犬の難治性がんにおけるがん幹細胞の特性解析とがん幹細胞標的治療法の基盤構築

2016 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 26292161
• 研究機関: 日本獣医生命科学大学
• 研究代表者: 道下 正貴 日本獣医生命科学大学, 獣医学部, 准教授 (50434147)
• 研究分担者: 落合 和彦 日本獣医生命科学大学, 獣医学部, 准教授 (30550488) ; 盆子原 誠 日本獣医生命科学大学, 獣医学部, 教授 (50343611) ; 石渡 俊行 地方独立行政法人東京都健康長寿医療センター(東京都健康長寿医療センター研究所), 東京都健康長寿医療センター研究所, 研究部長 (90203041)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: がん / がん幹細胞 / 犬 / 炎症性乳癌 / 横紋筋肉腫

研究実績の概要

がん撲滅に向けて、抗がん剤や放射線に低感受性を示す、がん幹細胞を標的とした新規治療法の開発が世界的に取り組まれている。本課題研究は、極めて病態進行が早く、効果的な治療法がない犬の難治性がん（炎症性乳癌、メラノーマ、横紋筋肉腫など）を対象とし、獣医医療における難治性がんのがん幹細胞標的治療法の基盤を構築することを目的とし、がん幹細胞の特性解析を行った。
犬の炎症性乳癌およびメラノーマのがん幹細胞の特性解析は、主に平成26および27年度に実施し、平成28年度以降は、主に横紋筋肉腫の肉腫幹細胞を対象に行った。犬横紋筋肉腫細胞株2株を対象に、成長因子存在下低接着培養による３次元spehre assayを実施し、自己複製能を有する細胞集団（sphere；肉腫幹細胞）を同定した。sphereおよび２次元培養に接着細胞（対照細胞集団）について未分化関連遺伝子（oct-4、 nanog、sox-2、CD133）のRT-PCR解析、免疫不全マウスの皮下移植による腫瘍形成能、抗がん剤（ビンクリスチン、ミトキサントロン、ドキソルビシン）の感受性等の特性を行い、sphere形成細胞において横紋筋肉腫幹細胞が濃縮されていることが明らかとなった。さらにこれまでのin vitroスクリーニングにより得られた分子標的阻害剤を用いて横紋筋肉腫幹細胞の自己複製能を評価した結果、炎症性乳癌と同様に、横紋筋肉腫においてもがん幹細胞の自己複製能を阻害することを明らかにした。

現在までの達成度 (段落)

28年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

28年度が最終年度であるため、記入しない。

次年度使用額が生じた理由

28年度が最終年度であるため、記入しない。

次年度使用額の使用計画

28年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Identification of tumor-initiating cells derived from two canine rhabdomyosarcoma cell lines (2017)
  • 著者名/発表者名: Kishimoto TE, Yashima S, Nakahira R, Onozawa E, Azakami D, Ujike M, Ochiai K, Ishiwata T, Takahashi K, Michishita M.
  • 雑誌名: Journal of Veterianry Medical Science 巻: 79 ページ: 1155～1162
  • DOI: 10.1292/jvms.16-0412
  • 査読あり
• [雑誌論文] MicroRNA expression profiling in canine prostate cancer (2017)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi M, Saito A, Tanaka Y, Michishita M, Kobayashi M, Irimajiri M, Kaneda T, Ochiai K, Bonkobara M, Takahashi K, Hori T, Kawakami E
  • 雑誌名: Journal of Veterianry Medical Science 巻: 79 ページ: 719～725
  • DOI: 10.1177/1040638717698179
  • 査読あり
• [雑誌論文] Disseminated histiocytic sarcoma with hemophagocytosis in a rabbit (2017)
  • 著者名/発表者名: Ishimori M, Michishita M, Yoshimura H, Azakami D, Ochiai K, Ishiwata T, Takahashi K
  • 雑誌名: Journal of Veterianry Medical Science 巻: 79 ページ: 1503～1506
  • DOI: 10.1292/jvms.17-0297
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cutaneous Angiolymphoid Hyperplasia in a Dog (2017)
  • 著者名/発表者名: Michishita M, Katori Y, Sasaki H, Obara RD, Furumoto R, Kato M, Nakahira R, Yoshimura H, Soeta S, Ishiwata T, Takahashi K
  • 雑誌名: Journal of Comparative Pathology 巻: 157 ページ: 57～60
  • DOI: 10.1016/j.jcpa.2017.05.004
  • 査読あり
• [雑誌論文] Lingual Chondrolipoma in a Dog. (2017)
  • 著者名/発表者名: Furumoto R, Michishita M, Arai K, Soeta S, Takahashi K
  • 雑誌名: Journal of Comparative Pathology 巻: 157 ページ: 11～14
  • DOI: 10.1016/j.jcpa.2017.04.001
  • 査読あり
• [雑誌論文] Canine REIC/Dkk-3 interacts with SGTA and restores androgen receptor signalling in androgen-independent prostate cancer cell lines. (2017)
  • 著者名/発表者名: Kato Y, Ochiai K, Kawakami S, Nakao N, Azakami D, Bonkobara M, Michishita M, Morimatsu M, Watanabe M, Omi T
  • 雑誌名: BMC Veterinary Research 巻: 13 ページ: 170
  • DOI: 10.1186/s12917-017-1094-4
  • 査読あり
• [雑誌論文] Pancreatic neuroendocrine carcinoma with exocrine differentiation in a young cat (2017)
  • 著者名/発表者名: Michishita Masaki、Takagi Mariko、Kishimoto Takuya E.、Nakahira Rei、Nogami Takeshi、Yoshimura Hisashi、Hatakeyama Hitoshi、Azakami Daigo、Ochiai Kazuhiko、Takahashi Kimimasa
  • 雑誌名: Journal of Veterinary Diagnostic Investigation 巻: 29 ページ: 325～330
  • DOI: 10.1177/1040638717698179
  • 査読あり
• [雑誌論文] Malignant Oestrogen-producing Teratoma in a Cat (2017)
  • 著者名/発表者名: Machida Y.、Michishita M.、Wada M.、Hori T.、Kawakami E.、Yoshimura H.、Ohkusu-Tsukada K.、Taya K.、Takahashi K.
  • 雑誌名: Journal of Comparative Pathology 巻: 156 ページ: 178～182
  • DOI: 10.1016/j.jcpa.2016.11.273
  • 査読あり
• [雑誌論文] Pancreatic Colloid Carcinoma in an Elderly Cat (2017)
  • 著者名/発表者名: Hagiwara K.、Michishita M.、Yoshimura H.、Ochiai K.、Azakami D.、Ishiwata T.、Takahashi K.
  • 雑誌名: Journal of Comparative Pathology 巻: 157 ページ: 266～269
  • DOI: 10.1016/j.jcpa.2017.08.006
  • 査読あり
• [雑誌論文] Functional alteration of canine isocitrate dehydrogenase 2 (IDH2) via an R174K mutation (2017)
  • 著者名/発表者名: Kawakami S, Ochiai K, Kato Y, Michishita M, Hirama H, Obara R, Azakami D, Watanabe M, Omi T
  • 雑誌名: Journal of Veterianry Medical Science 巻: 80 ページ: 85～91
  • DOI: 10.1292/jvms.17-0362
  • 査読あり
• [雑誌論文] A cat with suspected laryngeal metastasis with mucosal irregularity resulting from apocrine/salivary gland adenocarcinoma in the head (2017)
  • 著者名/発表者名: Fujiwara-Igarashi A, Shimizu K, Michishita M, Yu Y, Hamamoto Y, Hasegawa D, Fujita M
  • 雑誌名: Journal of Veterianry Medical Science 巻: 79 ページ: 1916～1919
  • DOI: 10.1292/jvms.17-0242
  • 査読あり
• [雑誌論文] Oncocytic carcinoma of the salivary gland in a dog (2016)
  • 著者名/発表者名: Nakahira Rei、Michishita Masaki、Kato Misaki、Okuno Yuki、Hatakeyama Hitoshi、Yoshimura Hisashi、Azakami Daigo、Ochiai Kazuhiko、Bonkobara Makoto、Takahashi Kimimasa
  • 雑誌名: Journal of Veterinary Diagnostic Investigation 巻: 29 ページ: 105～108
  • DOI: 10.1177/1040638716673126
  • 査読あり
• [学会発表] 犬の乳癌幹細胞の特性解析 (2017)
  • 著者名/発表者名: 道下正貴
  • 学会等名: 第5回日本比較病理学研究会
• [学会発表] 犬悪性黒色腫株化細胞におけるがん幹細胞の同定および特性解析 (2017)
  • 著者名/発表者名: 道下正貴、宮澤有果、香取優希、中平嶺、佐伯亘平、中川貴之、高橋公正
  • 学会等名: 第4回日本獣医病理学専門家協会（JCVP）学術集会
• [学会発表] 犬の皮膚結節 (2017)
  • 著者名/発表者名: 道下正貴
  • 学会等名: 第4回日本獣医病理学専門家協会（JCVP）学術集会
• [学会発表] イヌIDH1ホモログのクローニングと機能解析 (2017)
  • 著者名/発表者名: 川上翔太、落合和彦、道下正貴、近江俊徳
  • 学会等名: 日本獣医臨床病理学会2017年大会
• [学会発表] 腫瘍随伴性皮膚炎が疑われた膵臓癌の猫の1例 (2017)
  • 著者名/発表者名: 南 智彦、小宮 拓巳、元風呂 晃、高橋 一真、鳥居 佳子、浦野 貴美代、道下 正貴、吉村 久志、山本 昌美、百田 豊、呰上 大吾1
  • 学会等名: 第17回日本獣医がん学会
• [学会発表] Metabolites profiling in spheres derived from canine mammary carcinoma using gas chromatography mass spectrometry (2017)
  • 著者名/発表者名: Masaki Michishita, Namika Saito, Satoshi Nozawa, Rina Furumoto, Takayuki Nakagawa, Touko Sato, Kinya Katayama, Hiroyuki Tazaki, Toshiyuki Ishiwata, Kimimasa Takahashi
  • 学会等名: 第76回日本癌学会学術総会
• [学会発表] 犬乳癌幹細胞の脂肪酸代謝プロファイル解析 (2017)
  • 著者名/発表者名: 古本 莉奈、道下 正貴、齋藤 那美香、野澤 聡司、中川 貴之、佐藤 稲子、片山 欣哉、田崎 弘之、石渡 俊行、髙橋 公正
  • 学会等名: 第160回日本獣医学会学術集会
• [学会発表] 犬のグリオーマおよび軟骨肉腫におけるIDH1 hotspot遺伝子変異の探索 (2017)
  • 著者名/発表者名: 尾原涼、道下正貴、川上翔太、岸本拓也、落合和彦、チェンバーズ ジェームズ、内田和幸、高橋公正
  • 学会等名: 第160回日本獣医学会学術集会
• [学会発表] 猫の乳腺腫瘍におけるPKM2発現と病理組織学的特徴との関連性 (2017)
  • 著者名/発表者名: 加藤 美咲、道下 正貴、野上 瑛、佐伯 亘平、中川 貴之、高橋 公正
  • 学会等名: 第160回日本獣医学会学術集会
• [学会発表] 犬の萎縮精巣および潜在精巣におけるセルトリ細胞の未成熟マーカー発現の比較 (2017)
  • 著者名/発表者名: 佐々木 悠、吉村久志、道下正貴、塚田晃三、石渡俊行、高橋公正
  • 学会等名: 第160回日本獣医学会学術集会
• [学会発表] 動物病理診断：症例呈示とHuman Pathologistへのコンサルテーション (2017)
  • 著者名/発表者名: 道下正貴
  • 学会等名: 第16回日本デジタルパソロジー研究会総会
• [備考] 日本獣医生命科学大学獣医病理学教室
  • URL: https://ja-jp.facebook.com/nvluvetpathol/