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2016 年度 実施状況報告書

不溶性フィブロイン膜固定化発光細菌を用いた微生物実験

研究課題

研究課題/領域番号 26350259
研究機関大分工業高等専門学校

研究代表者

二宮 純子  大分工業高等専門学校, 一般科理系, 准教授 (60632726)

研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2018-03-31
キーワード発光細菌 / フィブロイン / 固定化担持膜 / 毒性試験 / 実験教材
研究実績の概要

海洋性発光細菌V.fischeri(ATCC49387)ならびに淡水性発光細菌P.luminescensは、LASと市販の洗濯用洗剤の5種類に対して感受性試験の結果を得ることが出来た。V.fischeriは硫黄源要求性の発光細菌である。そのため、硫黄を含むLASが界面活性剤として使用されている洗濯用洗剤には、発光増加を示すことが明らかとなった。ただし、高濃度では細菌が死滅するため発光阻害を。以上の結果から、V.fischeriを用いた毒性試験は、合成洗剤のような夾雑な条件下の場合においても、低濃度のLASの検出が可能であることが示唆された。
また、農作物の防カビ剤として用いられるイマザリルIMZとチアベンダゾールTBZ、オルトフェニルフェノールOPPならびにオルトフェニルフェノール塩OPPNaに対する感受性試験を行った。供試生物としてV.fischeriと同じ海洋性発光細菌Allivibrio fischeri(ATCC7744)を用いた。毒物に対する感受性は、供試生物や培養条件によって異なるため、同じ毒物に対してV.fischeriとA.fischeriの発光挙動が同じとは限らないため、いくつかの生物モデルを並行して用いながら、毒性試験の指標とする必要があると考えられる。
また、不溶性フィブロイン膜(IFF)ならびにフィブロインにアルギン酸添加したフィブロイン膜(IFAF)を作成し、発光細菌の付着実験を行なった。発光細菌の発光強度は再現性が高いが、生菌数の結果にはバラつきが大きいため、担持膜と保存条件についてさらなる改良が必要である。しかしながら、IFFに発光細菌を固定化したチューブを用いて毒性試験を行ったところ、感受性試験よりも鋭敏な反応を示すことが明らかとなった。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

申請者は平成27年12月に開腹手術を行い、その後の回復が思わしくなく体調不良が続いた。そのため研究がやや遅れる状況となった。また、勤務校の業務が過重であることも研究が遅れた理由の一つである。

今後の研究の推進方策

これまでの研究結果を国際会議、学術誌に論文を投稿する予定である。

次年度使用額が生じた理由

平成28年度は、体調を崩したため研究が進まず、またこれまでの研究成果を発表することが出来なかった。

次年度使用額の使用計画

2017年6月の国際会議に査読付き論文を投稿し、受理されているため発表予定である。また、これまでの研究結果をまとめ、平成29年度は国際会議(査読付き論文)と学術誌へ投稿する予定である。

  • 研究成果

    (4件)

すべて 2017 2016

すべて 学会発表 (4件) (うち国際学会 1件)

  • [学会発表] 発光細菌を用いた界面活性剤LASの毒性評価2017

    • 著者名/発表者名
      ○二宮純子、上野崇寿、森田洋
    • 学会等名
      日本化学会第97回春季年会
    • 発表場所
      慶応義塾大学
    • 年月日
      2017-03-16 – 2017-03-18
  • [学会発表] Relationship between cell growth and luminescence bacteria in artificial sea water and sea water medium2016

    • 著者名/発表者名
      ○H. KUWAHARA, J. NINOMIYA, and H. MORITA
    • 学会等名
      The Water and Environment Technology Conference 2016
    • 発表場所
      中央大学
    • 年月日
      2016-08-27 – 2016-08-28
    • 国際学会
  • [学会発表] 発光細菌を用いた界面活性剤の毒性評価2016

    • 著者名/発表者名
      ○二宮純子、杉原勇也、上野崇寿、森田洋
    • 学会等名
      日本理科教育学会第66回全国大会
    • 発表場所
      長野大学
    • 年月日
      2016-08-06 – 2016-08-07
  • [学会発表] 合成洗剤に対する発光細菌の感受性試験2016

    • 著者名/発表者名
      ○吉野祐弥、杉原勇也、二宮純子、森田洋
    • 学会等名
      日本理科教育学会九州支部大会
    • 発表場所
      宮崎市民プラザ
    • 年月日
      2016-05-28 – 2016-05-28

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公開日: 2018-01-16  

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