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2015 年度 実績報告書

ラット切歯歯髄幹細胞による臼歯歯髄の再生:自己幹細胞移植による歯髄再生への展開

研究課題

研究課題/領域番号 26293405
研究機関東京医科歯科大学

研究代表者

興地 隆史  東京医科歯科大学, 医歯(薬)学総合研究科, 教授 (80204098)

研究分担者 吉羽 永子  新潟大学, 医歯学総合病院, 講師 (10323974)
吉羽 邦彦  新潟大学, 医歯学系, 准教授 (30220718)
大島 勇人  新潟大学, 医歯学系, 教授 (70251824)
金子 友厚  新潟大学, 医歯学総合病院, 助教 (70345297)
研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2017-03-31
キーワード歯学 / 歯内治療学 / 歯髄再生
研究実績の概要

申請者らは、複合型スキャホールドを幹細胞とともにラット臼歯に移植すると、歯髄様組織が再生可能であることを確認している。本研究課題ではこの成果を発展させつつ臨床応用への技法を創成することを最終目標として、自己歯髄幹細胞移植による臨床応用を想定した術式の検証をすることを目的とし、研究を実施している。具体的には、単離・培養したラット切歯歯髄幹細胞を、ラットの臼歯歯髄腔へ三次元複合型スキャホールドとともに移植し、歯髄幹細胞を用いた再生実験系確立をはかることを目的とする。
本年度は、前年度の実績に基づき選択したPLLA/ペプチドハイドロゲル混合型三次元スキャホールドをラット間葉系幹細胞とともに、根部歯髄を残し冠部歯髄のみを除去したラット上顎第一臼歯へ移植し、歯髄再生の様相を検証した。幹細胞・スキャホールド混合移植3日経過例では、スキャホールドに沿って細胞が観察されたが充実性組織は観察されなかった。その結果、幹細胞・スキャホールド混合移植後7日経過例では、ほぼ全ての移植部が歯髄様の充実性組織で満たされていた。一方、幹細胞を混合せずスキャホールドのみを移植した群においては、移植後7日経過しても移植部に充実性組織形成は認められなかった。また、各群とも観察期間を通じ明白な好中球浸潤は観察されなかった。さらに、移植後7日経過例において、CD43陽性T細胞様細胞の密度を移植組織と正常組織と比較したところ、有意差は認められなかった。以上より、幹細胞混合三次元複合型スキャホールド移植7日間で,正常歯髄と組織学的に類似した歯髄様充実性組織の再生が可能である事が確認された。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

PLLA/ペプチドハイドロゲル混合型三次元スキャホールドをラット間葉系幹細胞とともに、根部歯髄を残し冠部歯髄のみを除去したラット上顎第一臼歯へ移植する事で、移植後1週という短期間で、正常歯髄と組織学的に類似した歯髄様充実性組織の再生が可能である事が確認されたことから、一定の成果が得られ概ね順調に進展しているものと判断した。

今後の研究の推進方策

同一の動物モデルを用いて、ラット切歯歯髄幹細胞移植、あるいは血管内皮細胞と幹細胞との混合移植を試み、歯髄組織再生の状況を解析する。また、再生組織に対する評価として、血管新生やアポトーシス関連分子の発現状況、あるいは象牙芽細胞マーカーや免疫担当細胞関連分子の発現状況を、免疫組織化学染色法、ウェスタンブロット、リアルタイムPCRなどを用いて解析を進める予定である。

次年度使用額が生じた理由

研究経費の効率的な運用に努めた結果、当初計画と比較して物品費、旅費の支出が少額となった。

次年度使用額の使用計画

引き続き研究経費の効率的な運用に努める予定であるが、研究遂行に際して物品費が多額となると思われるため、これに充当する予定である。

  • 研究成果

    (14件)

すべて 2015

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件、 オープンアクセス 1件、 謝辞記載あり 1件) 学会発表 (13件) (うち国際学会 3件)

  • [雑誌論文] 歯髄幹細胞および歯髄組織のCD146 mRNA発現に対するlipopolysaccharide刺激の影響2015

    • 著者名/発表者名
      末山有希子, 金子友厚, 伊藤崇史, 興地隆史
    • 雑誌名

      日本歯科保存学雑誌

      巻: 58 ページ: 282-289

    • DOI

      10.11471/shikahozon.58.282

    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [学会発表] ラット冠部歯髄の再生歯髄様組織におけるDSPPとIL-6の遺伝子発現について2015

    • 著者名/発表者名
      伊藤崇史, 金子友厚, 末山有希子, 興地隆史
    • 学会等名
      日本歯科保存学会, 2015年度秋季学術大会(第143回)
    • 発表場所
      文京シビックセンター(東京都文京区)
    • 年月日
      2015-11-12 – 2015-11-13
  • [学会発表] 幹細胞混合三次元スキャホールド移植後の再生歯髄組織の解析2015

    • 著者名/発表者名
      伊藤崇史, 金子友厚, 末山有希子, 興地隆史
    • 学会等名
      平成27年度新潟歯学会第2回例会
    • 発表場所
      新潟大学歯学部(新潟市)
    • 年月日
      2015-11-07
  • [学会発表] Macrophage-like cells are differentiated from stem cells in engineered pulp tissues2015

    • 著者名/発表者名
      Kaneko T, Sueyama Y, Ito T, Okiji T
    • 学会等名
      第63回JADR学術大会
    • 発表場所
      福岡国際会議場(福岡市)
    • 年月日
      2015-10-30 – 2015-10-31
  • [学会発表] Lipopolysaccharide-stimulated stem cells show increases of CD146 mRNA expression and cell proliferation2015

    • 著者名/発表者名
      Sueyama Y, Kaneko T, Ito T, Okiji T
    • 学会等名
      第63回JADR学術大会
    • 発表場所
      福岡国際会議場(福岡市)
    • 年月日
      2015-10-30 – 2015-10-31
  • [学会発表] Lipopolysaccharide-stimulation causes proliferation of stem cells of the dental pulp: Double immunoperoxidase labeling analysis2015

    • 著者名/発表者名
      Sueyama Y, Kaneko T, Ito T, Okiji T
    • 学会等名
      日本組織細胞化学会
    • 発表場所
      大阪医科大学(大阪市)
    • 年月日
      2015-10-03 – 2015-10-04
  • [学会発表] Dental Pulp Tissue-engineering with Stem Cells in Rat Molars2015

    • 著者名/発表者名
      Ito T, Sueyama Y, Kaneko T, Okiji T
    • 学会等名
      FDI Annual World Dental Congress
    • 発表場所
      Bangkok (Thailand)
    • 年月日
      2015-09-22 – 2015-09-25
    • 国際学会
  • [学会発表] Effects of lipopolysaccharide-stimulation on CD146 and MAP1B mRNA expression in dental pulp stem cells2015

    • 著者名/発表者名
      Sueyama Y, Kaneko T, Ito T, Okiji T
    • 学会等名
      FDI Annual World Dental Congress
    • 発表場所
      Bangkok (Thailand)
    • 年月日
      2015-09-22 – 2015-09-25
    • 国際学会
  • [学会発表] Histochemical and gene expression analysis of lipopolysaccharide-stimulated stem cells in dental pulp2015

    • 著者名/発表者名
      Sueyama Y, Kaneko T, Ito T, Okiji T
    • 学会等名
      The 57th Symposium of the Society for Histochemistry
    • 発表場所
      Vienna (Austria)
    • 年月日
      2015-09-05 – 2015-09-08
    • 国際学会
  • [学会発表] ラット再生歯髄組織内の幹細胞について2015

    • 著者名/発表者名
      伊藤崇史, 金子友厚, 末山有希子, 興地隆史
    • 学会等名
      第13回日本再生歯科医学会学術大会・総会
    • 発表場所
      日本歯科大学新潟生命歯学部(新潟市)
    • 年月日
      2015-08-29
  • [学会発表] Lipopolysaccharide刺激後のヒト脱落乳歯歯髄幹細胞のCD146 mRNA発現と細胞増殖に関する経時的検索2015

    • 著者名/発表者名
      末山有希子, 金子友厚, 伊藤崇史, 興地隆史
    • 学会等名
      第13回日本再生歯科医学会学術大会・総会
    • 発表場所
      日本歯科大学新潟生命歯学部(新潟市)
    • 年月日
      2015-08-29
  • [学会発表] ヒト脱落乳歯歯髄幹細胞におけるCD146、MAP1B mRNA発現に対するlipopolysaccharide刺激の影響2015

    • 著者名/発表者名
      末山有希子, 金子友厚, 伊藤崇史, 興地隆史
    • 学会等名
      第36回日本歯内療法学会学術大会
    • 発表場所
      鶴見大学記念館(横浜市)
    • 年月日
      2015-07-11 – 2015-07-12
  • [学会発表] Lipopolysaccharide刺激されたラット間葉系幹細胞の細胞増殖とCD146mRNA発現2015

    • 著者名/発表者名
      伊藤崇史, 金子友厚, 末山有希子, 興地隆史
    • 学会等名
      第36回日本歯内療法学会学術大会
    • 発表場所
      鶴見大学記念館(横浜市)
    • 年月日
      2015-07-11 – 2015-07-12
  • [学会発表] ラット間葉系幹細胞を用いたラット臼歯冠部歯髄の再生について2015

    • 著者名/発表者名
      金子友厚, 伊藤崇史, 末山有希子, 興地隆史
    • 学会等名
      第36回日本歯内療法学会学術大会
    • 発表場所
      鶴見大学記念館(横浜市)
    • 年月日
      2015-07-11 – 2015-07-12

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公開日: 2017-01-06  

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