研究実績の概要 |
平成27年度は、昨年度同様、自然発症高血圧-脳卒中易発モデル動物であるSHR-SPを用いて高血圧下で酸化傷害を受けるタンパク質の検索を行った。検出は、我々が発見したニトロトリプトファン修飾をその特異的抗体で検出後、陽性スポットをLC-MS/MSで行った。サンプリングは昨年同様脳卒中発症直前の18週齢の8個体から行い、今年度は肝臓と腎臓からタンパク質を抽出した。肝臓において10酵素:carbonic anhydrase III, catalase, Methylmanonate-semialdehyde dehydrogenase, Bataine-homocysteine S-methyltransferase I, arginosuccinate synthase, 3-Ketoacyl-CoA thiolase, Fructose-bisphosphate aldolase B, Glyceroaldenyde-3-phosphate dehydrogenase, Thiosulfate sulfurransferase, Hydroxyacyl-coenzyme A dehydrogenase にニトロトリプトファンが検出され、それぞれウエスタンブロット上で対照のWKYラットよりSHR-SPラットで強いシグナルが見いだされた。これらの中で、6種の酵素に関してはニトロ化されたTrp残基の位置も同定された。またこれらの中で、arginosuccinate synthaseは一酸化窒素代謝に関係する酵素であるので、今後詳しく解析予定である。
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