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2015 年度 実施状況報告書

始原生殖細胞のエピジェネティックリプログラミングに関与する新規遺伝子の機能解析

研究課題

研究課題/領域番号 26460367
研究機関大阪大学

研究代表者

田代 文  大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (40136213)

研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2017-03-31
キーワード始原生殖細胞 / エピジェネティック制御 / ヒストン / DNAメチル化
研究実績の概要

Ces1遺伝子は、Znフィンガータンパク質をコードし、多能性幹細胞と生殖細胞系列に強く発現しているが、その機能は明らかではない。我々の解析では、Ces1は胎生期には全身に発現し、細胞内の核ヘテロクロマチンに局在していた。
本研究においては、始原生殖細胞のエピジェネティック制御におけるCes1遺伝子の機能を明らかにすることを目的としており、平成27年度は下記の研究を行った。
① Ces1 ノックアウトマウスは、部分的な胎生致死、始原生殖細胞の発生異常、およびそれに伴う出生後の生殖腺の形成不全を示した。Ces1ノックアウトマウスの胎児において全身的なH3K9メチル化レベルの亢進が見られることを確認し、Ces1が胎生期のエピジェネティック制御、特にH3K9メチル化の抑制に関与する可能性が示唆された。
② 胎児のクロマチンを用いたChIP-qPCR解析の結果、ペリセントロメア領域のH3K9トリメチル化レベルがCes1ノックアウトにおいて増加していることが示され、Ces1がヒストンH3K9メチル化に影響し、胎児成長や生殖細胞の分化制御に関与することが示唆された。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

平成27年度に予定していた研究を施行し、Ces1がヒストンH3K9メチル化に関与する可能性を示した。

今後の研究の推進方策

ヒストンたんぱく質の修飾を制御する因子の中には、DNAのメチル化にも影響するものが報告されている。そこで、DNAのメチル化状態によって発現が制御される遺伝子について、Ces1ノックアウトによりDNAのメチル化に異常をきたし、転写活性が変化しているものがないか検討する。方法としては、FACSにより始原生殖細胞を分離、DNA抽出を行い、バイサルファイトシーケンスによりCpGアイランドのメチル化の状態を検討する。

  • 研究成果

    (4件)

すべて 2015

すべて 学会発表 (4件)

  • [学会発表] Znフィンガータンパク質Ces1は、Suv39hに結合してヒストンH3K9メチル化を抑制し、胎児成長や生殖細胞の分化を制御する2015

    • 著者名/発表者名
      松浦 巧、宮崎竜志、宮崎早月、田代 文、宮崎純一
    • 学会等名
      日本分子生物学会
    • 発表場所
      神戸
    • 年月日
      2015-12-01 – 2015-12-04
  • [学会発表] Mouse GTSF1 is essential for secondary piRNA processing in gonocytes2015

    • 著者名/発表者名
      能村卓慈、竹本記章、宮川里美、渡部聡朗、城本悠助、宮東昭彦、金井正美、田代 文、宮崎早月、刀谷在美、中馬新一郎、仲野 徹、宮崎純一
    • 学会等名
      日本分子生物学会
    • 発表場所
      神戸
    • 年月日
      2015-12-01 – 2015-12-04
  • [学会発表] 膵β細胞のインスリン分泌能維持に関与する新規膜タンパクの能解析2015

    • 著者名/発表者名
      小林正樹、田辺光志、宮崎早月、田代 文、倭 英司、宮崎純一
    • 学会等名
      日本糖尿病学会
    • 発表場所
      下関
    • 年月日
      2015-05-21 – 2015-05-24
  • [学会発表] Zac1遺伝子ノックアウトマウスMIN6ベータ細胞株の樹立とその解析2015

    • 著者名/発表者名
      宮崎早月、上田裕紀、田代 文、宮崎純一
    • 学会等名
      日本糖尿病学会
    • 発表場所
      下関
    • 年月日
      2015-05-21 – 2015-05-24

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公開日: 2017-01-06  

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