顕微鏡的多発血管炎の克服に向けた基礎・臨床包括的アプローチ

2016 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 26293082
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 石津 明洋 北海道大学, 保健学研究科, 教授 (60321957)
• 研究分担者: 外丸 詩野 北海道大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (20360901)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: MPO-ANCA / MPO-ANCA関連血管炎 / 好中球細胞外トラップ / 動物モデル / 治療反応性予測

研究実績の概要

【目的】(基礎）MPO-ANCA関連血管炎(MPO-AAV)では、MPO-ANCAに病原性がある。MPO-ANCAの産生には、好中球細胞外トラップ(NETs)の過剰が関わっている。NETs形成の経路において中心的な役割を果たしているpeptigylarginine deiminase 4 (PAD4)の作用を阻害することによりMPO-ANCAの産生を抑制できることを示す。（臨床）MPO-AAV患者の治療反応性を治療開始後の早期に予測する方法を開発する。
【方法】（基礎）健常者の好中球にphorbol myristate acetate (PMA)またはPMAと抗甲状腺薬プロピルチオウラシル(PTU)を添加して誘導するNETsに対するPAD阻害薬Cl-amidineの効果を検討した。次に、BALB/cマウスにPTUを経口投与し、PMAを腹腔内投与することによるMPO-ANCA産生モデルを作成した。このマウスにCl-amidineを連日腹腔内投与し、PBSを連日腹腔内投与した対照群と比較した。2週間後に解剖し、血液および組織学的所見を比較した。（臨床）MPO-AAV患者の治療前および治療開始後1週間の時点の末梢血を採取し、独自に開発した方法でその後の治療反応性を予測した。実際の治療反応性と比較し、予測の精度を検討した。
【結果】（基礎）In vitroおよびin vivoで誘導されるNETs形成は、Cl-amidineにより有意に抑制された。Cl-amidine投与マウスでは、血中MPO-ANCA 値がPBS投与群に比べて有意に低値であった。（臨床）MPO-AAV患者の治療反応性不良例を、感度85.7%、特異度96.9%で予測できた。
【結論】（基礎）PAD4阻害薬はNETsの形成阻害を介してMPO-ANCA産生を抑制する。（臨床）MPO-AAV患者の治療反応性を精度高く予測できる。

現在までの達成度 (段落)

28年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

28年度が最終年度であるため、記入しない。

次年度使用額が生じた理由

28年度が最終年度であるため、記入しない。

次年度使用額の使用計画

28年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Peptidylarginine deiminase inhibitor suppresses neutrophil extracellular trap formation and MPO-ANCA production. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kusunoki Y, Nakazawa D, Shida H, Hattanda F, Miyoshi A, Masuda S, Nishio S, Tomaru U, Atsumi T, Ishizu A.
  • 雑誌名: Frontiers in Immunology 巻: 7 ページ: 227
  • DOI: 10.3389/fimmu.2016.00227
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] The presence of anti-lactoferrin antibodies in a subgroup of eosinophilic granulomatosis with polyangiitis patients and their possible contribution to enhancement of neutrophil extracellular trap formation. (2016)
  • 著者名/発表者名: Shida H, Nakazawa D, Tateyama Y, Miyoshi A, Kusunoki Y, Hattanda F, Masuda S, Tomaru U, Kawakami T, Atsumi T, Ishizu A
  • 雑誌名: Frontiers in Immunology 巻: 7 ページ: 636
  • DOI: 10.3389/fimmu.2016.00636
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [学会発表] The effect of peptidylarginine deiminase inhibitor on NET formation and MPO-ANCA production in mouse model (2017)
  • 著者名/発表者名: Kusunoki Y, Nakazawa D, Shida H, Hattanda F, Miyoshi A, Masuda S, Nishio S, Tomaru U, Atsumi T, Ishizu A
  • 学会等名: The 18th International Vasculitis and ANCA Workshop
  • 発表場所: 東京大学伊藤国際学術研究センター（東京都文京区）
  • 年月日: 2017-03-25 – 2017-03-28
  • 国際学会
• [学会発表] 皮膚科領域でみる血管炎の病理組織像からのアプローチ (2016)
  • 著者名/発表者名: 石津明洋
  • 学会等名: 第46回日本皮膚アレルギー・接触皮膚炎学会総会学術大会
  • 発表場所: 京王プラザホテル（東京都新宿区）
  • 年月日: 2016-11-05 – 2016-11-06
  • 招待講演
• [学会発表] 血管炎新分類（CHCC2012）と皮膚血管炎の位置づけ―病理医の視線で (2016)
  • 著者名/発表者名: 石津明洋
  • 学会等名: 第115回日本皮膚科学会総会
  • 発表場所: 国立京都国際会館（京都府京都市）
  • 年月日: 2016-06-04 – 2016-06-06
  • 招待講演
• [学会発表] ANCA関連血管炎の臨床病理学的特徴と好中球細胞外トラップNETs (2016)
  • 著者名/発表者名: 石津明洋
  • 学会等名: 第105回日本病理学会総会
  • 発表場所: 仙台国際センター（宮城県仙台市）
  • 年月日: 2016-05-12 – 2016-05-14
  • 招待講演
• [学会発表] Peptidylarginine deiminase 4阻害薬は好中球細胞外トラップの形成阻害を介してMPO-ANCA産生を抑制する (2016)
  • 著者名/発表者名: 楠 由宏，中沢大悟，志田玄貴，八反田文彦，益田紗季子，外丸詩野，西尾妙織，渥美達也，石津明洋
  • 学会等名: 第60回日本リウマチ学会総会・学術集会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（神奈川県横浜市）
  • 年月日: 2016-04-21 – 2016-04-23
• [学会発表] 抗ラクトフェリン抗体は好酸球性多発血管炎性肉芽腫症において好中球細胞外トラップの形成を促進し，疾患活動性に関与する (2016)
  • 著者名/発表者名: 志田玄貴，中沢大悟，八反田文彦，楠 由宏，益田紗季子，外丸詩野，川上民裕，渥美達也，石津明洋
  • 学会等名: 第60回日本リウマチ学会総会・学術集会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（神奈川県横浜市）
  • 年月日: 2016-04-21 – 2016-04-23
• [備考] 北海道大学学術成果コレクション（HUSCAP）
  • URL: http://hdl.handle.net/2115/62351
• [備考] 北海道大学学術成果コレクション（HUSCAP）
  • URL: http://hdl.handle.net/2115/64033