研究課題
1年度目の研究成果として、(成熟卵に精子を顕微注入して得られる)顕微授精卵におけるDNA修復遺伝子の発現について検討したところ、Direct reversal of damageに関与するMGMT遺伝性、single-strand damageに関与するUDG、XPCならびにMSH2遺伝子、さらにdouble-strand damageに関与するCRCC6ならびにRAD51遺伝性の発現に関してRT-PCRに検索を行ったが、発現量に差がなかった。そこで、今年度は、成熟段階以前の卵、すなわち、卵胞より採卵直後の卵核胞期の卵(GV卵)、やや減数分裂が進行した卵核胞後期の卵(GV-L卵)、卵核胞崩壊後で成熟が進行段階にある第一減数分裂中期の卵(M-I卵)と、第二減数分裂中期の成熟卵(M-II卵)で、これら6遺伝子の発現を調べたところ、UDGの発現がM-I卵ならびにM-II卵で、XPCの発現がM-II卵でそれぞれ他の成熟段階の卵(GV卵~GV-L卵ならいびにGV卵~M-I卵)に比べ有意にアップレギュレートしていた。さらに、MSH2およびRAD21遺伝子においても成熟が進行するにつれて発現量が増加する傾向が認められた。これらの結果から、凍結乾燥精子を顕微授精された受精卵においては、卵の成熟培養中にDNA修復遺伝子が蓄積するか、あるいはDNA修復遺伝子の発現量が増加する可能性が示唆された。これらの成果はAnimal Science Journalに受理された。昨年度は、ひきつづき顕微授精卵の移植実験を行った。15 mMトレハロース処理の凍結乾燥精子を顕微注入し、10時間後に借り腹雌豚3頭に移植を行った。いずれも妊娠の継続は認められなかった。本年度についても、ひきつづき顕微授精卵の移植実験を行った。15 mMトレハロース処理の凍結乾燥精子を顕微注入し、8もしくは12時間後に借り腹雌豚2頭づづ(計4頭)に移植を行った。いずれも妊娠の継続は認められなかった。
すべて 2017 2016
すべて 雑誌論文 (2件) (うち国際共著 2件、 査読あり 2件、 謝辞記載あり 2件) 学会発表 (2件) (うち国際学会 1件、 招待講演 2件)
Animal Science Journal
巻: 87 ページ: 1325-1333
10.1111/asj.12554
Theriogenology
巻: 86 ページ: 170-175
10.1016/j.theriogenology.2016.04.029