血中循環がん細胞解析を利用した小細胞肺癌の新規治療標的・バイオマーカーの同定

2016 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 26430142
• 研究機関: 金沢大学
• 研究代表者: 木村 英晴 金沢大学, 医学系, 助教 (40444202)
• 研究分担者: 笠原 寿郎 金沢大学, 医学系, 准教授 (30272967) ; 曽根 崇 金沢大学, 医薬保健学総合研究科, 特任准教授 (30420334)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: 肺癌 / 血中DNA / 循環腫瘍細胞

研究実績の概要

【小細胞肺癌由来CTCの遺伝子発現の解析】当初計画していたISET法ではCTCの回収とその後の十分なDNA回収を行うことはできなかった。そのため当初の計画から変更し、単核球分画からRNAを抽出しCTC由来遺伝子発現の解析を行った。小細胞肺癌12例の末梢血単核球分画からRNAを抽出し、RT-PCR法にて遺伝子発現を解析した。小細胞肺癌に特異的に発現するpreproGRP遺伝子は12例中8例で検出できた。この8例では単核球分画内にCTCが存在するものと考え、単核球分画由来RNAを用いて、神経内分泌関連および上皮間葉移行関連、血管新生関連の遺伝子発現を検討した。その結果、上皮間葉移行関連遺伝子発現を検出することができ、単核球分画由来RNAを用いてCTC関連遺伝子発現が可能であることが示唆された。本研究は、現在マイクロアレイを用いた網羅的遺伝子発現解析を行っており、その結果を含めて論文発表する予定である。
【次世代シークエンサーを用いた循環血中微量DNAの遺伝子異常解析】前年度に、肺癌患者から回収された循環血中微量DNAから次世代シークエンサーを用いた遺伝子変異解析が可能であることを示した。本年度は、さらに循環血中微量DNAから腫瘍由来遺伝子変異を検出できる症例の臨床病理学的特徴を明らかにする検討を進めた。剖検を得られた小細胞肺癌4例を対象に、剖検で複数の病変臓器から抽出されたDNAと死亡前2週間以内に得られた循環血中微量DNAを用いてLung Cancer Panel (QIAGEN社)で解析した。循環血中微量DNAで検出できる遺伝子変異は、複数の病変臓器に共通して存在しallele frequencyが有意に高かった。この結果は、本研究にて計画されていたものではないが、研究の過程で新たに得られた知見である。他の研究者からは同様の成果は報告されておらず、現在論文投稿中である。

研究成果

• [雑誌論文] Imatinib ameliorates bronchiolitis obliterans via inhibition of fibrocyte migration and differentiation. (2017)
  • 著者名/発表者名: 1.4.Watanabe S, Kasahara K, Waseda Y, Takato H, Nishikawa S, Yoneda T, Hara J, Sone T, Abo M, Kimura H, Nakao S.
  • 雑誌名: J Heart Lung Transplant. 巻: 36 ページ: 138-147
  • DOI: 10.1016/j.healun.2016.06.001.
  • 査読あり
• [雑誌論文] 1.1.A Rapid and Sensitive Method for Detection of the T790M Mutation of EGFR in Plasma DNA. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kimura H, Nishikawa S, Koba H, Yoneda T, Sone T, Kasahara K.
  • 雑誌名: Adv Exp Med Biol. 巻: 924 ページ: 171-174
  • DOI: 10.1007/978-3-319-42044-8_31
  • 査読あり
• [雑誌論文] 1.2.Impact of Tight Junction Protein ZO-1 and TWIST Expression on Postoperative Survival of Patients with Hepatocellular Carcinoma. (2016)
  • 著者名/発表者名: Nagai T, Arao T, Nishio K, Matsumoto K, Hagiwara S, Sakurai T, Minami Y, Ida H, Ueshima K, Nishida N, Sakai K, Saijo N, Kudo K, Kaneda H, Tamura D, Aomatsu K, Kimura H, Fujita Y, Haji S, Kudo M.
  • 雑誌名: Dig Dis. 巻: 34 ページ: 702-707
  • DOI: 10.1159/000448860
  • 査読あり
• [雑誌論文] Postoperative Recurrence of Invasive Thymoma with Cold Agglutinin Disease and Autoimmune Hemolytic Anemia. (2016)
  • 著者名/発表者名: 1.3.Yoneda T, Koba H, Tanimura K, Ogawa N, Watanabe S, Hara J, Abo M, Sone T, Kimura H, Kasahara K.
  • 雑誌名: Intern Med. 巻: 55 ページ: 2685-2689
  • DOI: 10.2169/internalmedicine.55.6654.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Severe pneumonitis after nivolumab treatment in a patient with melanoma. (2016)
  • 著者名/発表者名: 1.5.Watanabe S, Kimura H, Takato H, Waseda Y, Hara J, Sone T, Abo M, Maeda S, Matsushita T,Kasahara K.
  • 雑誌名: Allergol Int. 巻: 65 ページ: 487-489
  • DOI: 10.1016/j.alit.2016.04.009.
  • 査読あり
• [学会発表] Next-generation sequencing analysis identifies genomic alterations in pathological morphologies  a case report of pulmonary carcinosarcoma harboring EGFR mutations. (2016)
  • 著者名/発表者名: Hayato Koba, Hideharu Kimura, Shingo Nishikawa, Yuichi Tambo, Takashi Sone, Atsushi Tajima,  Kazuo Kasahara
  • 学会等名: ESMO ASIA 2016
  • 発表場所: シンガポール
  • 年月日: 2016-12-16 – 2016-12-19
  • 国際学会