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2016 年度 実績報告書

含ケイ素高輝度蛍光剤を活用した蛍光応答型高精度ゲノム解析プローブの開発

研究課題

研究課題/領域番号 26410173
研究機関群馬大学

研究代表者

篠塚 和夫  群馬大学, 大学院理工学府, 教授 (20206105)

研究分担者 井上 裕介  群馬大学, 大学院理工学府, 准教授 (90304302)
研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2017-03-31
キーワード蛍光性オリゴDNA / シリル化ピレン / シリル化ペリレン / モレキュラービーコン / 一塩基ミスマッチ
研究実績の概要

①平成26年度研究において開発した、シアノ基を持つ高発光型シリル化ピレンについて、置換位置の異なる2種類のシアノ基修飾シリル化ピレンを合成し、これらを当初計画に従ってクリック反応を用いてオリゴDNA中に導入可能な、アジド基結合型誘導体へと変換した。これらを予めアルキニル基を持つ非ヌクレオシド性スカホールドを3'末端付近及び5'末端に導入した修飾DNAと反応させて、ステム中の隣接した2カ所にシアノ基修飾シリル化ピレンを持つ2種類のモレキュラービーコンプローブを作成した。これらのプローブでは相補鎖非存在下で観察される顕著なエキシマー発光が、相補鎖存在下でのみ大きく減少することが観察された。
②平成27年度に引き続き、ヒトパピローマウイルス遺伝子診断用プローブとして、C-5位アントラキノン結合デオキシウリジン残基及びC-5シリル化ペリレン結合デオキシウリジン残基を併せ持つモレキューラービーコンプローブについて、強毒性のHPV16及びHPV18のそれぞれに相補的な2種のプローブを合成し、標的DNA存在下及び非存在下での蛍光挙動を測定した。その結果いずれのプローブも標的存在下でのみその蛍光強度が大きく(14~26倍)増強することを確認した。また、HPV16用プローブとHPV18用プローブ何れにおいても、蛍光の増大は特異的標的鎖存在下の場合だけであり、他の標的との交差反応を示さない、特異性の高いプローブであることを確認した。
以上の成果に付いては国内及び国際学会で発表した。

  • 研究成果

    (4件)

すべて 2017 2016

すべて 学会発表 (4件) (うち国際学会 2件)

  • [学会発表] 短鎖オリゴマーを用いたモレキュラービーコンプローブの配列識別能の向上2017

    • 著者名/発表者名
      川崎昌和、森口朋尚、篠塚和夫
    • 学会等名
      日本化学会第97春季年会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      2017-03-16 – 2017-03-19
  • [学会発表] Development of Convenient Genotyping of High-Risk HPV using Fluorescence DNA Probes2016

    • 著者名/発表者名
      Y. Irie, K. Shinozuka, T. Sano, T. Moriguchi
    • 学会等名
      The 3rd International Symposium of Gunma University Medical Innovation
    • 発表場所
      KIRYU
    • 年月日
      2016-12-09 – 2016-12-09
    • 国際学会
  • [学会発表] 高リスク型HPV検出用モレキュラービーコンの開発2016

    • 著者名/発表者名
      入江勇輔、森口朋尚、篠塚和夫
    • 学会等名
      第2回核酸医薬学会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      2016-11-15 – 2016-11-17
  • [学会発表] Development of Dumbbell-Shaped Molecular Beacon Probes Bearing Diphenylsilylated Pyrene2016

    • 著者名/発表者名
      T. Moriguchi, R. Nakayama, D. Moki, and K. Shinozuka
    • 学会等名
      The 43rd International Symposium of Nucleic Acids Chemistry
    • 発表場所
      KUMAMOTO
    • 年月日
      2016-09-27 – 2016-09-29
    • 国際学会

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公開日: 2018-01-16  

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