| 研究課題/領域番号 |
26440201
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| 研究機関 | 藤田保健衛生大学 |
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研究代表者 |
橋本 敬一郎 藤田保健衛生大学, 総合医科学研究所, 教授 (70192268)
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| 研究分担者 |
J・M Dijkstra 藤田保健衛生大学, 総合医科学研究所, 講師 (10387681)
岡村 和彦 藤田保健衛生大学, 保健学研究科, 准教授 (60132255)
塚本 健太郎 藤田保健衛生大学, 総合医科学研究所, 助教 (00582818)
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| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2018-03-31
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| キーワード | MHC / クラスII分子 / DM分子 / ペプチド積載機構 / 抗原提示 / 獲得免疫機構 / 肉鰭類 / 分子進化 |
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| 研究実績の概要 |
古典的MHCクラスII分子は、有顎脊椎動物の獲得免疫系において、Tリンパ球への主として外来ペプチド抗原の提示という重要な機能を有していることが知られている。この古典的MHCクラスII分子へのペプチド抗原結合を細胞内で非常に効率的に行うシステムがDM分子を中心としたペプチド積載システムである。本研究では、分子進化上の要と考えられる動物種を用いて、このシステムに関わるクラスII遺伝子を単離し、詳細な解析を行う。シーラカンスと同じ肉鰭類の肺魚がより四足類に近い事が報告されており、本研究では最適な肉鰭類として肺魚を対象に選んだ。肺魚は大別して、オーストラリア、南アメリカそしてアフリカ産の数種が存在するが、本研究ではアフリカ産の肺魚を入手して実験に用いている。研究方法としては、研究実施計画に記した様に、ＤＭシステムにおいて重要な相互作用領域に関わる古典的ＭＨＣクラスIIα鎖とＤＭクラスIIα鎖の２者について、その両方向からキーとなるアミノ酸残基の保存性または遺伝子そのものの存在に関して詳細な検討を行う。 平成２８年度は、前年度までの実験に引き続き、さらに肺魚のMHCクラスII遺伝子の単離・解析を行った。肺魚の組織より得られたmRNAを基に、RACE法、RT-PCR法等によりMHCクラスII遺伝子の単離・解析を行った。前年度までの解析に引き続き、得られた肺魚ＭＨＣクラス II遺伝子の詳細な解析を進めている。また、本研究において分子進化上重要と考えられる動物種として加えた四足動物のサラマンダーからも、MHCクラスII遺伝子の単離・解析を行い、得られた遺伝子配列について他のMHC遺伝子群との比較解析を実施している。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
肺魚からは、前年度までに引き続き、MHCクラスII遺伝子の単離を試み、複数の候補遺伝子を得て詳細な解析を進めている。また、本研究をさらに進展させる上で重要と考えられ途中から導入した四足動物のサラマンダーからもMHCクラスII遺伝子の複数の候補遺伝子を得て詳細な解析を進めている。おおむね順調に研究が進展していると判断される。
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| 今後の研究の推進方策 |
平成２９年度は、サラマンダーから得られた遺伝子の染色体解析を実施するために適切なプローブの作成を試みる。肺魚及びサラマンダーから得られているMHCクラスII遺伝子の詳細な解析をさらに進め、これまでに得られて来た結果を総括する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
研究実績の概要に記した様に、平成２８年度も肺魚以外にサラマンダーのMHCクラスII遺伝子に関する情報を得る実験を進めて来た。サラマンダーから得られた遺伝子の染色体解析を実施し、いくつかのプローブを試したが良好な結果が得られず、研究延長の必要性が発生した。染色体解析に用いるプローブ調製をさらに改善し、適切なプローブを得ることによって実験を推進させ、次年度に研究を進展させて行く予定である。
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| 次年度使用額の使用計画 |
染色体解析に用いるプローブ調製をさらに改善したり、他にも実験の推進に必要な試薬等に次年度使用額を使用して行く予定である。また、本基盤研究による成果の一部を論文発表する目的での研究費使用も予定している。
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