研究課題
前年度までにyki mRNAの細胞内局在に必要十分なRNA領域(SL2)及びその領域に結合が予想された候補タンパク質を13種同定した。そこで当該年度では、SL2の生物学的重要性及び、SL2結合候補タンパク質のyki mRNAの細胞内局在に与える影響に関して解析した。SL2の生物学的重要性を検討するために、SL2を除いたyki mRNA (ΔSL2)を過剰発現するショウジョウバエ系統を作製した。通常、野生型Ykiタンパク質過剰発現では形態異常は観察されないが、ΔSL2を複眼で過剰発現した結果、発現されるタンパク質は野生型にも関わらず、非常に重篤な過形成が見られた。更に、前年度までに、SL2内にyki mRNAの分解に関わる配列があること、これとは独立してyki mRNAの細胞内局在を制御する配列及び構造があることを見出しており、それぞれの生体での機能を調べるために、それぞれの配列に塩基置換を導入した変異yki mRNAを複眼で過剰発現させた。その結果、弱いながらも過形成が観察された。これらのハエのyki mRNA及びタンパク質の量を調べたところ、mRNAの分解に関わる配列に変異を導入したyki mRNAは予想通り分解を免れていた。一方興味深いことにyki mRNAの細胞内局在に関わる配列に変異を導入したものでは、yki mRNAの合成量は通常通りであるが、Ykiタンパク質の合成量が10倍以上増加していた。また培養細胞を用いた解析から、yki mRNAがSL2依存的に翻訳抑制の場であるP-bodiesに集積することも明らかにしており、以上の結果より、yki mRNAはSL2を介してRNAの分解と翻訳抑制を受けることを明らかにした。これらの成果は学術論文として発表した。また、SL2結合候補タンパク質13種をノックダウンした結果、局在に異常を示すものが5種得られた。
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