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2017 年度 実績報告書

DNAメチル基転移酵素アクセス可能領域の探査 ~インプリント機構解明に向けて~

研究課題

研究課題/領域番号 26450449
研究機関東京農業大学

研究代表者

尾畑 やよい  東京農業大学, 生命科学部, 教授 (70312907)

研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2018-03-31
キーワード胚発生 / DNAメチル化 / インプリンティング / 卵子
研究実績の概要

ゲノミックインプリンティングをはじめとするDNAメチル化機構の詳細は明らかにされておらず、いつ、どのようにして特定のDNA配列がメチル化修飾を受けるのかは不明である。本研究では、ゲノミックインプリンティング機構解明の一途として、生殖細胞形成過程でのみ共発現しインプリント確立に不可欠なDNAメチル基転移酵素DNMT3A2とその補酵素DNMT3L(DNMTs)を胚発生過程で恒常的に高発現するトランスジェニックマウスを作製し、DNMTsがアクセスしやすい領域を特定することを目的とした。
前年度までの解析結果から、トランスジェニックマウスの出生率が野生型マウスと等しいものの、生後20週齢までに全て致死となること、しかし、7つのインプリント遺伝子のDNAメチル化に顕著な異常がないことを示した。一方で、トランスジェニックマウスでは、インプリント領域以外の領域で出生後に高メチル化される領域が存在することが示された。本年度は、論文投稿・受理に向け不足しているデータ、’トランスジェニックマウスにおけるインプリント遺伝子のmRNA定量解析’、を実施した。その結果、Slc38a4遺伝子の発現がトランスジェニックマウスで野生型よりも有意に高いことがわかったが他の遺伝子の発現に差は認められなかった。Slc38a4遺伝子のDNAメチル化には差異がないことは既に確認しており、体細胞分裂期の細胞においてインプリント領域は外来性DNMTsが作用しにくくなっていることが、裏付けられた。以上の結果からDNMTsがアクセス可能な領域は生殖細胞と体細胞で異なることがわかった。

備考

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  • 研究成果

    (5件)

すべて 2018 2017

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (2件) (うち国際学会 1件)

  • [雑誌論文] Development of fertile mouse oocytes from mitotic germ cells in vitro.2017

    • 著者名/発表者名
      Morohaku K, Hirao Y, and Obata Y.
    • 雑誌名

      Nat Protoc

      巻: 12 ページ: 1817-1829

    • DOI

      10.1038/nprot.2017.069

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Reconstitution of mouse oogenesis in a dish from pluripotent stem cells.2017

    • 著者名/発表者名
      Hayashi K, Hikabe O, Obata Y, and Hirao Y.
    • 雑誌名

      Nat Protoc

      巻: 12 ページ: 1733-1744

    • DOI

      10.1038/nprot.2017.070

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Differentiation of Mouse Primordial Germ Cells into Functional Oocytes In Vitro.2017

    • 著者名/発表者名
      Morohaku K, Hirao Y, and Obata Y.
    • 雑誌名

      Ann Biomed Eng

      巻: 45 ページ: 1608-1619

    • DOI

      10.1007/s10439-017-1815-7

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] CRISPR/Cas9システムによる 新規KRAB-ZFP遺伝子機能欠損マウスの作製とその表現型解析2018

    • 著者名/発表者名
      府川夏実、佐々木恵亮、尾畑やよい
    • 学会等名
      第13回日本生殖発生医学会
  • [学会発表] Parental origin-derived primary memories are erased in Zfp57-deficient embryonic stem cells.2017

    • 著者名/発表者名
      Sasaki K, Nakajima A, Morohaku K, Hara H, Asanuma Y, Sotomaru Y, Kono T, and Obata Y.
    • 学会等名
      4th World Congress of Reproductive Biology
    • 国際学会

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公開日: 2018-12-17  

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