| 研究課題/領域番号 |
26460300
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| 研究機関 | 京都府立医科大学 |
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研究代表者 |
野村 健 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (10706790)
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| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| キーワード | ヘミチャネル / パネキシン1 / Panx1 / 機械刺激 / イオンチャネル |
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| 研究実績の概要 |
ヘミチャネルであるパネキシン1（Panx1）は、低浸透圧や静水圧などの機械的な刺激で活性化され、ATPの放出に深く関与していると考えられているが、Panx1 の生理的な役割や機械刺激に対する活性化機構についての詳細は謎である。本研究は、機械刺激に対してどのようにPanx1チャネルが活性化されるのか、その分子機構の解明を目指している。具体的にはHEK293細胞に過剰発現させたPanx1の機能特性および機械刺激に対する応答の解析をパッチクランプ法を用いて検証する。平成26年度は、cell-attached patch clamp単一イオンチャネル電流記録法を用いて、マウスPanx1チャネルの基本的性質（単一イオンチャネルコンダクタンス）を測定した。その結果、単一イオンチャネルコンダクタンスは内向き電流では約20 pSおよび外向き電流では約80 pSという外向き整流性を示した。今後は、機械刺激に対する単一イオンチャネル開閉制御機構をパッチクランプ法を用いて明らかにしていきたい。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
ほぼ順調であるが、機械刺激に対するパネキシン1のゲーティング機構を解明するには更なる電気生理学的な解析が必要である。
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| 今後の研究の推進方策 |
これまでの得られた結果に基づき計画を進め、パッチクランプ法を用いて機械刺激に対する単一イオンチャネル開閉制御機構について詳細な検討を行うと共に、Panx1チャネルの精製を行う。人工脂質二重膜に再構成されたPanx1チャネルの機械刺激感受性についても検討を開始する予定である。
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