| 研究課題/領域番号 |
26450293
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| 研究機関 | 日本大学 |
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研究代表者 |
伊藤 琢也 日本大学, 生物資源科学部, 准教授 (20307820)
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| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| キーワード | イルカ / バイオマーカー / 診断 / microRNA |
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| 研究実績の概要 |
飼育下のイルカにおける健康管理および傷病治療をする上で大きな課題となっている炎症性疾患を早期に診断することは重要である。本研究の主題であるイルカの臓器特異的バイオマーカーは，血液検査によって炎症が生じている臓器や組織を特定することができると予想されるが，それらのバイオマーカーを探索するために，今年度はバイオマーカーの候補となりうるmicroRNA(miRNA)に着目し，イルカの諸臓器で特異的に発現しているmiRNAの分離・同定を試みた。ハンドウイルカの肝臓，脾臓および肺からsmallRNAを抽出して，イルカmiRNAのライブラリーを構築した。得られたイルカmiRNAライブラリーの配列解析を行ったところ，62種のmiRNAがmiRBaseおよびBlast検索によって同定できた。これら同定したイルカmiRNAがイルカのいずれの臓器で特異的に発現しているかを明らかにするためにRealTime RT-PCRによって定量したところ，脳，肝臓，腎臓，肺，心臓などの諸臓器において特異的に発現しているmiRNAが確認できた。
以上，これらイルカの臓器に特異的に発現しているmiRNAは臓器障害に伴って血中に放出される可能性があり，血液検体を用いた際に炎症性疾患のバイオマーカー候補となることが期待される。平成27年度は研究協力者から分与された臨床検体を用いて，血中のmiRNAの高感度検出法および評価基準の設定方法について検討する予定である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
当初の計画どおり，平成26年度はイルカにおいて発現が認められる諸臓器由来のmiRNAを多数同定でき，障害に伴って生じる可能性の高い血中バイオマーカーの候補が得られたため。
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| 今後の研究の推進方策 |
分離・同定されたイルカのmiRNAについて特定の臓器における組織発現量を明らかにして，既知のデータと比較することによって，炎症性疾患に罹患した個体の早期臨床診断が可能となることが予想されるので，平成27年度は同定されたイルカmiRNAの血中における発現レベルを評価する。血中miRNAレベルが健常な個体では一定以下で，炎症性疾患に罹患した場合には急激に上昇するmiRNAについて炎症性疾患のバイオマーカー候補として検討する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
平成26年度の研究に必要な遺伝子抽出について，効率的な手法を確立でき，当初予定していた試薬を購入する必要がなくなったため。
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| 次年度使用額の使用計画 |
平成27年度に計画している物品費のうち試薬類の経費に充当して，さらなる研究の進展を図る。
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