研究課題/領域番号 |
26292166
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研究機関 | 明治大学 |
研究代表者 |
加藤 幸雄 明治大学, 農学部, 教授 (30114177)
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研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2018-03-31
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キーワード | 遺伝子 / 発現制御 / 内分泌学 / 生殖 / 細胞・組織 / 血管形成 / 分化 / 幹細胞 |
研究実績の概要 |
表記課題を達成するための平成27年度の期間で、下記のような実験を進めた。 転写因子PROP1は下垂体組織に特異的であり、この組織の発生と成熟のキーとなる因子である。この因子の陽性細胞には、幹細胞を特徴づけるSOX2が常に共存する。そして、胎仔期下垂体の細胞は一度はPROP1の影響を受けており、この因子の発現制御機序の解明は重要である。 1.このPROP1遺伝子の制御因子の候補42種を調べ、20種類の因子が制御に関わる事を明らかにし、論文を発表した。 2.PROP1遺伝子のエピジェネティクス制御を調べるために、ラットPROP1遺伝子のメチル化解析を行っ た。その結果、非発現組織と比べて下垂体におけるメチルの差異が見つかった。転写開始点遠位、近位、第1イントロンにその差異が見つかったが、その差は胎仔期の初期であり、その後期や出生後には大きな差異は認められなかった。現在、 論文を投稿準備中である。 3.下垂体のホルモン産生細胞の供給機構を明らかにするため、各種の幹・前駆細胞の単離を行った。2種のプロテアーゼを段階的に作用させてた分散液から塊状の細胞集団を採取して幹細胞マーカーを含む因子の抗体で染色したところ、いずれもSOX2陽性であった。また多くはPROP1にも陽性であり、幹・前駆細胞塊を単離できた。この細胞塊の培養条件や分化能をまとめ論文を投稿中である。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
1.PROP1遺伝子の発現を制御する転写因子候補の同定ができた。 2.PROP1遺伝子のエピジェネティックな制御の有無を調べ、DNAメチル化ガ胎仔期で起っている事が判り、PROPI遺伝子の制御機構の解明が進展した。 3.幹・前駆細胞塊の単離に成巧し、ホルモン細胞供給機構の解明に向けて大きく前進した。 4.上記の細胞塊で発現している遺伝子の網羅的解析RNAseqの準備ができた。 以上、研究は順調に展開していると判断した。
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今後の研究の推進方策 |
1.下垂体幹・前駆細胞の分子誘導実験を展開する。 2.下垂体幹・前駆細胞塊で発現している特徴ある遺伝子を絞り込んで,それらの機能を解明する。 3.PROP1・PRX1・PRX2の標的遺伝子を特定する。 4.PROP1やS100βなど幹細胞で機能する因子を指標とした細胞系譜解析 (lineage tracing)のために進めているトランスジェニックラットの作製を完成させて,解析を開始する。
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次年度使用額が生じた理由 |
前年度に計画した発現遺伝子解析計画が、他の解析支援事業によりサポートされたために生じた次年度への繰越額の消化ができなかった。また、本年度では、計画している組換え体動物の作製による解析実験では、系統作製を繰り返しているが出産数が期待ほどでなく十分に進んでいないために、次年度使用額が生じた。
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次年度使用額の使用計画 |
次年度では、他の解析支援事業によりサポートにより得られるデータに基づく研究展開と、組換え体動物の作製後の実験の推進して予算を使用したい。
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