顕微鏡的多発血管炎の克服に向けた基礎・臨床包括的アプローチ

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 26293082
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 石津 明洋 北海道大学, 保健科学研究院, 教授 (60321957)
• 研究分担者: 外丸 詩野 北海道大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (20360901)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: 病理学

研究実績の概要

In vitroでヒト好中球に誘導される細胞外トラップ（NETs）形成は、peptigylarginine deiminase 4(PAD4)阻害剤であるCl-amidineにより有意に抑制された。BALB/c、NZW、B6/J、B6/N、DBAの5系統のマウスにpropylthiouracil (PTU)とphorbol myristate acetate (PMA)を投与したところ、どの系統のマウスにも明らかな血管炎は誘導されなかったが、BALB/cとNZWにおいて他系統よりも高値のMPO-ANCA産生が誘導された。そこで、BALB/cマウスにPTUとPMAを投与するモデルにおいて、Cl-amidineまたは対照としてPBSを14日間投与したところ、Cl-amidine投与群において腹膜や肺毛細血管における好中球細胞外トラップ（NETs）の形成が抑制され、血中MPO-ANCA 値も有意に低値であった。以上のことから、マウスにおけるMPO-ANCA産生誘導モデルにおいて、PAD4阻害剤のNETs形成抑制効果とMPO-ANCA産生抑制効果が確認できた。

顕微鏡的多発血管炎（MPA）患者の治療前後の末梢血から良好なRNAを抽出できた28症例について、16個の遺伝子の発現変化を解析し、治療反応性を予測した。治療反応性良好と予測した症例が23例、不良と予測した症例が5例であった。今後、各症例の実際のアウトカムに照し、本法による治療反応性の予測精度を検証する。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

本研究では、MPAの治療予後改善を目的として、基礎研究ならびに臨床研究を包括的に実施している。基礎研究においては、MPO-ANCA産生誘発モデルを開発し、それに対するPAD4阻害剤のNETs形成抑制効果ならびにMPO-ANCA産生抑制効果を確認できた。また、臨床研究においては、MPA患者の治療反応性を予測し、今後の検証に供するデータを取得できた。以上のことから、本研究計画はおおむね順調に進展していると判断できる。

今後の研究の推進方策

基礎研究においては、MPO-ANCAの産生を伴ってMPA様の半月体形成性糸球体腎炎を自然発症するSCG/Kjマウスを用いて、PAD4阻害剤（Cl-amidine）の発症抑制効果、治療効果を検討する。臨床研究においては、本研究で予測したMPA患者の治療反応性を実際のアウトカムに照らし、本法による治療反応性の予測精度を検証する。

次年度使用額が生じた理由

平成26年度に購入を予定していた実験動物の供給元における繁殖状況が整わず、年度内に購入することができなかった。それに伴い遂行する予定であった実験に必要な試薬やプラスチック器具等の消耗品を今年度は購入しなかった。また、今年度に実施した実験についても現存消耗品を活用したことにより、結果として支出が抑えられた。

次年度使用額の使用計画

平成26年度に購入予定であった実験動物を、次年度に購入する。それに伴い遂行する実験に必要な試薬やプラスチック器具等の消耗品を適時購入する。

研究成果

• [雑誌論文] Establishment of vascular endothelial cell-reactive type II NKT cell clone from rat model of autoimmune vasculitis. (2015)
  • 著者名/発表者名: Iinuma C, Waki M, Kawakami A, Yamaguchi M, Tomaru U, Sasaki N, Masuda S, Matsui Y, Iwasaki S, Baba T, Kasahara M, Yoshiki T, Paletta D, Herrmann T, Ishizu A.
  • 雑誌名: Int Immunol 巻: 27 ページ: 105-114
  • DOI: 10.1093/intimm/dxu088
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Possible linkage between microscopic polyangiitis and thrombosis via neutrophil extracellular traps. (2014)
  • 著者名/発表者名: Imamoto T, Nakazawa D, Shida H, Suzuki A, Otsuka N, Tomaru U, Ishizu A
  • 雑誌名: Clin Exp Rheumatology 巻: 32 ページ: 149-150
  • 査読あり
• [雑誌論文] Enhanced formation and disordered regulation of NETs in MPO-ANCA-associated microscopic polyangiitis. (2014)
  • 著者名/発表者名: Nakazawa D, Shida H, Tomaru U, Yoshida M, Nishio S, Atsumi T, Ishizu A.
  • 雑誌名: J Am Soc Nephrol 巻: 25 ページ: 990-997
  • DOI: 10.1681/ASN.2013060606
  • 査読あり
• [雑誌論文] Overexpression of TNF-α converting enzyme promotes adipose tissue inflammation and fibrosis induced by high fat diet. (2014)
  • 著者名/発表者名: Matsui Y, Tomaru U, Miyoshi A, Ito T, Fukaya S, Miyoshi H, Atsumi T, Ishizu A
  • 雑誌名: Exp Mol Pathol 巻: 97 ページ: 354-358
  • DOI: 10.1016/j.yexmp.2014.09.017
  • 査読あり
• [雑誌論文] 血管炎の発症機序とNETs (2014)
  • 著者名/発表者名: 中沢大悟，西尾妙織，外丸詩野，渥美達也，石津明洋．
  • 雑誌名: 日本腎臓学会誌 巻: 56 ページ: 117-123
• [雑誌論文] 抗好中球細胞質抗体（ANCA）関連血管炎の病態と治療の最前線 (2014)
  • 著者名/発表者名: 山村昌弘，佐田憲映，針谷正祥，藤井隆夫，石津明洋，有村義宏，槇野博史
  • 雑誌名: 日本内科学会雑誌 巻: 103 ページ: 2012-2129
• [雑誌論文] 好中球細胞外トラップの異常とMPO-ANCA関連血管炎 (2014)
  • 著者名/発表者名: 石津明洋
  • 雑誌名: 日本小児腎臓病学会雑誌 巻: 27 ページ: 81-85
• [学会発表] 血管炎症候群の分類と臨床病理 (2014)
  • 著者名/発表者名: 石津明洋
  • 学会等名: 第24回日本リウマチ学会北海道・東北支部学術集会ランチョンセミナー
  • 発表場所: 北海道大学医学部学友会館フラテ（札幌市）
  • 年月日: 2014-11-22 – 2014-11-23
  • 招待講演
• [学会発表] 好中球細胞外トラップの異常とMPO-ANCA関連血管炎 (2014)
  • 著者名/発表者名: 石津明洋
  • 学会等名: 第49回日本小児腎臓病学会学術集会教育講演
  • 発表場所: 秋田ビューホテル（秋田市）
  • 年月日: 2014-06-05 – 2014-06-07
  • 招待講演
• [学会発表] ANCAによる血管傷害機序 (2014)
  • 著者名/発表者名: 石津明洋
  • 学会等名: 第58回日本リウマチ学会総会・学術集会シンポジウム「ANCA関連血管炎のアップデート」
  • 発表場所: グランドプリンスホテル新高輪（東京都）
  • 年月日: 2014-04-24 – 2014-04-26
  • 招待講演
• [備考] 北海道大学学術成果コレクション(HUSCAP)
  • URL: http://eprints.lib.hokudai.ac.jp/dspace/handle/2115/54864
• [備考] 北海道大学学術成果コレクション(HUSCAP)
  • URL: http://eprints.lib.hokudai.ac.jp/dspace/handle/2115/54674
• [備考] 北海道大学学術成果コレクション(HUSCAP)
  • URL: http://eprints.lib.hokudai.ac.jp/dspace/handle/2115/57002