| 研究課題/領域番号 |
26253036
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| 研究機関 | 岡山大学 |
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研究代表者 |
松浦 栄次 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 教授 (20181688)
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| 研究分担者 |
保田 晋助 北海道大学, 医学研究科, 准教授 (00374231)
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| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| キーワード | β2-グリコプロテインI (β2GPI) / 変異β2GPI-DV / 質量顕微鏡 / 血管新生 / 酸化資質 / 酸化リポタンパク質 / LC-MSMS / PETイメージング |
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| 研究実績の概要 |
β2GPIの欠失タンパク質であるドメインI（DI）を大量調製した。また、intact DVと3種類のプラスミン抵抗性DV変異体を発現し、アフィニティーカラムにて精製した。DV変異体の内皮細胞への標的性、侵襲性、in vitroでの内皮細胞の増殖等への影響を、β2GPI、nicked β2GPI（プラスミン限定分解物）と比較のもとで評価した。また、ヒト血管内皮細胞による管腔形成におよぼす効果を評価した。VEGF依存的なHUVEC増殖実験において、すべてのDV変異体とDIは対照群と比べて18-30%の抑制が認められたが、管腔形成抑制についてはDIとnicked β2GPI のみで有意であった。β2GPIが捕捉する病態生理学的な酸化脂質のLC/MS/MSによるプロファイルを作成するためのモデル実験として、カルジオリピン含有リポソームをβ2GPI 結合Sepharose 4BカラムおよびHPLCにより分離し、MS/MSによる定性・定量を行った。一方、β2GPIの捕捉する病態生理学的な酸化脂質のプロファイル・リピドーム解析の技術基盤を確立した。更に、Cu2+酸化LDLに含まれる脂質の病理組織における分布をイメージング質量顕微鏡により解析した。血管病変に対するβ2GPIの機能ドメインを用いるイメージング法を確立するために、DI およびDV変異体にキレート化合物を介して89Zrを標識し、担がんマウス、動脈硬化モデル動物における体内動態をPETにて解析した。また、病理組織学的解析により当該指向性プローブの局在と病態の重症度を比較し、小・中動物における分子イメージングを実現する上での基礎的知見を得た。今後、本研究によって得られた知見と基盤技術により、VEGF受容体に対する指向性β2GPI-DIを坦持するsiRNA保持DDSキャリアをモデル動物に静脈投与し、治療法を探る新規事業を計画する。
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| 現在までの達成度 (段落) |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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| 今後の研究の推進方策 |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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