| 研究課題/領域番号 |
26293289
|
|---|
| 研究機関 | 九州大学 |
|---|
研究代表者 |
大西 秀哉 九州大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (30553276)
|
|---|
| 研究分担者 |
中野 賢二 九州大学, 先端融合医療レドックスナビ研究拠点, 教授 (00315061)
野村 政壽 九州大学, 大学病院, 講師 (30315080)
久保 真 九州大学, 大学病院, 助教 (60403961)
中村 勝也 九州大学, 医学(系)研究科(研究院), 共同研究員 (60585743)
山崎 章生 九州大学, 医学(系)研究科(研究院), 共同研究員 (80404440)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2017-03-31
|
| キーワード | smo転写活性 / ヘッジホッグシグナル / RBPJ / MAML3 / 膵がん / 増殖 / 浸潤 / 新規治療標的 |
|---|
| 研究実績の概要 |
平成26年度の研究において、Smo転写活性制御関連候補遺伝子（分子）として、転写共役因子MAML3および転写因子RBPJを同定でき、それらが、低酸素環境におけるSmoの転写亢進活性化に関与していること、癌腫の増殖、浸潤に関与していること（in vitro)を検証した。平成27年度は、治療への応用を早めるため、生物学的意義検証として、平成28年度に予定していた免疫不全マウスを用いた治療実験を前倒しして実施した。免疫不全マウスにMAML3あるいはRBPJを抑制した(siRNAを使用）膵癌細胞は有意に腫瘍形成、腫瘍増殖が低下した。さらにRBPJを強制発現させるplasmidを作成し、免疫不全マウスに異種移植すると、腫瘍増殖は亢進した。
これらの結果より、MAML3およびRBPJがSmo転写活性化を亢進させることで腫瘍の悪性度が亢進していることが示唆された。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
申請書に記載した単年度の予定実験は終了しており、順調に予定通り実験は遂行できていると考える。
|
| 今後の研究の推進方策 |
Smo転写活性制御関連候補遺伝子によるSmo遺伝子プロモーター解析を行う。具体的には、１）Smo遺伝子のプロモーター領域における、選別した候補分子の結合部位の同定、２）Smoプロモーター領域における選別した候補分子のDNA結合活性をEMSA法で解析、３）ルシフェラーゼレポーターアッセイ法により候補分子によるsmo遺伝子の転写活性制御を確認する。
|
| 次年度使用額が生じた理由 |
研究に使用した消耗品や培地などの使用が、予想より少なくして結果が得られたこと、および遺伝子プロモーター解析を今年度に先送りしたことにより、その分の費用が使用されなかったこと。
|
| 次年度使用額の使用計画 |
今年度は、smo遺伝子プロモーター解析を行う予定であり、EMSAのプローブ作成や、ルシフェラーゼレポーター遺伝子コンストラクト作成を行うため、費用がかかるものと予想される。
|
