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2016 年度 実績報告書

O.minuta酵母の基礎生物学を進めるための遺伝学的基盤解析系の確立

研究課題

研究課題/領域番号 26450111
研究機関国立研究開発法人産業技術総合研究所

研究代表者

横尾 岳彦  国立研究開発法人産業技術総合研究所, 創薬基盤研究部門, 主任研究員 (60358306)

研究分担者 千葉 靖典  国立研究開発法人産業技術総合研究所, 創薬基盤研究部門, 上級主任研究員 (00357500)
研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2017-03-31
キーワードメタノール資化性酵母 / 接合 / 胞子形成 / 二倍体 / GPIアンカー
研究実績の概要

メタノール資化性酵母 Ogataea minuta において自在な遺伝学的解析を可能とすべく、有性生殖が可能な株を確立し、また、染色体に組み込まれることなしに自律的に複製可能なプラスミドの構築を行うことを目的とする。平成 28 年度は、以下のような研究を行った。

前年度に取得した O. minuta NBRC 10746alpha 株と、二重薬剤耐性(ゼオシンおよびハイグロマイシン B)を利用することにより、NBRC 10746 株における二倍体を取得することに成功した。この二倍体株は一倍体に比較して約 1.3 倍の大きさであり、倍増時間や形態は一倍体株とほぼ同一であること(YPD 培地、30℃ における倍増時間約 120 分、扁平率約 90%)を明らかにした。また、この二倍体株が効率よく胞子形成を行わせる条件を見出し、マイクロマニピュレータによる胞子の四分子解析に成功した。これより、O. minuta においても遺伝学的解析手法が適用可能であることを明らかにした。
前年度に取得した自律複製配列(ARS)保有プラスミドの有効性を調べるため、グリコシルホスファチジルイノシトールの脂質リモデリングに関与する PER1 遺伝子の破壊を試みた。その結果、O. minuta において per1 遺伝子破壊株は重篤な増殖遅延を示すことを明らかにした。この増殖遅延の表現型は、O. minuta の ARS および PER1 遺伝子(Saccharomyces cerevisiae 由来あるいは O. minuta 由来)が挿入されたプラスミドを導入することにより相補されることを見出した。これにより、ARS を含むプラスミドが O. minuta において実用可能であることを明らかにした。

  • 研究成果

    (6件)

すべて 2017 2016

すべて 学会発表 (4件) (うち国際学会 1件、 招待講演 1件) 図書 (1件) 産業財産権 (1件)

  • [学会発表] 酵母Ogataea minutaにおけるプラスミドおよび二倍体細胞作出の試み2017

    • 著者名/発表者名
      小松崎亜紀子、吉原瑛梨奈、千葉靖典、横尾岳彦
    • 学会等名
      第16回産総研・産技連LS-BT合同研究発表会
    • 発表場所
      産業技術総合研究所共用講堂(茨城県つくば市)
    • 年月日
      2017-01-31 – 2017-01-31
  • [学会発表] 酵母Ogataea minutaにおける遺伝学的基盤解析系の確立2017

    • 著者名/発表者名
      横尾岳彦
    • 学会等名
      寄附講座成果報告シンポジウム「メタノール資化性酵母研究の展望」
    • 発表場所
      大阪大学銀杏会館(大阪府吹田市)
    • 年月日
      2017-01-27 – 2017-01-27
    • 招待講演
  • [学会発表] 酵母Ogataea minutaにおけるプラスミドおよび二倍体細胞作出の試み2016

    • 著者名/発表者名
      小松崎亜紀子、吉原瑛梨奈、千葉靖典、横尾岳彦
    • 学会等名
      第39回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(神奈川県横浜市)
    • 年月日
      2016-12-02 – 2016-12-02
  • [学会発表] Mating-type switching in the methylotrophic yeast Ogataea minuta2016

    • 著者名/発表者名
      小松崎亜紀子、千葉靖典、横尾岳彦
    • 学会等名
      14th International Congress on Yeasts
    • 発表場所
      淡路夢舞台国際会議場(兵庫県淡路市)
    • 年月日
      2016-09-12 – 2016-09-12
    • 国際学会
  • [図書] A practical guide to using glycomics databases2017

    • 著者名/発表者名
      成松久、鈴木芳典、木下フローラ聖子、鹿内俊秀、藤田典昭、佐藤隆、栂谷内晶、横尾岳彦、安形清彦、久保田智巳、野呂絵里花
    • 総ページ数
      370
    • 出版者
      Springer International Publishing
  • [産業財産権] メタノール資化性酵母の自律複製型プラスミド2017

    • 発明者名
      横尾岳彦、小松崎亜紀子、千葉靖典、野中浩一、馬場悟史
    • 権利者名
      横尾岳彦、小松崎亜紀子、千葉靖典、野中浩一、馬場悟史
    • 産業財産権種類
      特許
    • 産業財産権番号
      特願2017-013666
    • 出願年月日
      2017-01-27

URL: 

公開日: 2018-01-16  

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