|
本研究は、フリーズドライ（凍結乾燥）技術を用いて希少動物の精子を保存し、種の保存に向けた新規かつ安全な精子バンクの構築を目指すものである。研究代表者は、冷蔵庫（4℃）で長期保存可能なフリーズドライ精子保存法の開発に成功しており、同一条件で異なる動物種の精子が保存できることを明らかにしている。本研究では、研究代表者の開発したフリーズドライ精子保存法を用いて野生動物精子をフリーズドライし、その後の受精能力を評価することで、フリーズドライ精子保存法の汎用性について検討した。これまで国内外の研究機関および動物園と連携しており、本年度はフタコブラクダ等の精巣組織を提供いただいた。精巣組織は、輸送後に精巣上体尾部より精子を回収した。回収した精子は、形態学的な正常性を観察した後、トリス-EDTA保存液に懸濁した。懸濁後の精子は、研究代表者が開発した方法を用いてフリーズドライした後、冷蔵庫で一定期間保存した。その後、純水を用いて復水した精子は、形態学的な正常性を観察した後、マウスの卵子内に顕微授精法を用いて導入した。精子導入後の卵子は体外培養を行い、その後の前核の出現を確認することで、導入した精子に正常な受精能があると判断し、その評価を行った。本研究の結果から、フリーズドライ精子は冷蔵庫での一定期間保存後においても正常な形態を示していた。更に、これら精子をマウス卵子に導入した結果、異常受精は認められなかった。
|
