| 研究課題/領域番号 |
26450452
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| 研究機関 | 近畿大学 |
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研究代表者 |
森山 隆太郎 近畿大学, 理工学部, 講師 (30411573)
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| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| キーワード | 精子 / 長鎖脂肪酸 / 不飽和脂肪酸 / GPR120 |
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| 研究実績の概要 |
肥満人口の増加により、長鎖脂肪酸が体に与える影響が問題となりつつある。しかし、シグナル分子としての長鎖脂肪酸が生殖機能に与える影響はあまり解明されていない。これまでに、長鎖脂肪酸受容体GPR120がマウス精子頭部と中片部に局在することをわれわれは見出している。本研究の最終目的は長鎖脂肪酸をシグナル分子とした精子における運動性調節の分子機構を明らかにすることにある。本年度は、長鎖脂肪酸受容体を介した精子尾部の運動性を調節する細胞内シグナル伝達機構の検討、ならびに平成27年度以降におこなう実験の事前準備をおこなった。
１）成熟マウスの精巣上体尾部より採取した精子を長鎖脂肪酸受容体アゴニストに暴露した結果、不飽和脂肪酸に暴露したときと同様に精子運動性の亢進が観察された。そこで、長鎖脂肪酸受容体アゴニストに暴露した精子において、extracelluilar signal-regulated kinase (ERK)経路とphophatidylinositol-3 kinase (PI3K)/Akt-protein kinase (Akt)経路が活性化するか否か、Western blotting法により解析した。結果、弱い発現は観察できたが、まだ、明確な結論を出すまでには至っていない。
２）凍結融解精子に長鎖脂肪酸を暴露する実験の事前準備として、マウス精子の凍結保存ならびに凍結融解精子を用いた実験系の立ち上げをおこなった。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
精子を用いたWestern blotting法の確立に手間取り、長鎖脂肪酸に暴露した精子においてERK経路とPI3キナーゼ/Akt経路が活性化しているのか否か、まだ結論が出ていない。現在、ERK経路とPI3キナーゼ/Akt経路の阻害剤（PLC阻害剤、MAP Kinase Kinase活性阻害剤、PI3K阻害剤、Akt1/2阻害剤）を持ちいた精子の行動観察実験をWestern blottingの実験に並行しておこなっている。
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| 今後の研究の推進方策 |
精子のWestern blotting法に関しては、経験のある研究者に助言をいただいており、次年度中には結論を出すことが可能であると考えている。また、融解凍結精子の使用には目処がたっているので、上述した実験と合わせて計画通り実験を進めて行く予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
平成26年度の実験が当初の計画通りに進まなかったため、実際に実験を行う次年度に予算の一部を繰り越すことにした。
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| 次年度使用額の使用計画 |
実験に使用する阻害剤の購入代金として平成27年度に使用する計画である。
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