| 研究課題/領域番号 |
26350500
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| 研究機関 | 岡山大学 |
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研究代表者 |
稲垣 純子 岡山大学, 医歯(薬)学総合研究科, 助教 (90271056)
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| 研究分担者 |
廣畑 聡 岡山大学, 保健学研究科, 教授 (90332791)
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| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| キーワード | ADAMTS1 / 腫瘍内圧 / 細胞外マトリックス / 血管新生 / リンパ管新生 / マクロファージ |
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| 研究実績の概要 |
腫瘍血管は、正常血管系とは大きく異なり、未熟で透過性が亢進し、血管壁の厚みも不規則で無秩序な走行をしている。そのため、腫瘍の組織間圧が高くなりやすい。さらに静脈系も伴っておらず、かつリンパ管も一般に小さく、そのルーメン内は高い腫瘍内圧によって維持できないため、機能できない。従って結果的に、がん組織の内圧 (interstitial fluid pressure: IFP) は容易に上昇する。IFPの増大は、腫瘍血管・リンパ管を含む腫瘍組織および腫瘍を取り巻く細胞外マトリックスに影響を及ぼす。そこで我々は、血管・リンパ管の形成ががんの中でも不良で、容易にがん間質液が溜まりIFPが上昇しやすいヒト皮膚がん由来細胞A431と、高転移能を有し血管・リンパ管が比較的豊富なヒト乳がん細胞MDA-MB-231を用いて担がんマウスモデルを作製し、腫瘍組織の増殖や血管・リンパ管新生への関与が知られている細胞外マトリックス分解酵素であるADAMTS1の発現・局在の解析を続けて来た。A431はADAMTS1を高発現するがん細胞であるが、がん細胞のみならず宿主由来のがん間質にもADAMTS1を発現する細胞が認められ、IFPの増大に伴い発現が上昇することが分かった。一方、MDA-MB-231腫瘍組織では、ADAMTS1を発現している細胞は主にがん関連マクロファージ（Tumor-associated macrophage: TAM）であることが明らかになった。ADAMTS1は、がん組織周縁部のみならずがん組織内に浸潤しているTAMにも高発現していた。またリンパ管内皮細胞のマーカーであるリンパ管ヒアルロン酸レセプターLYVE-1陽性細胞の中にADAMTS1を発現している細胞やLYVE-1陽性TAMも認めら、それらは特にがん組織周縁部に確認されたことより、リンパ管新生とマクロファージ、ADAMTS1との関連性が示唆された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
ドイツの日本学術振興会外国人特別研究員（欧米短期）であるホフマン博士との共同研究により、腫瘍内圧上昇モデルの解析も進み、また共培養細胞系での解析も開始した。
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| 今後の研究の推進方策 |
昨年度に引続き、腫瘍内圧とADAMTS1発現との関連性をより明らかにするため、A431腫瘍組織を用いて免疫染色等で解析するとともに、MDA-MB-231腫瘍組織ではLYVE-1陽性TAMやADAMTS1を発現している浸潤TAMやLYVE-1陽性細胞がVEGFCなどのリンパ管新生促進因子やMMP9なども発現し、リンパ管新生・がんの増殖・転移等に関与しているのかについて免疫染色等で検討する。
また細胞の共培養系では、Phorbol Myristate Acetate: PMA刺激で分化させたヒト急性単球性白血病由来細胞（THP-1）を用い、A431細胞やMDA-MB-231細胞と共培養し、血管・リンパ管新生に関与するサイトカインを始め、VEGFA, VEGFC, MMP9, ADAMTS1等のmRNA、タンパク質発現レベルの解析や共培養の上清を用いてリンパ管新生への効果について比較検討する。A431とMDA-MB-231腫瘍組織におけるリンパ管形成能の違いにADAMTS1が関与している可能性があるのか探る。
またADAMTS1のsiRNAや抗ADAMTS1抗体を用いて、リンパ管新生に及ぼすADAMTS1の効果について同様に解析する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
予定通り消費したが、試薬等比較的安価に購入できたものがあったため、次年度使用額が生じた。
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| 次年度使用額の使用計画 |
リアルタイム用のプライマーの購入に当てる予定である。
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