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2014 年度 実績報告書

微小液滴の界面選択的高感度蛍光プローブ装置の開発と生体分子への応用

研究課題

研究課題/領域番号 26288010
研究機関九州大学

研究代表者

関谷 博  九州大学, 理学(系)研究科(研究院), 教授 (90154658)

研究分担者 迫田 憲治  九州大学, 理学(系)研究科(研究院), 助教 (80346767)
研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2017-03-31
キーワード微小液滴 / 蛍光プローブ / 界面レーザー分光
研究実績の概要

細胞中における重要な生化学過程の多くは,膜構造が形成する界面近傍で生じている.界面に存在する生体分子の水和構造には著しい非対称性が存在することが考えられる.本課題では,バルクとは著しく異なる,界面における非対称な水和環境が生体分子の構造や機能,化学反応性にどのような影響を及ぼすかに注目して研究を進めている.特に,単一微小液滴界面に誘起されるWhispering Gallery Mode (WGM)を利用して,界面選択的高感度蛍光プローブ装置の開発し,これを生体分子に適用することで,界面近傍におけるタンパク質の構造転移や拡散・輸送ダイナミクスを分子レベルで調査することを目指している.
今年度は,単一微小液滴を空間捕捉するためのイオントラップ装置を開発し,これを自作のレーザー顕微分光装置に組み込んだ.
①本課題では,空間捕捉された単一微小液滴の温度制御が鍵となるが,温度を精密かつ迅速に制御するためには,装置を出来るだけ小型化することが重要であることが分かったので,予備的な実験で製作していたイオントラップ装置のダウンサイズ化を行った.また,トラップ電極を取り囲む温度制御チャンバーの形状と温度制御システムとのマッチングを最適化することで,温度制御速度と温度安定性の著しい向上を達成した.
②レーザー顕微鏡は多くのメーカーから市販されているが,今回製作したイオントラップ装置を組み込めるようなものは市場に存在しないので,レーザー顕微鏡部分を自作した.レーザー顕微鏡にイオントラップ装置を組み込むことで,空間捕捉された単一微小液滴の顕微画像をリアルタイムで観測することに成功した.
③色素分子をドープした単一微小液滴にレーザー顕微分光を適用することで,微小液滴からの蛍光およびラマン散乱光がWhispering Gallery Modeを形成することを確認した.

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

平成26年度の研究計画は,イオントラップ装置の改良と単一微小液滴を観測するための光学系を構築することであった.前者に関しては,装置のダウンサイズに成功し,単一微小液滴が3週間以上にわたって安定に捕捉されることを確認した.また,後者に関しても,単一微小液滴を観測するためのレーザー顕微分光システムを構築し,これを用いたWhispering Gallery Modeの観測に成功している.以上のことから,当初計画通りに研究が進行しているといえる.

今後の研究の推進方策

今後は,微小液滴の界面で全反射を繰り返した光の位相が揃うことによって生じる共鳴現象であるWhispering Gallery Mode (WGM) の特性を生かして,界面選択的な高感度蛍光プローブ法についての研究を行う.ナノ秒パルスレーザ-励起のエキシマー蛍光スペクトルや二光子励起蛍光スペクトルの観測を行い,液滴表面の分子を高感度で検出できるようにする.また,この手法を用いて,微小液滴近傍で進行する生体分子の構造転移や拡散・輸送ダイナミクスの解明に取り組む予定である.

次年度使用額が生じた理由

平成26年度の残額が5247円となり、必要な物品、旅費、人件費として使用するには不足していたので、次年度に繰り越した。

次年度使用額の使用計画

液滴をつくるための溶媒を購入する費用の一部として使用する。

  • 研究成果

    (6件)

すべて 2015 2014

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (3件) (うち招待講演 2件)

  • [雑誌論文] 水和クラスターにおける励起状態多重プロトン移動2015

    • 著者名/発表者名
      関谷 博、迫田憲治
    • 雑誌名

      分光研究

      巻: 64 ページ: 1-15

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Temperature effects on prevalent structures of hydrated Fe+ complexes: Infrared spectroscopy and DFT calculations of Fe+(H2O)n (n=3-8)2014

    • 著者名/発表者名
      Kasuhiko Ohashi, J.un Sasaki, Gun Yamamoto, Ken Judai, Nobyuyuki Nishi, Hiroshi Sekiya
    • 雑誌名

      The Journal of Chemical Physics

      巻: 141 ページ: 214307(1-10)

    • DOI

      10.1063/1.4902408

    • 査読あり
  • [雑誌論文] DNAモデル塩基対の励起状態二重プロトン移動の協奏的機構と段階的機構の長い論争の始まりから終わりまで2014

    • 著者名/発表者名
      関谷 博、迫田憲治
    • 雑誌名

      Molecular Science

      巻: 8 ページ: A0071(1-13)

    • DOI

      10.3175/molsci.8.A0071

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] ポリ(N-イソプロピルアクリルアミド)の構造転移に対する 巨大分子の混み合いと塩添加の複合効果2014

    • 著者名/発表者名
      田端大樹,迫田憲治,関谷博
    • 学会等名
      第37回溶液化学シンポジウム
    • 発表場所
      アバンセ(佐賀市)
    • 年月日
      2014-11-13 – 2014-11-13
  • [学会発表] 温度応答性高分子へのアニオン吸着挙動に対する共存巨大分子の混み合い効果:ランダムコイル-グルビュール転移への影響2014

    • 著者名/発表者名
      迫田憲治,田端大樹,関谷博
    • 学会等名
      第8回分子科学討論会
    • 発表場所
      広島大学
    • 年月日
      2014-09-21 – 2014-09-21
    • 招待講演
  • [学会発表] Excited-state multiple-proton transfer in hydrated 7-azaindole clusters in the gas phase2014

    • 著者名/発表者名
      Hiroshi Sekiya, Kenji Sakota, Gustavo Pino, Claude Dedonder, Christophe Jouvet
    • 学会等名
      248th ACS National Meeting
    • 発表場所
      San Francisco Convention Center
    • 年月日
      2014-08-10 – 2014-08-14
    • 招待講演

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公開日: 2016-06-01  

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