| 研究課題/領域番号 |
26460289
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
坪井 貴司 東京大学, 大学院総合文化研究科, 准教授 (80415231)
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| 研究分担者 |
北口 哲也 早稲田大学, 総合研究機構, 主任研究員(研究院准教授) (60432374)
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| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2018-03-31
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| キーワード | 開口放出 / イメージング / グレリン |
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| 研究実績の概要 |
グレリン分泌細胞は、主に胃や十二指腸などの消化管や膵臓ランゲルハンス島などに存在する。胃のグレリン分泌細胞からのグレリン分泌は、周辺細胞から分泌されるペプチドホルモンや自律神経から分泌される神経伝達物質によって調節されると考えられている。さらに、摂取したアミノ酸、グルコース、脂質などの栄養素によってもグレリン分泌が調節される可能性が考えられる。昨年度までに、細胞外グルコース濃度変化によって引き起こされるグレリン分泌調節機構について、グレリン分泌細胞株であるMGN3-1細胞を用いて解析を行った。解析の結果、細胞外グルコース濃度低下によりATP感受性カリウムチャネルが開口することで、電位依存性カルシウムチャネルが開口し、その結果細胞内にカルシウムイオンが流入し、グレリン分泌が起こることを見出した。本年度は、このグレリン分泌を制御する因子の同定と機能解析を進めた。まず、低グルコース条件下で培養したMGN3-1細胞からmRNAを抽出し、次世代シークエンサーを用いたRNA-seq解析を行った。解析の結果、膜（小胞）輸送や膜（小胞）融合を司る低分子量Gタンパク質Rabファミリー、CAPSファミリー、そしてSNAREタンパク質ファミリーの発現を見出した。そこで、RNA干渉法を用いて内在性のRabとCAPS遺伝子をそれぞれ個別にノックダウンし、グレリン分泌への影響を解析した。解析の結果、RabおよびCAPSともに、グレリン分泌における膜融合過程を調節する可能性を見出した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
研究成果を、国際誌に投稿したが、査読者から多数の追加実験の実施を求められた。現在、指示された追加実験を実施しているが、指示された追加実験をすべて終了するのに時間がかかっており、計画よりやや遅れている。
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| 今後の研究の推進方策 |
全反射蛍光顕微鏡を用いたグレリン分泌反応のイメージング解析およびELISAを用いたグレリン分泌能の解析を行う。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
研究成果を、国際誌に投稿したが、査読者から多数の追加実験の実施を求められた。現在、指示された追加実験を実施しているが、今年度中に指示された追加実験をすべて終了できなかった。
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| 次年度使用額の使用計画 |
論文を再投稿するための英文校閲費、論文投稿費、実験消耗品等の購入に使用する予定である。
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