難治性疾患に対するmiRNA補充療法の開発

2016 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 26293088
• 研究機関: 東京医科大学
• 研究代表者: 黒田 雅彦 東京医科大学, 医学部, 教授 (80251304)
• 研究分担者: 村上 善基 大阪市立大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (00397556) ; 須藤 カツ子 東京医科大学, 医学部, 兼任講師 (50126091)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: miRNA / miR-34 / miR-29 / IPF / Dicer / Ago / 非小細胞性肺がん

研究実績の概要

microRNA（miRNA）は20塩基長前後の小RNAで、生体の様々な生理活性を制御する。従来の手法では標的にできない分子に対してmiRNAを用いた治療が期待されている。これまで、我々は種々の疾患において、臨床応用を前提に研究を行い(1)エクソソームを用いたmiRNAのDrug delivery system(DDS)の開発、(2)標的細胞指向性の miRNAの開発を行ってきた。この研究成果を踏まえ、本研究においては、臨床応用可能で、特許性のあるmiRNA補充療法のプラットホーム開発を行い、既存の手法では完治ができない特発性肺線維症や肺がんなどの難治性疾患治療の臨床応用を目指す。
平成28年度は、以下の検討を行った。
(1)Dicer活性の低いがん細胞でも効果を発揮する補充型miRNAプラトフォームの開発：抗腫瘍効果と標的分子が明らかなmiR-34a及びmiR-29bを用いて検討し、loop sequenceの重要な配列を同定し、さらにDicer非依存的なmiR-144の配列を参考にして検討を行った。また、Ago familyを完全に欠失した細胞とDicerを欠失した細胞を作成し、新規の補充型miRNAの標的遺伝子の抑制効果も検討した。(2) 特発性肺線維症マウスモデルでの検討：補充型miR-29ｂの最適な配列を決定し、ブレオマイシン誘発マウス肺線維症モデルを用いて検討を行った。 (3) 肺がんモデルマウスでの検討：RAS変異肺がんモデルマウスを用いてmiR-34aの投与検討を行った。
以上の結果から、局所ならびに全身投与のmiRNA補充療法のプラットホームを開発する事ができた。今回我々の開発した新規のmiRNAプラットホームは、guide hairpin RNAと命名した。今後はさらに、本miRNAによる補充療法を難治性疾患治療に応用していく。

現在までの達成度 (段落)

28年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

28年度が最終年度であるため、記入しない。

次年度使用額が生じた理由

28年度が最終年度であるため、記入しない。

次年度使用額の使用計画

28年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Vascular Smooth Muscle Cell Maturation Stage and Ki-67 Index are Diagnostic Biomarkers for Pathologic Grade of Ovarian Teratoma. (2017)
  • 著者名/発表者名: Hongo-Kohama M, Kurata A, Hashimoto H, Fujita K, Horiuchi H, Nagao T, Kuroda M.
  • 雑誌名: Int J Gynecol Pathol. 巻: ahead of print ページ: ahead of print
  • DOI: doi: 10.1097/PGP.0000000000000373.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Repression of Smad3 by Stat3 and c-Ski/SnoN induces gefitinib resistance in lung adenocarcinoma. (2017)
  • 著者名/発表者名: Makino Y, Yoon JH, Bae E, Kato M, Miyazawa K, Ohira T, Ikeda N, Kuroda M, Mamura M.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 巻: 484 ページ: 269-77
  • DOI: doi: 10.1016/j.bbrc.2017.01.093.
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Novel form of miR-29b suppresses bleomycin-induced pulmonary fibrosis. (2017)
  • 著者名/発表者名: Yamada Y, Takanashi M, Sudo K, Ueda S, Ohno SI, Kuroda M.
  • 雑誌名: PLoS One. 巻: 12 ページ: -
  • DOI: doi: 10.1371/journal.pone.0171957.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Cardiac myofibroblast engulfment of dead cells facilitates recovery after myocardial infarction. (2017)
  • 著者名/発表者名: Nakaya M, Watari K, Tajima M, Nakaya T, Matsuda S, Ohara H, Nishihara H, Yamaguchi H, Hashimoto A, Nishida M, Nagasaka A, Horii Y, Ono H, Iribe G, Inoue R, Tsuda M, Inoue K, Tanaka A, Kuroda M, Nagata S, Kurose H.
  • 雑誌名: J Clin Invest. 巻: 127 ページ: 383-401
  • DOI: doi: 10.1172/JCI83822.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] MiR-29a Assists in Preventing the Activation of Human Stellate Cells and Promotes Recovery From Liver Fibrosis in Mice. (2016)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto Y, Itami S, Kuroda M, Yoshizato K, Kawada N, Murakami Y.
  • 雑誌名: Mol Ther. 巻: 24 ページ: 1848-59
  • DOI: doi: 10.1038/mt.2016.127.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Necrotizing arteritis occurring in an intralobar pulmonary sequestration of a patient without systemic vasculitis syndrome. (2016)
  • 著者名/発表者名: Hashimoto H, Hara K, Matsumoto J, Nashiro T, Nagano M, Kusakabe M, Kurata A, Kuroda M, Suzuki Y, Horiuchi H.
  • 雑誌名: Cardiovasc Pathol. 巻: 25 ページ: 200-2
  • DOI: doi: 10.1016/j.carpath.2016.01.005.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Development of Novel Small Hairpin RNAs That do not Require Processing by Dicer or AGO2. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ohno S, Itano K, Harada Y, Asada K, Oikawa K, Kashiwazako M, Okuyama H, Kumagai K, Takanashi M, Sudo K, Ikeda N, Kuroda M.
  • 雑誌名: Mol Ther. 巻: 24 ページ: 1278-89
  • DOI: doi: 10.1038/mt.2016.81.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] HLA-G expression is regulated by miR-365 in trophoblasts under hypoxic conditions. (2016)
  • 著者名/発表者名: Mori A, Nishi H, Sasaki T, Nagamitsu Y, Kawaguchi R, Okamoto A, Kuroda M, Isaka K.
  • 雑誌名: Placenta. 巻: 45 ページ: 37-41
  • DOI: doi: 10.1016/j.placenta.2016.07.004.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Cord blood-derived endothelial colony-forming cell function is disrupted in congenital diaphragmatic hernia. (2016)
  • 著者名/発表者名: Fujinaga H, Fujinaga H, Watanabe N, Kato T, Tamano M, Terao M, Takada S, Ito Y, Umezawa A, Kuroda M.
  • 雑誌名: Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 巻: 310 ページ: L1143-54
  • DOI: doi: 10.1152/ajplung.00357.2015.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Solitary Pulmonary Capillary Hemangioma of Adult Cases: Clinicopathologic Characteristics as an Unrecognized Entity. (2016)
  • 著者名/発表者名: Hashimoto H, Kurata A, Fujiwara M, Hara K, Matsumoto J, Kusakabe M, Tachibana K, Nashiro T, Terado Y, Akahane M, Usui K, Suzuki Y, Kondo H, Kamma H, Kuroda M, Horiuchi H.
  • 雑誌名: Am J Surg Pathol. 巻: 40 ページ: 1380-91380-9
  • DOI: doi: 10.1097/PAS.0000000000000708.
  • 査読あり
• [学会発表] Digital Pethologyを用いた肝細胞がんの形態学解析による再発予測の検討. (2017)
  • 著者名/発表者名: 齋藤 彰、藤田浩司、山本陽一郎、硲 彰一、坂本和彦、永野浩昭、黒田雅彦.
  • 学会等名: 第106回日本病理学会総会
  • 発表場所: 京王プラザホテル(東京)
  • 年月日: 2017-04-27 – 2017-04-29
• [学会発表] 子宮頸部上皮内腫瘍病変に対する新規モノクロナール抗体の開発. (2017)
  • 著者名/発表者名: 藤田浩司、大野慎一郎、西 洋孝、井坂恵一、黒田雅彦.
  • 学会等名: 第106回日本病理学会総会
  • 発表場所: 京王プラザホテル(東京)
  • 年月日: 2017-04-27 – 2017-04-29
• [学会発表] Activation of TLR2 regulates CARD10 gene expression by miR-146a-5p in oral squamous cell carcinoma. (2017)
  • 著者名/発表者名: 池畑直樹、高梨正勝、上田しのぶ、里見貴史、渡辺正人、長谷川温、河野通秀、榎本 愛、黒田雅彦、近津大地.
  • 学会等名: 第106回日本病理学会総会
  • 発表場所: 京王プラザホテル(東京)
  • 年月日: 2017-04-27 – 2017-04-29
• [学会発表] RNA干渉核酸に働く短鎖ヘアピンRNAの探索と機能解析 (2017)
  • 著者名/発表者名: 大野慎一郎、原田裕一郎、村上善基、黒田雅彦.
  • 学会等名: 第106回日本病理学会総会
  • 発表場所: 京王プラザホテル(東京)
  • 年月日: 2017-04-27 – 2017-04-29
• [学会発表] miRNA生成経路を欠損する肺がん細胞株の解析. (2017)
  • 著者名/発表者名: 老川桂生、淺田浩太朗、大野慎一郎、黒田雅彦.
  • 学会等名: 第106回日本病理学会総会
  • 発表場所: 京王プラザホテル(東京)
  • 年月日: 2017-04-27 – 2017-04-29
• [学会発表] Clinicopathogic Characteristics of solitary pulmonary capillary hemangioma. (2017)
  • 著者名/発表者名: 橋本浩次、倉田 厚、藤原正親、原 啓、名城珠希、増田芳雄、鈴木良夫、菅間 博、黒田雅彦、堀内 啓.
  • 学会等名: 第106回日本病理学会総会
  • 発表場所: 京王プラザホテル(東京)
  • 年月日: 2017-04-27 – 2017-04-29
• [学会発表] 浸潤性乳管癌に出現するlet-7発現細胞の検討. (2017)
  • 著者名/発表者名: 鶴井敏光、藤田浩司、大野慎一郎、黒田雅彦.
  • 学会等名: 第106回日本病理学会総会
  • 発表場所: 京王プラザホテル(東京)
  • 年月日: 2017-04-27 – 2017-04-29
• [学会発表] Mir-34aによるがん抑制遺伝子BLUの発現制御機構. (2017)
  • 著者名/発表者名: 三部芳裕、大野慎一郎、黒田雅彦.
  • 学会等名: 第106回日本病理学会総会
  • 発表場所: 京王プラザホテル(東京)
  • 年月日: 2017-04-27 – 2017-04-29
• [学会発表] RNAワールドと肺がん発がん機構 (2016)
  • 著者名/発表者名: 黒田雅彦.
  • 学会等名: 第108回ACCP日本部会定期教育講演会.
  • 発表場所: 東京医科大学(東京)
  • 年月日: 2016-10-29
  • 招待講演
• [学会発表] TLS-CHOPを発現する粘液型脂肪肉腫細胞における腫瘍関連分子経路の解析. (2016)
  • 著者名/発表者名: 及川恒輔、高梨正勝、佐野冬樹、黒田雅彦、村垣泰光.
  • 学会等名: 第75回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(横浜)
  • 年月日: 2016-10-06 – 2016-10-08
• [学会発表] 新規ヘアピン型RNA干渉核酸の探索と機能解析. (2016)
  • 著者名/発表者名: 大野慎一郎、原田裕一郎、村上善基、黒田雅彦.
  • 学会等名: 第8回日本RNAi研究会、第3回日本細胞外小胞体学会
  • 発表場所: グランドプリンスホテル広島(広島)
  • 年月日: 2016-08-31 – 2016-09-02
• [図書] グリオーマ治療のDecision Making 脳神経外科診療プラクティス (2016)
  • 著者名/発表者名: 上田しのぶ、黒田雅彦
  • 総ページ数: 304
  • 出版者: 文光堂
• [産業財産権] プロレニン遺伝子またはプロレニン受容体遺伝子の発現を抑制する一本鎖核酸分子およびその用途 (2016)
  • 発明者名: 黒田雅彦
  • 権利者名: 北海道大学、株式会社ボナック、東京医科大学
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: PCT/JP2016/089216
  • 出願年月日: 2016-12-29
  • 外国
• [産業財産権] 遺伝子発現制御のための発現制御核酸分子およびその用途 (2016)
  • 発明者名: 黒田雅彦、大野慎一郎
  • 権利者名: 東京医科大学
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 特願2016-168499
  • 出願年月日: 2016-08-30