| 研究課題/領域番号 |
26460387
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| 研究機関 | 金沢大学 |
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研究代表者 |
宝田 剛志 金沢大学, 薬学系, 助教 (30377428)
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| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| キーワード | 間葉系幹細胞 / Runx2 / 転写制御因子 |
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| 研究実績の概要 |
間葉系幹細胞は、骨芽細胞や脂肪細胞等への分化能をもつ幹細胞であるが、個体レベル、特に成体での機能の多くは謎に包まれている。この問題を解決するために、MSC が骨芽細胞に分化する過程に必須の転写制御因子Runx2 に注目し、特定の時期・細胞にて遺伝子欠損させることのできる、Runx2 コンディショナル欠損マウスを世界に先駆けて作製した。本研究では、Runx2 コンディショナル欠損マウスを使用して、従来分かっていなかった「成体個体レベル」での、MSC に発現するRunx2 の生理的役割・病態生理的役割と、Runx2 によるMSC の動態制御機構（どんなときに増殖し、分化するのか？）を分子レベルで明らかとする事を目的としている。本年度においては、解析用のマウス（間葉系幹細胞特異的なRunx2欠損マウス）の作製を開始し、解析用に足りる充分のマウスを得ることに成功した。一部のマウスの解析結果からは、膜性骨化での骨芽細胞分化系譜において重要なMSCの特徴づけに成功した（投稿中）。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
解析用のマウス（間葉系幹細胞特異的なRunx2欠損マウス）の作製を開始し、解析用に足りる充分のマウスを得ることに成功した。
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| 今後の研究の推進方策 |
以下の解析により、従来分かっていなかった、成体個体での間葉系幹細胞が、どのような生理（病態）反応に重要であるのかを検討する。
骨代謝表現型解析：脛骨・大腿骨・脊椎における骨密度をDEXA法により解析する。またマイクロＣＴにより骨構造解析を実施する。さらに、非脱灰薄切標本を用いて骨形態計測（骨構造、骨形成、骨吸収に関するパラメーター測定）を行う。
糖・脂質代謝表現型解析：経時的に体重、体温、摂食量、飲水量、尿量、血糖値、ケトン体、中性脂肪、HbA1c、呼吸商(VCO2/VO2)および消費カロリーの測定を行う。また一定期間飼育後、グルコース耐性テスト(GTT)やインスリン感受性テスト(ITT)を行い、耐糖能およびインスリン抵抗性を野生型マウスと比較するとともに、レプチン、インスリン,アデイポネクチン等のホルモンの血中濃度を測定する。さらに、白色・褐色脂肪組織、肝臓、膵臓、筋肉を摘出し、それらの組織重量を測定するとともに、各種糖脂質代謝制御遺伝子の発現をReal-time RT-PCRや免疫染色により検討する。
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