| 研究課題/領域番号 |
26340027
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| 研究機関 | 高崎健康福祉大学 |
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研究代表者 |
田中 進 高崎健康福祉大学, 公私立大学の部局等, 教授 (70348142)
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| 研究分担者 |
保坂 公平 高崎健康福祉大学, その他の研究科, 講師 (70108992)
山際 教之 高崎健康福祉大学, 薬学部, 准教授 (70433638)
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| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| キーワード | カルシニューリン / アルキルベンゼンスルホン酸 / 非競合阻害 / 阻害物質 |
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| 研究実績の概要 |
細胞性免疫に関与するカルシニューリン（CN）の阻害物質として、日常で流通・使用されているプラスチック・ゴム製品中から同定した直鎖型アルキルベンゼンスルホン酸（LAS）は、環境汚染物質として知られている。平成26年度の研究では、LASやその同族体および類縁化合物によるCN活性阻害のin vitroにおける詳細な検討と、合成ポリマー製品中からのCN活性阻害物質のスクリーニングを新たに行った。
LASの類縁化合物であるドデシル硫酸ナトリウム、ベンゼンスルホン酸、p-オクチルベンゼンスルホン酸では顕著なCN活性の阻害は認められなかったが、市販標準品のドデシルベンゼンスルホン酸（C12-LAS）では阻害が10 μMから認められ、40 μM以上ではCNを完全に阻害し、50%阻害濃度（IC50）は約13.5 μMであった。また、市販標準品を使用したアルキル側鎖の長さによる阻害の検討では、デシルベンゼンスルホン酸（C10-LAS）およびウンデシルベンゼンスルホン酸（C11-LAS）では阻害が観察されなかったが、C12-LAS、トリデシルベンゼンスルホン酸（C13-LAS）、テトラデシルベンゼンスルホン酸（C14-LAS）では、アルキル側鎖の長さにより阻害作用が強くなった。また、C12-LASを使用してキネティクス解析により、阻害様式を検討したところ、C12-LASは、非競合阻害によりCNを阻害することが明らかとなった。
次に、合成ポリマー製品中から新たなCN活性阻害物質のスクリーニングを行った。その結果、シリンジ先端ゴムのエタノール抽出物がCN活性を低下させることが示唆された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
研究計画の通り、酵素キネティクス解析により、市販標準品のドデシルベンゼンスルホン酸（C12-LAS）のCNに対する阻害様式が決定され、また、シリンジ先端ゴムのエタノール抽出物がCN活性を低下させることが示された。しかしながら市販のLASの誘導体を使用し、CN活性の検討を行う研究計画が遅れていることから上記のような達成度の区分を選択した。
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| 今後の研究の推進方策 |
研究計画の通り、以下の検討を行う。
1.直鎖型アルキルベンゼンスルホン酸（LAS）のJurkat細胞への取り込みと毒性解析。
2.Jurkat細胞のインターロイキン-2（IL-2）産生を指標としたLASの細胞性免疫に対する影響解析。
3.市販のLASの誘導体を使用し、CN活性の検討を行う。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
次年度使用額は1円であり、これは計算ミスにより発生した金額である。
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| 次年度使用額の使用計画 |
次年度使用金額は1円であることから、次年度の使用計画に変更はなく、当初の予定通り行う。
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