得機構について解明し，胃癌病理学を再構築する必要がある．本研究では，癌進展に伴う遺伝子変異蓄積過程を明確にすると同時に，サブタイプに特徴的な間質間葉系細胞の存在を探る．さらに，両者の相互作用を検証することでサブタイプごとに多様性を解き明かし，胃癌個別化医療を支える病理学の構築を目指している．
H27年度には，1)RHOA変異胃癌における遺伝子異常を腫瘍内で検討した．RHOA遺伝子をはさむSNPを利用してアレルコピー数の検討を行ったところ，進展部位に非依存的に，粘膜固有層内においてアレル不均衡が生じていた．2)また，びまん性胃癌において炎症関連分子Xの発現を検討したところ，独立した予後不良因子となることを見出した．現在，炎症関連分子Xの胃癌細胞での機能について解析を行っている．3)染色体不安定胃癌（腸型）では，とくにサブタイプHER2遺伝子増幅胃癌において組織の不均一性を検討した．4)EBウイルス関連胃癌では，細胞株SNU719において，癌幹細胞がCD44v6陽性細胞群に含まれていることを見出した．
今後も引き続き，サブグループごとに，進行に伴う多様性の検証，間質細胞の胃癌多様性への寄与，上皮幹細胞，癌幹細胞動態の面で解析を進めていく．
連携研究者は牛久哲男准教授，牛久綾特任講師，国田朱子助教，阿部浩幸助教である．
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
A．進行に伴う多様性の検証：
1)RHOA変異胃癌における遺伝子異常について，RHOA遺伝子をはさむSNPを利用してアレルコピー数の検討を行った．変異とは独立して，粘膜固有層内においてアレル不均衡が生じていた．2)また，びまん性胃癌において炎症関連分子Xの発現を検討したところ，独立した予後不良因子となることを見出した．炎症関連分子Xの癌細胞での機能について解析を行っている．3)染色体不安定胃癌（腸型）では，とくにサブタイプHER2遺伝子増幅胃癌において組織の不均一性を検討し，増幅，非増幅クローンが存在するが，内腔側からのアクセス可能な分布をしていることを確認した．
B．間質細胞の胃癌多様性への寄与：
胃癌細胞から放出されるエクソソームによる微小環境制御を検討するため，とくにウイルス由来の産物を追跡できるEBウイルス関連胃癌をモデルとして，エクソソーム単離，分析など基礎的検討を進めた．今後，単離エクソソームを用い，骨髄由来間葉系幹細胞への影響，あるいは単球から樹状細胞への分化誘導への影響を検討する予定である．
C．上皮幹細胞，癌幹細胞動態：
ベクトン・ディッキンソン社製BD LSRFortessa X-20 フローサイトメーターを教室に導入し，解析を進めている．とくに，EBウイルス関連胃癌細胞株SNU719において，CD44v6陽性細胞群に癌幹細胞が含まれていることを見出した．正常胃幹細胞との関連性について検討を進めている．
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| 今後の研究の推進方策 |
Ａ．進行に伴う多様性の検証：びまん型胃癌では，症関連分子Xの癌細胞での機能について解析を進める．RHOA胃癌と同様，個々の癌の進展による遺伝子異常蓄積過程をサブタイプごとに，粘膜内，粘膜下層，筋層以深で系統的に追跡する．
胃癌周囲粘膜についても解析を進めており， EBウイルス関連胃癌，MSI-H胃癌で高頻度に報告されたARID1A，PIK3CA変異に着目し，周囲粘膜で遺伝子変異のtarget sequencingを行った．引き続きデータ解析を進める．
Ｂ．間質細胞の胃癌多様性への寄与：癌間質へ新たに動員される骨髄由来間葉系幹細胞が，間質の特徴を最も反映していると推定される．現在，細胞間情報を担う小胞として最近注目されているエクソソームに着目し，胃癌細胞由来エクソソームを添加した後の発現プロファイルの変化を検討する．候補遺伝子産物について，免疫組織化学およびISHにより，各サブタイプの組織切片で癌間質細胞での特徴的発現を検討する．また，癌間質細胞CAF，固有層間質細胞に発現する特徴的分子の発現について，粘膜固有間質の性状を規定する固有層間質細胞との比較検討を進める．
Ｃ．上皮幹細胞，癌幹細胞動態と上皮・間質相互作用：EBウイルス関連胃癌を対象に，上皮幹細胞と癌幹細胞との関連について解析を進める．また，マウス新生仔胃粘膜上皮三次元培養，ヒトの胃上皮細胞，ヒト粘膜固有層間質細胞の三次元初代培養系の確立について基礎的検討を進める．
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