研究課題
B細胞を含むすべての血液・免疫細胞は造血幹細胞から作られる。その過程で多能性の造血幹細胞は徐々に分化能が限定されていき、最終的にB細胞にしかなれない前駆細胞に運命決定される。E2A、EBF1、Pax5など様々な転写因子がB細胞への運命決定に関わっているが、詳細は明らかでない。特に、これら転写因子の標的遺伝子として示唆されている細胞内代謝調節遺伝子の役割は不明である。申請者らは最近多能性と多分化能を兼ね備えた血液前駆細胞株（iLS細胞）を樹立した。iLS細胞を用いると、７日間で多能前駆細胞からB細胞系列への運命決定を誘導することが出来る。そこで本研究では、この培養系を用いてB細胞系列への運命決定に必要なエネルギー代謝関連の遺伝子をスクリーニングし、その機能を明らかにすることを目的とする。本年度は研究計画に従い、iLS細胞からB細胞への分化誘導を行うとともに、経時サンプルを採取してRNA-seq解析を行い、細胞内代謝系遺伝子の発現を網羅的に解析した。その結果、Chst3, Pde2aなど様々な遺伝子の発現がB細胞への分化とともに上昇することが明らかとなった。これらの多くはB細胞分化に必須の転写因子であるEbf1, Pax5の標的遺伝子であった。これらの遺伝子発現を骨髄中の前駆細胞で解析したところ、造血幹細胞や多能前駆細胞段階では発現があまり認められなかったが、プロB細胞において発現が上昇していた。このことはB細胞分化が進むに連れて細胞内代謝系遺伝子の発現が上昇していることを示唆している。
2: おおむね順調に進展している
研究計画通り、iLS細胞のB細胞分化誘導系を用いて網羅的遺伝子発現解析を行い、代謝系遺伝子のスクリーニングを行った。B細胞系列への運命決定過程において、代謝を調節する様々な遺伝子の発現が上昇することが明らかとなり、それぞれの遺伝子の機能を解析中である。
研究はほぼ実験計画通りに進んでいる。今後は論文にまとめることを念頭に必要な実験を行なっていきたい。
前年度からの基金分を繰越したため。
移植用マウスの購入。レトロウイルス作成のための培地、プレート、保存用チューブなどを購入する。
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すべて 雑誌論文 (6件) (うち査読あり 5件、 オープンアクセス 6件、 謝辞記載あり 6件) 学会発表 (7件) (うち招待講演 5件)
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